穴敷扶正升白膏對多次化療小鼠造血及免疫系統的影響

曹大明　路　玫等

曹大明路玫趙喜新王憲齡高希言

(河南中醫學院,鄭州450003)

摘要在對小鼠進行反復多次化療的同時給予扶正升白膏穴位涂敷,并設對照組進行觀察。結果提示:穴敷扶正升白膏不僅能在化療后白細胞減少時使用,而且可以在化療的同時使用,以防止白細胞下降太快或減少過多,其機制是以保護骨髓造血細胞,減輕骨髓有核細胞的損失為基礎的。本法尚能減輕脾臟和胸腺的萎縮,因此可減輕化療對免疫器官的傷害,從而為穴涂扶正升白膏的臨床應用提供科學客觀的依據。

主題詞化療反應/穴位療法白細胞減少/穴位療法胸腺/藥物作用脾/藥物作用穴位貼敷法

我們通過對化療后白細胞下降患者和對環磷酰胺(CY)大劑量(150 mg/kg)一次腹腔注射造成白細胞減少的小鼠應用自制的扶正升白膏穴敷,均收到顯著的扶正升白效果,且證明治療機理是相近的。那么能否在化療的同時采用穴涂扶正升白膏,以預防白細胞下降過多或減輕化療藥物對免疫器官的損傷呢?為此我們又觀察了該療法對反復多次化療小鼠造血及免疫系統的影響,現總結如下。

1材料與方法

1.1動物選擇及分組

選用普通級雄性昆明種(KM)小鼠,體重為20±1 g,籠養3天適應環境后,臨時標記后檢查外周血白細胞總數,由高到低排序,刪除兩級小鼠保留24只,依據分層隨機分組法分為A、B兩組,每組12只,隨機確定A為CY加穴敷扶正升白膏(治療)組,B為CY對照組。

1.2治療處理及模型制備

(1)對各組小鼠用推子剃除背部"大椎"和脊柱兩側"膈俞"至"腎俞"處的鼠毛。

(2)按60 mg/kg的劑量于第1,3,5,7,10天對每只小鼠腹腔注射CY 1次。CY用生理鹽水配制成5 mg/ml。

(3)從第1次注CY后立刻開始,每天上午8點,在A組小鼠剃毛處的"大椎"、"膈俞"、"脾俞"、"胃俞"、"腎俞"等處,涂敷扶正升白膏(人參、當歸、丁香、肉桂、冰片等藥物研極細末,姜汁調糊),B組在相同部位涂敷淀粉糊,下午2點將藥膏擦去,連續11次。

1.3檢測指標及方法

(1)*"外周血白細胞計數:各組小鼠從分組開始,每天在涂敷前,固定專人割尾靜脈采血20 μl,加入0.38 ml的白細胞稀釋液中,搖勻,靜置3 min,查外周血白細胞計數,連續12次。

(2)*"外周血白細胞分類計數:各組小鼠于第12天測白細胞分類計數。

(3)*"股骨髓有核細胞計數:各組小鼠于第12天摘眼球放血處死后,取一根股骨用4號注射針頭吸取3%醋酸溶液10 ml沖洗股骨內全部有核細胞于溶液內,繼用顯微鏡計數全骨腔內有核細胞總數。

(4)*"骨髓細胞分類計數:各組小鼠于第12天處死后,用胸骨鑷壓擠出骨髓,沾一小滴鼠血清混勻,作骨髓涂片,經甲醇固定,用瑞氏染色分類計數。

(5)*"脾臟系數:第12天小鼠稱重處死后,摘取脾臟,即刻稱重并計算脾臟系數(脾重/體重=mg/g)。

(6)*"胸腺系數:第12天小鼠稱重處死后,摘取胸腺,即刻稱重并計算胸腺系數(胸腺重/體重=mg/g)。

2結果及分析

2.1小鼠多次化療期間穴敷扶正升白膏對外周血白細胞計數的影響(見表1)

