孝感地區HPVE6E7mRNA檢測的調查研究

聶林+黃素麗

摘要：目的 利用我院就診患者獲取宮頸脫落細胞，比較不同年齡段HPV E6、E7mRNA檢測的陽性率及特異性、靈敏度，探討其對宮頸癌及癌前病變的早期篩查價值。方法 運用分年齡層方法獲取我院就診595例作為本次研究對象，同時進行TCT和HPV E6、E7mRNA檢測，對細胞學ASCUS及以上結果進行組織病理檢查，比較不同年齡段HPV E6、E7mRNA檢測和TCT的陽性率，及其與組織病理檢測的符合性，將數據錄入Excel表格，采用SPSS19.0軟件進行統計分析。結果 有效調查人數為559份，有效率100%。其中根據年齡分組，HPV E6E7 mRNA陽性率分別為：30歲以下35.76%，30以上41.62 %。此外，對HPV E6E7 mRNA及TCT均為陽性患者進行病理學檢測，其中病變為CIN2以上患者靈敏度及特異性均高于TCT。結論 比較不同年齡兩組人群，30歲以下年齡組中E6、E7 mRNA檢測靈敏度、特異性更高，可見在宮頸高級別病變的篩查中，尤其是年輕女性的篩查中，其在反映宮頸疾病的進展方面具有極其重要意義。

關鍵詞：HPV E6、E7mRNA；宮頸癌；陽性率；特異性

大量研究表明HPV感染率隨著宮頸病變的惡性級別升高而逐漸上升，HR-HPV 是宮頸癌感染的主要誘因[1]，并且HPV DNA 檢測較之宮頸細胞學檢查更加敏感[2]，但是由于宿主免疫系統的清除作用，大量HPV感染只是短暫的。因此，基于 DNA 的 HPV 檢測在高級別宮頸病變的診斷中特異性及陽性預測值均較低[3]，有報道表示 HPV-DNA 在凋亡細胞及細胞碎屑中也可表達[4]，也說明 HPV-DNA 檢測的低特異性。另有研究表明高危型HPV是通過E6E7蛋白發揮致癌性的[5]，E6蛋白通過E6-AP能特異性結合P53蛋白形成復合物。促使P53蛋白快速降解，導致細胞周期失控，其效應等同于P53突變。E7蛋白和PRb有高親和性，使E2F和PRb復合物解離，使細胞周期失控而發生永生化。有文獻報道，E6、E7mRNA水平與病變的嚴重程度相關[6]，Molden及Sterdal[7] 等對宮頸病變患者進行幾年隨訪發現，HPV mRNA較HPV DNA具更高特異性及陽性預測值。為了解孝感地區HPV E6E7mRNA不同年齡段陽性率及特異性，特對孝感市婦幼保健院就診成年女性進行調查研究，現將調查結果匯報如下。

1資料與方法

1.1一般資料 采用分年齡層整群抽樣方法我院門診就診年齡≥20歲的559例成年女性做為調查對象。

1.2研究方法 細胞取材：將采集器的中央刷毛部分輕輕插入宮頸管，柔和的向前抵住采樣器，并按同一個時針方向轉動采樣器5周整，將采樣器按入保存液小瓶底，迫使刷毛全部散開，共10次，在溶液中快速擺動采樣器以漂洗樣本。同時進行E6、E7 mRNA及TCT檢測。

1.3 HPV E6E7mRNA的意義 HPV基因組由早期基因區（E）、晚期基因區（L）以及長度控制區（LCR）構成；其中 E6、E7是主要的致癌基因，具有促進和維持整合狀態的功能，可與p53和Rb等細胞周期調控因子結合，影響其功能，導致細胞分化異常，形成惡性增殖[12]；E6、E7基因編碼的蛋白是導致宮頸上皮癌變的重要因子。

1.4統計學處理 應用SPSS V19.0軟件進行統計分析。采用χ2檢驗及二元Logistic回歸分析方法分析HPV E6E7mRNA的陽性率及靈敏度、特異性。

2結果

2.1一般情況 595例調查的成年女性中HPV E6E7 mRNA陽性率分別為：30歲以下35.76%，30以上41.62 %。調查對象的年齡為18～70歲，平均年齡為36.07歲。

2.2分組比較細胞學與HPV E6E7 mRNA分析結果 針對TCT與HPV E6E7 mRNA進行年齡分組對比分析，結果顯示E6/E7 mRNA檢測，陽性預測值高，特異性強，見表1，表2。

2.3結合病理學不同病變結果HPV E6E7 mRNA與TCT分析結果 將上述單因素分析結果中有統計學意義的指標引入二元Logistic回歸分析，結果顯示其中30歲以下CIN I及以下陽性為24例（14.55%），CINII及以上陽性35例（21.21%）；30歲以上CIN I及以下陽性為77例（19.54%），CINII及以上陽性87例（22.08%），見表3，表4。

2.4 HPV E6/E7 mRNA與TCT對病變的靈敏度、特異性比較 不同年齡組CINII及以上（尤其年輕組<30歲）比對分析HPV E6/E7 mRNA的靈敏度、特異性明顯高于對照組（TCT），兩組比較有統計學意義（P<0.05），見表5。

3討論

本研究首次在本地區進行TCT和HPV E6、E7mRNA檢測對比。HPV E6、E7mRNA具有更高的特異性和陽性預測值，適用于婦女宮頸癌篩查，特別適合于TCT異常（≥ASCUS）患者，HPV E6E7mRNA是HR-HPV致癌活動最佳提示指標，可作為CINⅠ+期患者手術和術后療效評估首選項目。

綜上所述，通過流行病學調查，了解到E6、E7 mRNA與TCT聯合檢測是一種目前最佳的宮頸癌風險評估檢測組合，降低宮頸癌早期可疑病變的手術率，降低醫療耗損，從而提高社會效益和經濟效益，維護婦女身心健康，可實現早期篩查、分流管理及治療后隨訪。

參考文獻：

[1]劉桐宇，謝榕，鄭雄偉，等.TCT 標本檢測高危 HPV E6/E-7mRNA 及在宮頸病變中的應用研究[J].中華婦幼臨床醫學雜志（電子版），2011，7（3）：202-205.

[2]梁東霞，張彥娜.宮頸癌與 HPV 關系的研究進[J].實用癌癥雜志，2010，25（2）：202-205.

[3]Franco EL，Ferenczy A.Cervical cancer screening following the implementation of prophylactic human papillomavirus vaccination[J].Future Oncol，2007，3（3）：319-327.

[4]Brink AA，Snijders PJ，Meijer CJ，et al.HPV testing in cervical screening[J].Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol，2006，20（2）：253-266.

[5]Chua KL，Hjerpe A.Human papillomavirus analysis as a prognostic marker following conization of the cervix uteri[J].Gynecol Oncol，1997，66（1）：108-113.

[6]謝幸，茍文麗.婦產科學[M].第8版.北京：人民衛生出版社，2013，6.

[7]Molden T，Nygard JF，Kraus I，et al，Predicting CIN2+when detecting HPV mRNA and DNA by PreTect HPV-proofer and consensus PCR：A 2-year follow-up of women with ASCUS or LSIL Pap smear[J].Int J Cancer.2005.114（6）：973-976.

編輯/丁一