梅毒不同檢測方法的比較

盧光祥等

【摘 要】目的：通過與梅毒螺旋體酶聯免疫吸附試驗（TP-ELISA）的比較，評價其他不同梅毒檢測方法的符合率。 方法：用TP-ELISA法檢測3220人份標本，將陽性88例血清標本分別用梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA），梅毒螺旋體特異抗體凝集試驗（TPPA）法進行復檢比較。結果：TPHA與TP-ELISA符合率為93.18（82/88）%；TPPA與TP-ELISA符合率為93.18（82/88）%；TPHA與TPPA符合率100%（82/82）。結論：ELISA法方法簡便、經濟，可實現操作自動化、客觀化，便于質量控制，但假陽性率高，只可用來初篩梅毒，不能作為梅毒確認試驗。TPHA與TPPA兩種方法都不能實現操作自動化，不便于質量控制和結果儲存，但符合率高，可作為梅毒確認試驗方法。

【關鍵詞】梅毒；梅毒酶聯免疫吸附試驗；梅毒螺旋體血凝試驗；梅毒螺旋體特異抗體凝集試驗；符合率

【文章編號】1004-7484（2014）06-3526-01

近年來，我國梅毒發病率有居高不下趨勢，梅毒血清學檢驗已列入獻血員、臨床患者輸血前后、孕婦、公務員體檢及各種創傷性疾病檢查前常規檢測項目[1]。我院為公務員體檢單位，選擇比較恰當的檢測方法對公務員進行體檢至關重要，檢測梅毒的方法有十多種，為探討梅毒檢測有一個好的組合方法，我們將TP-ELISA法篩選出的88例陽性標本，分別用梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA）、梅毒螺旋體特異抗體凝集試驗（TPPA）兩種不同方法進行復檢比較，評價這三種檢測方法的符合程度，進行檢測方法組合，現報告如下。

1 對象和方法

1.1 研究對象 收集我院2013年門診、體檢中心和病房送檢的經TP-ELISA檢測3220人中陽性標本88份作為檢測評價對象。

1.2 材料和方法

1.2.1 試劑和儀器 試劑TP-ELISA試劑盒為北京萬泰生物藥業股份有限公司產品，TP-TPHA試劑盒為美國美德科學技術公司產品，TP-TPPA試劑盒為日本富士株式會社產品。儀器DNM-9602全自動酶標分析儀由北京普朗新技術有限公司生產，全自動快速立式洗板機由鄭州基波新科技技術有限公司生產，ESCD-CLASSIIBSC生物安全柜由新加坡生產。

1.2.2 方法 試驗方法采取空腹靜脈血3-4ml，分離血清。試驗中設計陽性對照、陰性對照、空白對照，同步進行各項目室內質控物監測，TP-ELISA、TPHA、TPPA的檢測均嚴格按使用說明書操作。

2 結果

3 討論

3.1梅毒是由蒼白螺旋體引起的一種性傳播疾病。梅毒螺旋體是引起人類梅毒的病原體，人是梅毒的唯一傳染源。梅毒有先天性和獲得型兩種，其傳播途徑有三種，先天性梅毒螺旋體通過胎盤由母體傳染胎兒，獲得性梅毒主要經性接觸和血液傳播，輸血感染是血液傳播的方式之一。近年來，我國梅毒的發病人數呈急劇上升趨勢[2]，嚴重危害了人類和社會的健康。梅毒的防治主要在于早發現、早診斷和早治療。因此選擇敏感性及特異性均高、快速的梅毒檢測方法至關重要。

3.2現階段實驗室檢測梅毒的方法有病原學、血清學、基因診斷和腦脊液檢查。其中病原學檢查方法可靠，但易受條件制約，適于科研或教學使用；血清學檢查方法分非特異性抗體檢測試驗和特異性抗體檢測試驗，前者方法簡便，適于早期篩查，后者敏感性強、特異度高，現為梅毒診斷的標準實驗方法，熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS），是所有螺旋體試驗中最敏感的方法，特異性也很高，被認為是檢測梅毒的“金標準”，缺點是不適合療效觀察，且價格昂貴；基因診斷為新檢測手段，具有高靈敏度，但目前國內試劑質量有待改進；腦脊液檢查取樣技術較難，病人難以接受，送檢率低[3]。

