小柴胡軟膠囊制備工藝及質量標準的研究

鐘彩金　劉俊紅　邱建波　張秀娟　邱燕祥

摘 要：本文對小柴胡軟膠囊制備工藝進行了研究，提出了降低生產成本，提高生產效率的方法，為患者提供多一種劑型選擇；通過建立和完善小柴胡軟膠囊質量標準，能有效控制產品質量。

關鍵詞：小柴胡軟膠囊；制備工藝；質量控制方法

中圖分類號：G917 文獻標識碼：A 文章編號：1005-1422（2015）05-0105-03

《中國藥典》2010年版原小柴胡片的質量標準【1】增加了君藥柴胡、臣藥姜半夏和佐藥黨參的鑒別項，使質量更可控和合理；因原工藝提取物料有一定的揮發性和熱不穩定性成分入藥，在實踐過程中發現所得干浸膏由于含有較多的糖類等物質，易吸濕，受熱易軟化，而且片劑制備工藝復雜，改成軟膠囊后，較原劑型更能與其工藝相適應，生產成本降低，生產效率提高；軟膠囊劑較片劑的外觀美觀，質量穩定，易于服用，崩解、釋放迅速，生物利用度高，患者更易接受。適合工業化大生產的新劑型小柴胡軟膠囊劑，為患者提供了更多的劑型選擇。

一、制備工藝的研究

1.工藝內容物處方

處方：柴胡 355.7g 姜半夏 177.5g 黃芩 133.5g 黨參 133.5g 甘草 133.5g 生姜 133.5g 大棗

處方來源是根據《中國藥典》2010年版原小柴胡片的處方進行調整而得，根據目前軟膠囊劑的生產技術水平，軟膠囊劑的內容物含固體量一般不宜超過50%，而在45%左右在大生產上較易于控制，每粒裝量一般在0.65g以下，經研究擬將相當于4片片劑的藥材量制成5粒軟膠囊，每粒含藥材量為1.2g，規格為每粒裝0.62g，每次服用量為5～7粒，原片劑處方藥材總量為1502g，可制成1251粒軟膠囊（1502/1.2=1251），則制成1000粒軟膠囊的處方中各藥應為原片劑處方的1000/1251倍，即為上述小柴胡軟膠囊的處方。

2.制法

以上七味，黨參66.7g及甘草粉碎成細粉，取142.2g采用濕熱滅菌法滅菌，備用，其余細粉與剩余黨參及柴胡、黃芩、大棗加水煎煮二次，第一次加7倍水，第二次加6倍水，每次煎煮1.5小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至適量；姜半夏、生姜照流浸膏與浸膏劑項下的滲漉法（附錄 I O），用70%的乙醇作溶劑，浸漬24小時后，以每分鐘1～3ml的速度緩緩滲漉，收集漉液1333.3ml，回收乙醇，與濃縮液合并，減壓濃縮至相對密度為1.30～1.40（60℃）的稠膏，加入上述細粉，混勻，干燥，研細，加輔料適量，混勻，壓制成1000粒膠丸，即得。

3.丸芯配制工藝考查

實驗結果顯示，當小柴胡軟膠囊藥粉為45.0g，助懸劑蜂蠟的用量為4.5g （即4.5%），乳化劑大豆卵磷脂的用量為3.0g（即3.0%），加色拉油至100g時，可滿足本產品的工藝及膠丸內容物物理穩定性方面的要求。

4.制丸工藝

（1）配制膠液。

【處方】明 膠 100g 甘 油 50g 尼泊金乙酯 0.5g 三氧化二鐵 1.25g 純化水 100g

【制法】先將尼泊金乙酯溶于二倍量的乙醇中；三氧化二鐵加6倍量純化水，研磨均勻，備用。取明膠、甘油及剩余水置不銹鋼夾層鍋內密封，在真空下攪拌，等混勻后，加熱至75℃使鍋內明膠熔化。緩緩放去鍋內真空，在連續攪拌下加入三氧化二鐵漿液、尼泊金乙酯醇液，待攪拌均勻后減壓濃縮至水分約30%，取出，濾過，保溫備用。

