金骨蓮組方中主藥對骨關節保護機理概況

曾　樂,劉　毅,熊華章,鄒　剛

(遵義醫學院附屬醫院骨一科,貴州 遵義　563003)

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金骨蓮組方中主藥對骨關節保護機理概況

曾樂,劉毅,熊華章,鄒剛

(遵義醫學院附屬醫院骨一科,貴州 遵義563003)

[摘要]骨性關節炎是一種可以發生在人體各個關節部位不可逆性的退行性疾病。目前對骨性關節炎的機理認識不夠完全，因而有效的預防、治療措施并不多，到了骨性關節炎晚期，患者不得不接受具有危害性的醫療措施。金骨蓮組方因其在骨關節炎方面獨特的保護作用，為探索保護骨關節提供了更多的可能。

[關鍵詞]骨關節；金骨蓮；主藥；保護

中醫無“關節炎”病名記錄，根據其臨床癥狀可歸屬于“痹證”范疇。中醫認為其發病機理屬肝腎虧虛，經脈失養，筋骨虛損，筋絡阻滯，不通則痛，故臨床治療以補益肝腎，溫通經絡，化瘀除濕，散寒止痛為主。金骨蓮組方在《本草圖經》《滇南本草》早有記載，主藥由金鐵鎖、大血藤、八角楓、漢桃葉、透骨香組成，具有消炎、止痛、肌松、軟骨基質保護作用。

1金鐵鎖對骨關節炎的作用

中醫廣泛應用金鐵鎖于筋骨疼痛、排膿消癰，更是國藥云南白藥的重要組分。

許建陽等[1]使用金鐵鎖水煎浸膏在對利用福氏完全佐劑建立的大鼠痛風性骨關節炎模型研究中發現，相比消炎痛(吲哚美辛)金鐵鎖水煎浸膏可以大大提高大鼠的痛閾，同時測定實驗中大鼠血清中NO以及NOS含量，發現大鼠血清中NO以及NOS含量明顯降低，從而達到止痛的效果且與西藥吲哚美辛組止痛效果沒有明顯區別，但是該研究中并沒有對金鐵鎖具體通過什么樣的機理發揮止痛作用進行闡明。國外有研究證實軟骨細胞誘生型一氧化氮合酶(iNOS)在發生骨性關節炎時表達明顯上調，促進生物體內NO含量增加[2]。而NO能夠抑制蛋白多糖合成[3]，影響軟骨基質代謝，促進關節軟骨退變。相反，抑制iNOS表達的小鼠骨性關節炎模型骨關節炎進展可以得到減慢[4]。在不同時間節點采樣，以硝普鈉為NO供體培養兔關節軟骨細胞，可以發現高質量分數以及更高質量分數的NO能夠導致軟骨細胞損傷甚至死亡[5]。由此可見，iNOS以及產物NO在關節炎止痛、影響關節炎發生、發展確實存在作用，而金鐵鎖可以通過這一途徑對關節軟骨產生保護作用。通過對大鼠腦組織中5-羥色氨酸、5-羥吲哚美辛、5-羥色胺、L-去甲腎上腺素、多巴胺進行研究，王美娥等[6]發現金鐵鎖水煎液可以增加5-羥色胺以及它的下游產物5-羥色氨酸、5-羥吲哚美辛在大鼠腦組織的合成或釋放，提高利用率，上調大鼠的痛閾從而達到止痛的效果，由此可以看出金鐵鎖水煎浸膏可能存在的作用途徑并不止一條。在疼痛方面，有一類原癌基因c-fos被認為與疼痛密切相關，Abbadie等[7]以佐劑性關節炎大鼠模型為基礎，發現受到傷害性刺激的大鼠脊髓L3～4的 c-fos基因表達產物fos蛋白較不受傷害性刺激大鼠明顯升高。而使用完全無痛劑量嗎啡可以降低fos樣免疫反應陽性細胞總量[8]。說明疼痛與c-fos基因存在相關性，可能是大鼠對傷害性刺激的一種防御反應。有研究觀察到c-fos基因往往在疼痛時被激活，伴隨體內合成的強啡肽含量升高可以達到鎮痛的作用，王學勇等[9]研究金鐵鎖總皂苷時，發現金鐵鎖總皂苷能夠對c-fos基因表達產生影響，從而影響c-fos基因在下丘腦、脊髓、滑膜的總量且一定范圍內金鐵鎖總皂苷劑量越大，對c-fos表達的抑制作用越明顯，從分子生物學水平部分說明了金鐵鎖水煎浸膏止痛機理。田均勉[10]對金鐵鎖的化學成分進行了較為深入系統的研究，共分離出17種三萜皂苷、11種環肽以及其他52種有機化合物。當前的研究普遍認為金鐵鎖有效成分是提取的金鐵鎖總皂苷。研究中發現總皂苷對合成NO有抑制作用，同時也可以抑制血小板聚集，減少花生四烯酸的合成，證明金鐵鎖總皂苷在抗炎、活血化瘀、止痛方面確實存在獨特效用[10]。