3.3梅毒檢測分病原學檢測、非特異性梅毒血清學試驗和特異性梅毒血清學試驗等。梅毒的病原學檢測有暗視野顯微鏡檢查法、鍍銀染色法、直接免疫熒光法（DFA）、聚合酶鏈反應（PCR）等。目前最常用的檢測方法仍是血清學檢測，多為非特異性抗體與特異性抗體聯合檢測[4]。梅毒非特異性抗體實驗：可用性病研究實驗室試驗（VDRL）、不加熱血清反應素試驗（USR）、梅毒甲苯胺紅不加熱血清學試驗（TRUST）、快速血漿反應素試驗（RPR）等檢測。梅毒特異性抗體實驗：可用熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS）、梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）、梅毒酶聯免疫吸附試驗（TP-ELISA）、梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA）、梅毒快速診斷試驗（TP-RT）、梅毒螺旋體化學發光免疫測定（TP-CLIA）、梅毒螺旋體抗體免疫印跡試驗等檢測。盡管檢測方法多樣，不同的檢測方法對于梅毒都有其特殊的臨床診斷價值，但也有其自身局限性。任華愛等[5] 研究表明在梅毒感染的不同時期TRUST 檢出率差別較大。RPR試驗在抗體含量過高時，易出現假陰性反應，即前帶現象（prozone phenomenon），RPR試驗亦存在生物學假陽性反應[6]；TP-ELISA 法優點是可以直接檢測抗梅毒特異抗體IgM，IgG，能對抗體分型，能提示梅毒感染的各階段，具有高特異性和高敏感性，對診斷治療均有益處，缺點是敏感性過高，容易誤診疾病，在患者血清中梅毒特異性抗體低于其試劑檢測限時，就有可能出現假陰性，同時該法也存在著假陽性[7]；TPPA試劑價格較高，檢測時需要將標本倍比稀釋，不利于大批量樣本檢測，且以肉眼判斷結果，原始數據無法保存 [8]；TPHA試劑價格比較高， 不利于大批量樣本檢測，且以肉眼判斷結果，原始數據無法保存， 不便于質量控制。

3.4國家公務員局規定，把TPHA作為公務員體檢方法，我們通過三種方法進行實驗比對，TP-ELISA法只能作為篩查試驗，TPHA、TPPA法聯合檢測可作為診斷梅毒的確認試驗。聯合檢測可為臨床提供準確、及時的診斷依據，可避免誤診、漏診而產生醫患糾紛；聯合檢測還可為預防控制梅毒提供依據，也可為臨床診斷梅毒提供可靠診斷數據。

參考文獻：

[1] 趙成桂， 吳國球， 孫宏偉 現代醫學 （ M odern M edical Journa l）， 2007年 10月， 第 35卷 第 5期

[2] 唐衛明、丁建平、閏紅靜等，中國大陸2001-2006年MSM的性行為特征與HIV現癥梅毒感染現狀的Meta分析〔J〕，中國艾滋病性病，2008，14（5）：471-474.

[3] 隗功浩，梅毒螺旋體實驗室檢測技術與及研究進展，職業與健康，2011，2（27）：202.

[4] 文海燕、張華榮、陳正明、鄭義，梅毒檢測方法的研究進展，中國皮膚性病學雜志，2012（26）365.

[5] 任愛華、唐西懷，三種梅毒血清學方法的比較，醫學檢驗與臨床雜志，2009，20（1）：74-75.

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[8] 馬永娟、王彬、孟慶敏，梅毒四種血清學方法檢測的比較，職業與健康，2010，15（26）：1719.