（2）壓丸，采用旋轉模壓法進行壓丸。

（3）定型干燥、洗丸、揀丸、包裝。新制的軟膠囊在溫度20～24℃，相對濕度30%以下的條件下在定型轉籠中定型干燥4小時以上， 用乙醇洗去膠丸外層蠟質，揮去乙醇，再送入干燥房內，同條件下干燥約16小時，直至膠丸干爽，硬度適中，取出，挑去不合格丸，用鋁塑泡罩包裝，外加鋁袋包裝，即得。

按以上工藝進行三批試生產研究，結果所得產品的各檢查項目均符合要求。

5.小結

綜上所述，小柴胡軟膠囊生產工藝確定為：以上七味，黨參66.7g及甘草粉碎成細粉，取142.2g，用熱壓法滅菌，備用，其余細粉與剩余黨參及柴胡、黃芩、大棗加水煎煮二次，第一次加7倍水，第二次加6倍水，每次煎煮1.5小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至適量；姜半夏、生姜照流浸膏與浸膏劑項下的滲漉法，用70%的乙醇作溶劑，浸漬24小時后，以每分鐘1～3ml的速度緩緩滲漉，收集漉液1333.3ml，回收乙醇，與濃縮液合并，減壓濃縮至相對密度為1.30～1.40（60℃）的稠膏，加入上述細粉，混勻，70℃下干燥，粉碎過100目篩，所得細粉加處方量4.5%的蜂蠟和3.0%的大豆卵磷脂，并加適量色拉油調整每粒重量為0.62g，研磨配制成具有適宜流動性、勻質的囊芯液，壓丸，每丸裝0.62g，干燥，包裝，即得。

二、三批樣品中試工藝研究

為進一步驗證該產品的生產工藝，投料進行三批次中試生產研究，每批按10倍處方量進行投料。

小柴胡軟膠囊制備工藝及質量標準的研究

1.設備與藥品

設備：TQ-6直筒式提取罐，DJE-2000三效濃縮蒸發器，CT-C-II熱風循環烘箱，30 B萬能高效粉碎機組，FS0.6×1.5方形振蕩篩、RJNJ-2水浴式化膠罐，RJWJ-II軟膠囊機，RJWG軟膠囊轉籠干燥機，DPP-250II自動泡罩包裝機等。

藥品：柴胡、姜半夏、黃芩、黨參、甘草、生姜、大棗，蜂蠟、大豆卵磷脂、色拉油、明膠、甘油、三氧化二鐵、尼泊金乙酯，乙醇等。

2.方法與結果

（1）中試方法。處方中各藥按10倍處方量配齊，按上述擬定的制備方法制得膠丸。

（2）中試結果。按上述擬定的制備工藝條件，生產三批中試樣品，測定各工藝過程中收率，結果如表1。

3.結果分析

由以上三批樣品中試結果可知，小柴胡軟膠囊生產各工藝過程：提取粉碎、囊芯液配制、制丸等收率數據較為穩定、物料平衡，表明該工藝是符合生產要求的。

三、質量標準研究

1. 方法與結果

（1）黃芩、甘草的薄層鑒別：因工藝無質的變化，故參照2010版《中國藥典》中原小柴胡片項下黃芩、甘草的薄層鑒別方法[1]。

（2）如法進行試驗，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置，顯相同顏色的斑點。取缺黃芩或甘草的陰性樣品進行對照試驗，結果陰性對照在與黃芩或甘草對照藥材色譜的相應的位置上無干擾。

（3）柴胡的薄層鑒別。取本品內容物2g加甲醇40ml，超聲20分鐘（59kHz，45W），濾過，濾液濃縮至5ml，作為供試品溶液。取缺柴胡的陰性樣品，同法制得陰性對照溶液。另取柴胡對照藥材1g，同法制得對照藥材溶液。分別吸取上述三種試液5μl，點于同一硅膠G板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（8∶2∶1）展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，60℃加熱至斑點清晰，日光及紫外燈（365nm）檢視，可見供試品溶液在與對照藥材溶液斑點相同位置呈相同顏色斑點，而缺柴胡的陰性樣品色譜在相應位置上無干擾。

（4）黨參的薄層鑒別（新增）[2]：取本品內容物5g，加正丁醇20mL，超聲處理20min（59kHz，45W），濾過，濾液濃縮至0.5mL，作為供試品溶液。另取黨參對照藥材1g，同法制得對照藥材溶液。按處方配比，取除黨參外的其他藥材按工藝制成內容物，再按供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液。照薄層色譜法（《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄VI B）實驗，吸取上述三種溶液5～10uL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-乙醇-水（15∶3∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點，而陰性對照無此斑點。