2大血藤對骨關節炎的作用

大血藤具有“治筋骨疼痛、促腰膝”、止痛通經、清熱解毒的作用，常常被用來治療風濕性、類風濕性疾病。黃淑鳳等[11]研究苯酚膠漿盆腔炎模型大鼠時，發現大血藤可以降低血清中血栓素TXA2、增加血清前列環素PGI2含量，TXA2可以促進血液凝集，PGI2則能夠提供抗凝的性質，通過調整血液中TXA2/ PGI2比值促進局部血腫吸收、加快組織代謝。提示大血藤在活血化瘀方面部分機理以及抑制中性粒細胞介導的炎癥反應可能存在的作用。人體關節中含有基質金屬蛋白酶MMPs類酶，MMPs類酶底物主要是關節中的蛋白多糖。發生骨性關節炎時，MMPs活性增強，對底物蛋白多糖、膠原蛋白的分解增加，可進一步造成關節軟骨基質分解大于合成，發生軟骨退變。MMPs大家族中存在兩種明膠酶MMP-9、MMP-2，是水解軟骨基質中蛋白多糖、膠原蛋白等的關鍵酶。在一項樣本量為22例的膝關節置換骨性關節炎患者軟骨組織中發現MMP-2表達異常，引起細胞外基質異常降解[12]。在涵蓋了39例膝關節骨性關節炎、68例類風濕關節炎、79例強直性脊柱炎、39例反應性關節炎以及14名正常人的研究中，發現各個關節炎組MMP-2、MMP-9活性都比正常組增強[13]。金骨蓮組方中大血藤被證明可以明顯減少MMP-2、MMP-9的表達，減少MMP-2、MMP-9含量，從一定程度上減輕骨關節炎中滑膜炎癥、減緩MMP-2、MMP-9參與的關節軟骨退變[14]。此外，在對骨關節炎模型兔進行研究時發現模型兔關節液中細胞因子TNF-α表達有明顯增加且維持在較高水平[15]。體外實驗中TNF-α被證明是軟骨降解的興奮劑[16]。通過抑制TNF-α，關節軟骨中蛋白多糖的含量出現了增加，可以達到抑制軟骨基質降解的效果[17]。晚期OA中TNF-α可以誘導滑膜成纖維細胞樣細胞增殖出現明顯的纖維增生和滑膜增厚，引起軟骨細胞發生成纖維細胞樣改變，下調特異性前膠原α1(Ⅱ)表達，上調非特異性膠原α1(Ⅲ)表達[18]。同時Neide等[19]通過研究觀察到IL-6與軟骨基質退變主要酶膠原酶關系密切。金骨蓮組方中的大血藤能夠通過降低關節炎模型大鼠血清IL-6、TNF-α含量，從細胞因子IL-6、TNF-α方面對關節軟骨退變、損傷進行干預，從細胞因子角度看，大血藤確實存在保護關節軟骨、減緩骨關節炎疾病發展的功效[20]。臨床研究中，凌家艷等[21]利用大血藤外敷同時內服中藥治療急性痛風性關節炎，發現加用大血藤時，止痛效果起效快，對疼痛減輕明顯。

3八角楓對骨關節炎的作用

八角楓具有祛風濕、通經絡等作用，臨床主要用于治療跌打腫痛、風濕。研究發現，通過對貓靜脈注射八角楓制劑，可以阻斷貓的植物神經以及運動神經橫紋肌興奮傳導，從而達到肌肉松弛的效果[22]。翟科峰等[23]對八角楓成分進行定性研究后發現，八角楓中主要成分為蒽醌類、糖類、苷類、皂苷、三萜等。張威等[24]利用八角楓對佐劑性關節炎大鼠模型進行研究后，發現八角楓醇提取物和八角楓總堿可以明顯減小佐劑性關節炎大鼠的足腫脹，光鏡下觀察可以發現八角楓醇提取物和八角楓總堿能夠減輕關節滑膜的增生、減少血管翳形成。以八角楓為主要成分的針劑“肌松二號”能夠使神經肌肉接頭處突觸后膜產生去極化作用，使得突觸后膜對突觸前膜釋放的神經介質一定時間內無反應，從而引起肌松作用[25]。

