山苦茶對運動小鼠的肝糖原和丙二醛的影響

覃業亮等

【摘 要】為探討山苦茶提取物對運動小鼠肝糖原和醛二酮的影響。方法 小鼠隨機分為運動對照組和組。蟲草組每天蟲草混懸液灌胃， 對照組給予等量生理鹽水。將30只SD 小鼠隨機分為對照組和服藥組，通過游泳訓練6周后，測定力竭后對照組和服藥組小鼠的肝糖原（LG）、肌糖原（MG）肝（?。┨窃捅∕DA）的生化指標。 結果表明：山苦茶組肝糖原（?。┖匡@著高于對照組（P<0.05）；而丙二醛比對照組含量降低明顯（ P<0.05） 。結論：說明山苦茶具有顯著的抗疲勞效果， 能夠提高小鼠的運動能力。

【關鍵詞】山苦茶；丙二醛；肝糖原；肌糖原；小鼠

【中圖分類號】R587.1 【文獻標識碼】B 【文章編號】1004-7484（2014）06-3468-01

山苦茶俗稱為鷓鴣茶，系大戟科野生桐屬，其主要分布在中國的海南島、及雷州半島一帶。有研究報道，其含有豐富的多種礦物質、氨基酸等，具有清熱解毒、利膽消食等功效，人們習慣把葉子曬干后泡制成茶，具有濃郁的海南地方特色和民族特色[1]。慢性疲勞已成為困擾人們的正常生活、工作，關于茶葉抗疲勞的已有報道表明綠茶、和普洱茶和烏龍茶等等，具有較好的抗疲勞作用[2]；本文以山苦茶作為原料，通過對運動小鼠的各項生化指標檢測，探討山苦茶對其作用效果。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 雄性昆明種小鼠， 體重25～ 30g， 由中山大學實驗動物中心提供。按實驗組分籠飼養， 同時購買基礎飼料，自由進食和飲水，經過1周適應期后進行實驗。

1.2 實驗材料 材料為海南野生類型山苦茶， 由海南省當地農民提供。山苦茶提取物的制備將天然植物海南野生山苦茶加水浸泡1小時，煮沸2 次 每次1 h， 過濾，合并濾液，乙醇沉淀，靜置48 h，回收濾液中的乙醇，濃縮濾液，使得每毫升濾液含生藥0.10 g[2]。

1.3 實驗方法

1.3.1 絞股藍提取物的制備將天然植物海南野生絞股藍加水浸泡1 h， 煮沸2 次， 每次1 h， 過濾，合并濾液，乙醇沉淀，靜置48 h，回收濾液中的乙醇，濃縮濾液，使得每毫升濾液含生藥0.10 g[3]

1.3.2 動物的給藥和分組 將實驗小白鼠隨機分成2組：運動訓練對照組、運動訓練山苦茶預處理組， 并按每籠15只分籠飼養。給藥組采用灌胃法給藥， 按生藥1.5 g/kg.d 的劑量進行灌胃（根據實驗動物學和中藥藥理學， 按照60kg 成人用量9.3 倍進行計算）， 對照組灌胃相應劑量的生理鹽水作為安慰劑。每天1次，連續6周。

1.3.3 訓練方案訓練組采用遞增負荷式進行4周的游泳訓練，每周游6 d，水溫（31±1）℃，水深35cm。第1周每天游泳30 min，以后每周遞加10min，至第6周游泳每天80min，第6周訓練結束后處死，在處死前稱重， 稱重后進行最后1 次力竭性游泳， 記錄游泳時間。力竭判斷的標準為：當小鼠游至連續3 次沒入水底，每次超過10 s，且放在平面上無法完成翻正反射視為力竭疲勞[4]。力竭運動后即刻處死。采用斷頭法采取血樣后，用離心機以3 000 r/min 速度離心10 min，分離血清，檢測 MDA. 然后立即取出肝臟和骨骼肌組織，置于冰生理鹽水中洗凈血液，檢測LG和MG。

1.3 測試指標

根據實驗研究的需要， 選擇肝糖原（LG）、肌糖原（MG）肝（?。┨窃捅∕DA）的生化指標等作為測試指標，實驗組和對照組進行對比測試.。

1.3.1 ?。?肝） 糖原的測定 蒽酮比色法： 取出肝臟和骨骼肌組織， 用0.9%NaCl 溶液沖洗后， 再用濾紙吸干， 準確稱取100g ， 放入盛有3mL30% KOH 的試管中， 置沸水浴30min， 取出冷卻后， 將其轉移至50mL 容量瓶中， 用水多次洗滌試管， 一并收入容量瓶， 加水至刻度， 搖勻待用。向樣品管中加入1.0mL 去離子水， 空白管中加入2.0mL 去離子水， 標準管中加入2.0mL 標準葡萄糖液， 再向各試管中加入4.0mL 蒽酮比色液（ 當日配制） ， 搖勻， 置沸水浴10min， 冷卻后在620nm 波長處測吸光值（ A） ， 空白管調零。