（5）姜半夏薄層色譜鑒別（新增）[3]：取本品內容物10g加甲醇50mL，加熱回流30min，濾過，濾液濃縮至約0.5mL，作為供試品溶液。 另取姜半夏對照藥材3g，同法制得對照藥材溶液。按處方配比，取除姜半夏外的其他藥材按工藝制成內容物，再按供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液。照薄層色譜法（《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄VI B）實驗，吸取上述四種溶液各10uL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-冰醋酸（10∶7∶0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點，而陰性對照無此斑點。

2. 含量測定

本品由小柴胡片劑改劑型而得。原2010版《中國藥典》小柴胡片劑標準項下已有黃芩苷含量測定的指標。故本品參照2010版《中國藥典》第509頁黃芩苷含量測定方法[1]，該法操作簡單、重現性好、專屬性高，可作為含量測定的方法。其方法學研究如下。

（1）檢測波長的確定：參照文獻[1]選用315nm為檢測波長。

（2）流動相的確定：參照文獻[1]，選用甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）為流動相，經過試驗，選用甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）時，樣品峰形對稱，理論板數按黃芩苷峰計算不低于3000。黃芩陰性樣品溶液在相同色譜條件下未見有干擾色譜峰。

（3）供試品溶液制備：取裝量差異項下的內容物，精密稱定約0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30min，放冷，再稱重，用70%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液5ml，用70%乙醇稀釋，定容至10ml，即得。

（4）對照品溶液制備：取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加70%乙醇制成每1ml含黃芩苷60μg的溶液，即得。

（5）線性關系考察。精密吸取濃度為0.061μg/μl的黃芩苷對照品溶液2.5μl 、5.0μl、 7.5μl、10.0μl、15μl、20.0μl，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，記錄對照品峰面積， 以注入的對照品溶液所含黃芩苷的含量為橫坐標（X）， 對照品峰面積的積分值為縱坐標（Y）， 繪制標準曲線，求得回歸方程為： Y=6997+6.433e+005X， R=0.9998。結果表明， 注入的對照品溶液黃芩苷在0.1525μg～1.22μg間呈良好線性關系。

（6）精密度考察。取同一供試品，按[含量測定]項下方法重復測定5次，試驗結果平均峰面積為336657，峰面積的RSD為0.52% 。由此可知儀器的精密度符合要求。

（7）穩定性考察：取同一批樣品，按樣品制備方法制備供試品溶液，精密吸取10μl，間隔2小時測定其含量，測定供試品溶液峰面積RSD為0.77% （ n=5）， 結果表明供試品溶液在10h內穩定。

（8）回收率考察：采用加樣回收法，分別精密稱取已知含量（9.934mg/g）的樣品適量，分別加入0.061ug/ul的黃芩苷對照品溶液1ml使其含量為100%，按樣品測定方法制備供試液，依法測定，結果平均回收率=99.83%（n=6），RSD=1.29% 。由上述結果說明方法回收率較好。

（9）樣品測定：分別取三批小柴胡軟膠囊，按樣品制備方法制備樣品。分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，以外標法進行測定。結果140801批， 140802批140803批中黃芩苷的平均含量（ mg/粒 ）分別為6.363， 5.702， 6.056。

四、結論與討論

鑒別方法項下樣品和供試品色譜行為良好，特征斑點明顯，專屬性強，可作為小柴胡軟膠囊的鑒別標準。

含量測定方法學考察項目指標均達到要求，證明該含量測定方法可行。參考原標準中小柴胡片的黃芩苷限量，即本品每片（每片相當于總藥材1.5g）含黃芩以黃芩苷計，不得少于含量2.0mg，同時考慮到藥材的來源并參考三批樣品的含量測定的結果，暫定小柴胡軟膠囊中黃芩苷的限量標準，即本品每粒（相當于總藥材1.2g）含黃芩以黃芩苷計，不低于2.0mg/粒，我們將在生產中繼續積累相關數據，制定更為合理的含量限度。

參考文獻：

[1]中國藥典委員會. 中國藥典（一部）[M]. 北京：中國醫藥科技出版社，2010.

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[3] 蔣俊春.仙術健胃膠囊中半夏的薄層色譜鑒別方法[J].中國中醫藥現代遠程教育，2010（16）.

責任編輯 陳春陽