4漢桃葉對骨關節炎的作用

漢桃葉目前主要用于祛風止痛，對于治療風濕痛、坐骨神經痛有不錯的效果。

將漢桃葉的成分進行有效提取，發現漢桃葉產生止痛作用的有效成分主要是有機酸，包括反丁烯二酸、琥珀酸黏液酸、蘋果酸。劉嫻等[26]發現漢桃葉不同部位的提取物對小鼠耳廓腫脹、醋酸引起的小鼠疼痛均有明顯效果。目前對漢桃葉的大樣本、更深層次研究仍然缺乏，有待進一步深入。

5透骨香對骨關節炎的作用

透骨香具有舒經活絡、散瘀止痛的作用，可用于風濕、類風濕關節炎、跌打勞損。

以透骨香浸膏的形式口飼小鼠，通過觀察冰醋酸引起的小鼠扭體數、熱板法小鼠舔足時間發現透骨香浸膏能夠減少扭體數、提高痛閾，存在止痛的作用。在對巴豆油合劑引起的小鼠耳腫脹研究后發現，透骨香浸膏可以減輕耳組織水腫[27]。黃聰等[28]對透骨香的藥用成分進行改良制成微乳制劑后，以二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹、冰醋酸引起的小鼠扭體數為觀察指標，同樣得出了透骨香擁有消腫止痛的功效。有研究者利用不同炮制方法，對透骨香展開研究后發現，透骨香對實驗中小鼠肢體腫脹以及鎮痛均有效且醋制組消腫效果最優、清炒組止痛效果最強[29]。在對重要功能臟器長期毒性作用方面，謝笑龍等[30]開展了對透骨香藥酒的研究。研究發現以透骨香為主要成分的藥酒對大鼠體質量、營養狀況等一般情況，以Ⅱ導聯為心電圖的觀察指標，以GPT、麝香草酚濁度為肝功能觀察指標，以血液非蛋白氮、血液肌酐為腎功能觀察指標的影響以及大鼠肝、腎、腦組織光鏡形態均與空白對照組無明顯差異，證明透骨香在入藥方面的安全性。一項利用透骨香按摩乳治療263例軟組織損傷的臨床觀察中，有效率達97.72%，其中痊愈占76.80%，進一步說明了透骨香在臨床藥用中的價值[31]。

6分析與展望

骨性關節炎在人口老齡化加快的現代社會發病率和危害性都在不斷加大，中醫強調骨關節炎為經絡不通，病邪阻塞氣血所致。金骨蓮組方因其特殊的主藥成分在骨性關節炎方面有獨特療效。目前對該組方的研究多停留在動物實驗、臨床應用層面且其療效已經得到了充分證明，但是亟須更高質量、更深層次的實驗研究，從分子生物學、生物化學方面進一步闡明金骨蓮各組分在保護骨關節方面的作用機理，為進一步分離、純化、減少藥物的副作用打下堅實基礎。

參考文獻：

[1]許建陽，王發強，鄭維發，等.金鐵鎖對實驗性RA小鼠痛閾及血清NO/NOS含量的影響[J].中醫藥學刊，2004(1)：82-84.

[2]AMIN A R, DI CESARE P E, VYAS P, et al. The expression and regulation of nitric oxide synthase in human osteoarthritis-affected chondrocytes:evidence for up-regulated neuronal nitric oxide synthase[Z], 1995: 2097-2102.

[3]TASKIRAN D, STEFANOVIC-RACIC M, GEORGESCU H, et al. Enhancement of SPARC(osteonectin)synthesis in arthritic cartilage[Z], 1996: 539-551.

[4]PELLETIER J P, JOVANOVIC D V, LASCAU-COMAN V, et al. Selective iibition of inducible nitric oxide synthase reduces progression of experimental osteoarthritis in vivo:possible Link with the reduction in chondrocyte apoptpsis and caspase 3 level[Z], 2000: 1290-1299.

[5]王家傳，李宇，霍霞，等.一氧化氮對兔關節軟骨細胞凋亡的影響探討NO對軟骨細胞凋亡的影響[J].實用美容整形外科雜志，2002，13(6)：324-326.

[6]王美娥，潘惠娟，許建陽，等.金鐵鎖對實驗性類風濕性關節炎大鼠痛閾及其腦兒茶酚胺類神經遞質的影響[J].中國臨床康復，2005，9(10)：96-97.

[7]ABBADIE C, BESSON J M. C-fos expression in rat lumbar spinal cord during the development of adjuvant induced arthritis[Z], 1992: 985.

[8]TolleTR, CASTROLOPES J M, COIMBRA A, et al. Opiates modify induction of c-fos proteoncogene in the spinal cord following noxious stimulation[Z], 1990: 46.

