泰州地區羊支原體肺炎流行病學調查

解慧梅　蘇志國　任寶波

摘要：對泰州地區36家羊場開展支原體肺炎流行病學調查，發病嚴重的病例進行剖檢，收集的207份臨床樣本（肺臟和鼻腔棉拭子）均進行細菌和支原體培養。結果表明：207份臨床樣本中均分離到支原體菌株，湖羊的發病率明顯高于其他品種，3月齡以下的羔羊發病率明顯高于其他年齡段羊，此結果為泰州地區羊支原體肺炎的防控提供了科學依據。

關鍵詞：羊；支原體肺炎；流行病學調查；泰州

中圖分類號： S858.265 文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2015）03-0194-02

羊支原體性肺炎又稱羊傳染性胸膜肺炎，是由絲狀支原體引起的一種高度接觸性傳染病。該病為引起綿羊和山羊咳嗽、氣喘、漸進性消瘦以及肺間質增生性炎癥的呼吸道傳染病[1]。胡景韶等首次分離到國內1株綿羊支原體，證明我國存在該病原[2]。本病在我國云南、四川、甘肅、寧夏、新疆、河北等地均有報道[3-5]，尚未見有關江蘇羊支原體肺炎的研究報道。羊支原體性肺炎是威脅羊養殖的重要傳染病，一年四季均可發生，冬春季節發病率明顯上升[3]。隨著泰州市養羊業的快速發展，羊支原體性肺炎的感染給養羊業構成了更大威脅。為給羊傳染性支原體肺炎的防治提供必要的流行病學資料，筆者于2013年冬至2014年春對泰州地區羊患支原體性肺炎進行了調查。本研究采用回顧性調查與現場調查相結合的方法，針對發病原因、發病特點、臨床發病率、病死率等情況進行調查。

1 材料與方法

1.1 調查對象和內容

在泰州市高港區、海陵區、姜堰區、泰興市、靖江市和興化市6個地區的主要羊場進行羊支原體性肺炎流行病學調查。調查內容包括發病品種、發病年齡、發病率、病死率、臨床癥狀、免疫接種情況等。對發病嚴重的羊進行病理剖檢、支原體培養。

1.2 方法

1.2.1 樣本 處死具有咳嗽、呼吸困難、鼻孔流漿液性或膿性鼻液等癥狀的病羊并進行剖檢，觀察病理變化，采集鼻腔棉拭子和肺臟，低溫條件下送至實驗室進行支原體分離鑒定。

1.2.2 培養基 FM-4 培養基[6]。

1.2.3 病原分離培養

將鼻腔棉拭子接種于FM-4培養基。肺臟樣本取健患交界處組織0.2 g，放入2 mL FM-4培養基中勻漿，3 000 r/min離心 6 min，用0.45 μm濾器過濾上清液，取0.2 mL濾液接種于裝有1.8 mL FM-4液體培養基的試管中進行倍比稀釋，稀釋到10-7，全部放入37 ℃、5% CO2培養箱培養4～5 d，若有支原體生長培養基會變為橙黃色，將其轉種于FM-4固體培養基進行培養，經過純化得到純培養物。

2 結果與分析

2.1 不同品種羊支原體肺炎發病情況

[JP+1]采用走訪方式對泰州地區36家羊場進行羊支原體肺炎流行病學調查，主要品種包括波爾山羊、白山羊、湖羊，其中波爾山羊場3家、白山羊場5家、湖羊場20家、[JP+1]混養8家，發現各羊場的羊均有不同程度發病。不同品種的羊均可發生支原體性肺炎，湖羊的發病率明顯高于波爾山羊和白山羊（表1）。

2.4 臨床癥狀

羔羊通常全群發病。發病初期羊明顯食欲不振，精神沉郁，體溫升高，鼻孔流出清亮的漿液性鼻液，咳嗽。發病中后期病羊表現為明顯呼吸困難，清晨劇烈咳嗽，可見連續性痙攣性咳嗽，鼻液多轉為黏液性或膿性，體溫升高至40 ℃ 以上，食欲銳減，迅速消瘦，部分病羊可見流淚、眼瞼腫脹，并有膿性分泌物。這時病羊開始出現胸膜肺炎變化，叩診有實音區，聽診呈支氣管呼吸音和摩擦音，按壓胸壁表現敏感，疼痛。最后病羊倒臥，極度衰弱委頓，常發生臌脹和腹瀉，調查中有些被誤診為腹瀉病。發病羊喜擠臥圈舍角落不愛走動，加劇羊支原體肺炎傳播。一旦出現本病，傳播迅速，個別羊場羔羊最高發病率達70%左右，一般病程8～15 d，個別羊病程可長達1個月以上。發病的前8～12 d每天死亡率在5%以上，隨后病死率逐漸降低，最終病死率在50%以上。