肌糖原含量（ g/100g 肌肉） = （ A 樣品管/A 標準管ⅹ標準葡萄糖含量（mg）/1000ⅹ稀釋倍數ⅹ100ⅹ0.9

上式中， 標準葡萄糖含量為0.10mg ； 稀釋倍數為100； 0.9 為此法測得的葡萄糖含量換算成糖原含量的系數。

1.3.2 血丙二醛含量的測定： 采用硫代巴比妥酸法。分離血清， 按照試劑盒說明操作， 測定血丙二醛含量。

1.4 統計學分析

用SPSS12.0 統計軟件對所測數據進行處理， 所有實驗數據以均值±標準差（x±s）表示，均數間比較采用析因方差分析，P<0.05 有統計學意義。

2 結果

表2 絞股藍對小鼠肝糖原和肌糖原的影響

組別 組數 肝糖原/（mgg-1） 肌糖原/（mg·g-1） 丙二醛nmol#ml-1）

對照組 15 3.05±4.16 1.06±1.02 4.93±0.73

山苦茶組 15 4.97±3.56* 2.32±0.94* 3.28±0.84*

* 與對照組比較P<0.05

3 討論

目前尋找一種既能增強運動員的體能、延緩運動疲勞， 又能含有違禁成份以及毒副作用的藥物或是食物，是現代運動醫學界非常關注且熱門的研究課題。運動性疲勞主要是指由運動引起身體能力下降的現象， 其產生的機制非常復雜， 有代謝產物堆積、能量耗竭、離子代謝紊亂、氧自由基損傷、保護性抑制等等多種學說。本文實驗結果表明，山苦茶能夠使運動小鼠無氧糖酵解增強，當機體缺氧或劇烈運動使肌肉局部血流相對不足時， 能量主要通過糖酵解獲得。

運動能量重要的來源之一是糖原，糖原的儲備量的提高則有助于提高運動耐力和延緩疲勞的產生，而肌糖原則是大強度運動的主要能量來源，在長時間大強度運動中， 運動前肌糖原的儲量可以決定達到力竭的時間，并直接影響耐力訓練和比賽的運動能力，因而，大多數專業人士認為 對一些以糖醇解供能為主的運動項目，賽前足夠的肌糖原儲備也是非常必要的，因為若肌糖原儲量過低就會抑制乳酸生成和降低無氧代謝能力；肝糖原對運動能力的重要性反映則表現在耐力運動中， 在長時間亞極量的運動過程中，肌糖原首先被動員消耗，隨著肌糖原的消耗的不斷增加，為維持血糖水平，肝糖原分解加快，肝臟釋放葡萄糖入血，導致肝糖原儲備減少[5]. 本實驗結果顯示，山苦茶組小鼠肝糖原和肌糖原的含量明顯高于各自的對照組，提示給小鼠服用山苦茶，對小鼠骨骼肌、肝細胞膜的正常結構和機能可能具有保護作用，可明顯增加肝糖原及肌糖原的含量，增加其體內糖的儲備量，以保證中樞神經系統、運動肌及紅細胞等組織能量的充足供給，從而提高運動能力以及延緩運動性疲勞的發生。

近年研究表明， 運動造成骨骼肌脂質過氧化可導致肌纖維膜及線粒體膜等生物膜損傷， 從而引發細胞代謝和功能紊亂， 使肌肉工作能力下降進而產生疲勞[6]。本實驗表明， 游泳運動可使機體血丙二醛含量有所增高， 提示機體脂質過氧化增強。脂質過氧化多為自由基（ free radical） 攻擊生物膜造成的后果。山苦茶能顯著降低血丙二醛含量， 說明其有抗氧化作用。

參考文獻

[1] 劉國民.海南鷓鴣茶的民族植物學研究[J].海南師范大學學報，2007，20（6）：167.

[2] 梁勇，邵宛芳.云南綠茶的抗疲勞作用研究[J].食品工業科技，2011，32（1）：271.

[3] Rumley AG， Pettigrew AR， et al. Serum lactate dethydrogenaseand creatine kinase during marathon training [J]. Br J Sports Med，1985，19（13）：152-155.

[4] 龍碧波.海南野生絞股藍抗運動性疲勞的實驗研究[J].現代預防醫學.2009 ，36 卷第4 期712-716.

[5] 龍碧波. 絞股藍與運動性疲勞[J]. 中國臨床康復， 2004， 8（30）： 6726-6727.

[6] Vol lestad NK， Sejerst ed OM. Biochemical correlat es of fat igue. A brief review[ J] . Eur J Appl Physiol Occup Physiol， 1988， 57（ 3） ： 336-347.