[9]王學勇，張元，許建陽，等.金鐵鎖總皂苷鎮痛作用及其對佐劑性關節炎大鼠c-fos基因的表達的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2010，16(3)：94-96.

[10]田均勉.中藥金鐵鎖的系統化學成分研究[D].上海：第二軍醫大學，2011：1-194.

[11]黃淑鳳，孟建國，孫鑫，等.大血藤對苯酚膠漿致盆腔炎模型大鼠血清PGI2、TXA2的影響[J].陜西中醫學院學報，2012，35(5)：69-70.

[12]郭常安，陳崢嶸，張秀榮.骨關節炎基質金屬蛋白酶1、2、3及其抑制物的表達與軟骨退變的關系[J].復旦學報:醫學版，2002，29(4)：244-246.

[13]付鈺，王光義.中藥大血藤對佐劑性關節炎大鼠滑膜細胞MMP-2、MMP-9的影響[J].貴州醫藥，2009，33(12)：1097-1099.

[14]傅欣，林霖，張繼英，等.骨性關節炎兔關節軟骨、關節液細胞因子IL-1β和TNF-α變化的研究[J].中國運動醫學雜志，2007，26(6)：709-713.

[15]POOLER A R. Cartilage in health and disease.In:Koopman[C]//WJ, 2005: pp223-pp269.

[16]KOBAYASHI M, SQUIRES G R, MOUSA Aisha, et al. Role of interleukin-1 and tumor necrosis factor alpha in matrix degradation of human osteoarthritic cartilage[J]. Arthritis Rheum, 2005, 52(1): 128-135.

[17]鄧廉夫，柴本甫，楊慶銘.腫瘤壞死因子-α和白細胞介素-6對人關節軟骨細胞膠原基因表達的影響[J].中國運動醫學雜志，1999，18(2)：109-110, 138.

[18]管劍龍，韓星海，袁國華，等.骨關節炎患者血清和滑液中金屬蛋白酶-2和-9的研究[J].中華風濕病學雜志，2001，5(2)：102-105.

[19] NEIDE J，SCHLZE M，SOVAI L，et al.Practical significance of cytokine determination in joint fluid in patients witll arthroses or rheumatoid arthritis[J].Orthop Ihre Grenzgeb，1996，134：381-385.

[20]付鈺.中藥大血藤對佐劑性關節炎大鼠血清TNF-α、IL-6的影響[J].現代醫院，2007，7(9)：37-39.

[21]凌家艷，薛莎，沈霖.大血藤外敷配合中藥內服治療急性痛風性關節炎64例[J].中國中醫急癥，2013，22(6)：1036-1037.

[22]八角楓堿肌肉松弛作用的研究[J].中醫雜志，1974(10):45-46.

[23]翟科峰，王青遙，葉竹青，等.八角楓化學成分的系統定性研究[J].時珍國醫國藥，2012，23(2)：295-296.

[24]張威，徐紅梅，任娜，等.八角楓對佐劑性關節炎大鼠的治療作用及毒性[J].合肥工業大學學報:自然科學版，2012，35(6)：832-836.

[25]常志青.中草藥肌松劑——華瓜木的研究[J].中藥通報，1981(5)：34-36.

[26]劉嫻，劉道芳，劉海兵，等.漢桃葉抗炎鎮痛作用有效部位的篩選[J].安徽醫藥，2011，15(12)：1491-1493.

[27]孫學蕙，曲莉莎，郭振波，等.透骨香藥理作用及毒性研究[J].貴陽中醫學院學報，1989(3)：56-58.

[28]黃聰，王云峰，鄧煒.透骨香微乳鎮痛抗炎作用的實驗研究[J].貴陽中醫學院學報，2012，34(2)：18-20.

[29]覃容貴，龍慶德，秦拴梅，等.不同炮制方法對透骨香抗炎鎮痛作用及水楊酸甲酯苷含量的影響[J].時珍國醫國藥，2013，24(2)：409-410.

[30]謝笑龍，黃燮南，吳芹.透骨香藥酒長期毒性的研究[J].貴陽中醫學院學報，1998，20(2)：59-61.

[31]熊雙貴，張友健，付文心，等.透骨香按摩乳治療軟組織損傷263例臨床觀察[J].貴陽中醫學院學報，1992，14(4)：27-29.

(收稿日期：2015-09-21)

[中圖分類號]R274.9

[文獻標識碼]A

DOI:10.11851/j.issn.1673-1557.2016.02.004

通信作者：劉毅，1020497493@qq.com

優先數字出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1688.R.20160311.2142.018.html