表1數據顯示,A、B兩組在同一時間進行白細胞計數差異比較,治療組白細胞下降較少,與對照組相比除第5天和第10天差異不太顯著(P>0.05)外,其余各天均有顯著(P<0.05)和非常顯著(P<0.01)性差異,由此說明,短期內對小鼠反復化療的同時用扶正升白膏涂敷能夠防止白細胞下降,減輕化療對造血的損傷。

2.2小鼠多次化療期間穴敷扶正升白膏對外周血白細胞分類的影響(見表2)

由表2可見,治療組與對照組白細胞分類計數經t檢驗,均為P>0.05,提示各類白細胞沒有差異。參照正常組動物白細胞的分類,發現反復多次化療中性粒系百分比相應增多,淋巴相對減少,治療組僅稍優于對照組。

2.3小鼠多次化療期間涂敷扶正升白膏對股骨髓有核細胞總數及骨髓細胞分類的影響(見表3)

表3所示為最后一次注CY的第3天檢測的數據,根據文獻^[1],動態的分析骨髓細胞注CY后的變化,此時骨髓細胞尚未大量增生,治療組骨髓有核細胞較對照組多(P<0.001),說明在反復化療的同時用扶正升白膏穴位涂敷,保護了骨髓有核細胞,這是治療組外周血白細胞損失較輕的基礎。骨髓細胞分類的數據說明治療組與對照組在粒細胞的晚幼、桿狀核、分葉核的百分比差異有非常顯著的統計學意義(P<0.01)。提示白細胞的動態變化的機制是比較復雜的。

2.4小鼠多次化療期間涂敷扶正升白膏對脾臟和胸腺系統的影響(見表4)

脾臟系數,治療組>對照組(P<0.05),可以證明在多次化療期間涂敷扶正升白膏能夠減輕脾臟的萎縮(正常小鼠脾臟系數6.67±1.49見課題實驗Ⅱ)。

胸腺系數,同樣呈現治療組>對照組(P<0.01),說明涂敷扶正升白膏可以減輕小鼠多次化療期間胸腺的萎縮(正常小鼠胸腺系數4.2±0.61)。

3討論

臨床上接受化療的腫瘤患者,在白細胞減少的同時,多表現為脾腎兩虛、氣血雙虧的臨床癥狀。我們根據腎為先天之本,主骨生髓,主藏精;脾胃為后天之本、氣血生化之源等理論,擬調理脾胃,補腎填髓,益氣生血,扶正固本的治療原則,選用脾俞、胃俞、足三里以調理脾胃,和胃止嘔,使脾胃功能強健,水谷精微化源充足,氣血得以補益;取腎俞溫腎益腎,補骨生髓,以利精血之化生;取血會膈俞,以補血和血;取督脈與六陽經之交會穴大椎宣通諸陽經氣,增強機體功能。扶正升白膏由人參、當歸、丁香、肉桂、冰片等藥物組成,諸藥合用可達補益氣血,溫補脾腎,透達經絡之目的。

本研究結果提示:①穴敷扶正升白膏不僅能在化療后白細胞減少時使用,而且可以在化療的同時使用,從而起到防止化療時外周血白細胞下降太快或減少過多的作用。②本方法的升白或減輕白細胞下降的機制是以保護骨髓造血細胞,減輕骨髓有核細胞的損失為基礎的。③化療的同時使用本法能夠減輕脾臟和胸腺的萎縮,因此可以減輕化療對免疫器官的傷害。

該結果佐證了臨床研究的結論,說明穴敷扶正升白膏對化療后白細胞減少的患者是一種療效確切、安全可靠、操作方便的治療方法,具有很好的實用價值。

4參考文獻

1趙喜新.針灸對化療小鼠白細胞動態變化的影響.河南中醫,1996;16(4):216

(收稿日期:1999-08-13,齊淑蘭發稿)