2.5 病理剖檢變化

取發病羊進行病理剖檢，病變多發生在胸部，胸腔常有淡黃色液體，其中有纖維蛋白凝塊。病變主要在肺臟，其他器官不明顯。肺呈暗紅色，間質增寬，肺門淋巴腫大出血，肺臟形成不同區域局灶性病變，主要發生在尖葉、心葉、中間葉，病灶大小不等，形狀不規則，呈紫紅色，質地堅硬，與周邊肺組織界限明顯。切開氣管和肺組織時流出帶泡沫的黏液。個別嚴重病例胸膜粗糙變厚，肺部表面呈灰白色，并有黃白色纖維蛋白片膜附著。急性病例還可見肝、脾、腎腫大，膽囊腫脹，以及腎臟膜下小點溢血。病程延長者肺肝變區機化，結締組織增生，甚至有包囊化的壞死灶。

2.6 細菌培養

無菌操作取肺臟實質接種于血清營養瓊脂和伊紅美蘭瓊脂培養基、肉湯培養基，經37 ℃培養24 h，無任何細菌生長。

2.7 支原體培養

無菌操作取較嚴重的207份樣本進行支原體分離培養，用改良FM-4液體培養基，經37 ℃、5%CO2培養箱培養4～5 d，207份樣品培養基均由紅色逐漸變為橙黃色，菌液澄清透明、無菌膜、無渾濁現象。把支原體轉種到改良FM-4固體培養基，經37 ℃、5%CO2培養箱培養5～7 d，即可看到針尖大小乳白色菌落，放大鏡下可看到中間隆起、邊緣整齊、不透明、分散或聚集的圓形菌落，隨著培養的繼續，菌落逐漸變大，由此可判斷207份樣本均為羊支原體感染。

3 結論與討論

羊支原體性肺炎是由絲狀支原體亞種引起的一種高度接觸性傳染病，在臨床癥狀和病理變化上，與羊巴氏桿菌病很相似，但病料染色鏡檢，觀察到細小的多形狀性菌體，而非兩極著色的卵圓狀巴氏桿菌。有些病例會出現腹瀉癥狀，要注意與羊巴氏桿菌病和大腸桿菌病的鑒別診斷，以免發生誤診。近年來的研究結果表明，引起羊支原體性肺炎的病原是綿羊肺炎支原體和絲狀支原體亞種。綿羊肺炎支原體既可感染山羊也可感染綿羊，絲狀支原體亞種只感染山羊。本次調查發現，泰州地區山羊與綿羊均有感染發病，而綿羊的發病率明顯高于山羊，說明泰州地區主要流行的為綿羊肺炎支原體。

本次調查的部分養殖戶表示曾采用山羊傳染性胸膜肺炎滅活疫苗進行預防接種，但支原體性肺炎仍有發生，預防效果不明顯。究其原因可能是，泰州地區主要流行綿羊肺炎支原體，而采用的疫苗多為山羊支原體山羊肺炎亞種，對綿羊肺炎支原體沒有免疫保護性。這亦可解釋調查中綿羊（湖羊）患病率和病死率均高于山羊的現象。

羊支原體肺炎主要通過呼吸道排出病原進行傳播，接觸性、傳染性很強。一旦發現該病，應及時對患病羊進行隔離，對廄舍、用具等進行消毒，對尚無明顯癥狀的羊逐頭檢查，有疑似感染者及時隔離觀察?？蛇x用對支原體和絲狀支原體亞種均有敏感性的藥物進行治療，同時對健康羊進行緊急預防免疫接種，有效控制羊支原體肺炎疫情的蔓延。

羊支原體性肺炎是威脅羊養殖的重要傳染病，病羊和帶菌羊是主要的傳染源，隨著養羊業的發展，科學的飼養管理和疫病防治越來越凸顯出重要性，在加強科學飼養管理，冬季做好衛生及保溫工作之外，為杜絕外疫，提倡自繁自養，對新引入的羊要執行嚴格的檢疫制度，進行隔離檢疫，觀察半個月以上確定無病并進行必要的免疫預防后，才能引種混群飼養。

參考文獻：

[1]Carmichael L E，George T D，Sullivan N D，et al. Isolation，propagationand characterization studies of an ovine Mycoplasma responsible for proliferative interstitial pneumonia[J]. Cornell Vet，1972，62（4）：654-679.

[2]胡景韶，胡誠隆，蔣學良，等. 一種由支原體感染的綿羊增生性間質性肺炎的研究[J]. 中國獸醫雜志，1982（5）：2-6.

[3]李 劼，楊增岐，剡根強，等. 新疆石河子地區綿羊支原體肺炎流行病學調查[J]. 動物醫學進展，2005，26（12）：109-110.

[4]Guo H. Serological investigation on Mycoplasma oviovipneumoniae in Qinghai Province[J]. Animal Husbandry and Feed Science，2009，1（4/5）：34-35.

[5]逯忠新，鄧光明，梁桂香，等. 羊肺炎支原體病調查[J]. 中國獸醫科技，1993，23（9）：15-16.

[6]張 莉，王作艷，孫繼國，等. 綿羊肺炎支原體的微生物學特性的研究[J]. 河北農業大學學報，2003，26（3）：221-224.

[7]畢丁仁，王桂枝. 動物霉形體及其研究方法[M]. 北京：中國農業出版社，1998：83-92.