茂名市2017年H7N9免疫抗體監測與分析

（茂名市動物疫病預防控制中心，廣東茂名 525000）

H7N9亞型流感病毒（以下簡稱：H7N9）是A型流感中的一種。在2017年1月，H7N9出現變異，其對家禽的致病性由低轉為高，人和家禽的健康都受到極大的威脅，因此，家禽的H7N9免疫勢在必行。2017年6月農業部辦公廳發文《關于切實做好廣東廣西H7N9免疫工作的通知》，從2017年7月1日起，H7N9滅活疫苗進入家禽免疫試點階段。茂名市在廣東試點范圍內，為做好此次H7N9免疫試點工作，作者做了大量的疫苗推廣工作，同時也開展了H7N9免疫抗體的監測，本文對監測數據進行了記錄和分析，為本地區的免疫程序調整提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

在廣東省茂名市各區（縣級市）隨機對免疫過重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫苗（H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株）的家禽進行采樣，其中包括：雞場17家，采雞血清483份；鴨場5家，采鴨血清60份；鵝場3家，采鵝血清49份。

1.2 主要工具

96孔“V”形微孔反應板、5-50ul單道移液器、5-50ul八道移液器。

1.3 主要試劑

禽流感病毒H7亞型血凝抑制試驗抗原（哈獸研，批號2017010）、陰性血清、陽性血清、PBS液、1%雞血紅細胞。

1.4 檢測方法

血凝（HA）及血凝抑制（HI）試驗，參照《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T18936-2003）。

2 實驗結果

2.1 雞H7N9免疫抗體檢測結果

序號 監測點名稱 用途 免疫次數 最后一次免疫劑量最后一次免疫日齡采樣日齡抗體滴度log2值分布情況樣品數（份）合格率/陽性率（%）0～1 2～3 4～5 6～7 ≧8合格數/陽性數（份）1 A區雞場1 肉雞 1 0.7ml 20 82 1 7 12 20 19 95.0 2 B區雞場1 種雞 1 0.5ml 14 39 5 1 49 6 61 55 90.2 3 B區雞場2 肉雞 1 0.5ml 36 73 8 5 29 28 70 57 81.4 4 C市雞場1 蛋雞 1 0.5ml 14 32 9 14 4 1 28 19 67.9 5 E市散養戶1 肉雞 1 0.5ml 35 101 1 4 5 5 100.0 6 E市散養戶2 肉雞 1 0.5ml 50 116 5 5 5 100.0 7 E市散養戶3 肉雞 1 0.5ml 81 147 1 2 2 5 5 100.0 8 E市雞場1 肉雞 1 0.7ml 35 107 6 12 2 20 20 100.0 9 E市雞場2 肉雞 1 1ml 35 91 1 2 16 19 19 100.0 10 A區雞場2 肉雞 2 0.7ml 45 77 1 19 20 20 100.0 11 C市雞場2 肉雞 2 1ml 42 78 79 79 79 100.0 12 D市雞場1 蛋雞 2 0.8ml 35 85 16 16 16 100.0 13 D市雞場2 蛋雞 2 0.8ml 35 85 60 60 60 100.0 14 D市雞場3 蛋雞 2 0.8ml 35 67 2 17 19 17 89.5 15 D市雞場4 蛋雞 2 0.8ml 35 63 20 20 20 100.0 16 D市雞場5 蛋雞 2 0.8ml 35 70 16 16 16 100.0 17 E市雞場3 蛋雞 2 0.7ml 35 50 4 8 8 20 20 100.0合計 25 6 56 113 283 483 452 93.6

2.2 鴨H7N9免疫抗體檢測結果

序號 監測點名稱 用途 免疫次數 免疫劑量 疫日齡 0～1 2～3 4～5 6～7 ≧8（份） （份） 性率（%）1 A區鴨場1 種鴨 1 0.5ml 14 30 12 3 5 10 30 18 60.0 2 A區鴨場2 肉鴨 1 1ml 14 48 1 8 1 10 9 90.0 3 A區鴨場3 肉鴨 1 0.7ml 13 50 2 3 5 3 60.0 4 A區鴨場4 肉鴨 1 0.7ml 14 48 2 3 5 3 60.0 5 C市鴨場1 肉鴨 1 0.5ml 15 45 6 1 3 10 4 40.0最后一次最后一次免 采樣日齡 抗體滴度log2值分布情況 樣品數 合格率/陽合格數/陽性數合計 22 1 4 16 17 60 37 61.7

2.3 鵝H7N9免疫抗體檢測結果

序號 監測點名稱 用途 免疫次數最后一次免疫劑量最后一次免疫日齡 采樣日齡 抗體滴度log2值分布情況 樣品數（份）合格率/陽性率（%）0～1 2～3 4～5 6～7 ≧8合格數/陽性數（份）1 A區鵝場1 肉鵝 1 0.5ml 20 62 30 30 0 0.0 2 E市鵝場1 肉鵝 1 0.5ml 14 28 15 15 0 0.0 3 E市鵝場2 種鵝 2 1.5ml 35 83 4 4 4 100.0合計 45 0 0 4 0 49 4 8.2

3 分析與總結

3.1 免疫效果判斷

禽流感抗體血凝抑制試驗（HI）抗體效價≥4log2判定為合格。存欄禽群免疫抗體合格率≥70% 判定為合格。

3.1.1 雞免疫效果分析 在17個雞場抽檢483份雞血清，抗體合格452份，合格率為93.6%。只進行一次免疫的雞場9個，共采樣233份，合格率87.6%，進行了二次免疫的雞場8個，共采樣250份，合格率99.2%。數據顯示，所有雞場在免疫后都產生了抗體，除一個雞場合格率在70%以下外，其他16個雞場抗體合格率都超過了80%，免疫兩次明顯比免疫一次好，抗體效價相對更穩定。合格率在70%以下的那個雞場采樣時間不正確，離免疫日期太近，沒超過21天。

3.1.2 鴨免疫效果分析 在5個鴨場抽檢60份鴨血清，抗體合格37份，合格率為61.7%。所抽檢鴨場都只進行了一次免疫，數據顯示，所有鴨場在免疫后都產生了抗體，但只有一個鴨場抗體合格率在70%以上，其他4個鴨場抗體合格率都在60%或以下，說明鴨只免疫一次抗體效價很難合格。

3.1.3 鵝免疫效果分析 在3個鵝場抽檢49份鵝血清，抗體合格4份，合格率為8.2%。數據顯示，只有免疫了二次的鵝場產生了抗體，合格率達到了70%以上，但效價平均水平不是很高，只免疫了1次的2個鵝場都沒檢出抗體，也可能是受檢測中其他因素的影響，例如特異性可能受1%的雞紅細胞試劑影響。但總體來說，鵝只免疫一次抗體效價不好。

3.2 免疫情況總結

H7N9疫苗對雞的免疫效果良好，對水禽的免疫效果存在較大差異。本文數據屬大田試驗數據受多種因素影響，例如采樣地域不相同，養殖環境不相同，免疫日齡不相同，采樣日齡不相同，所注射的疫苗廠家不相同（此文不做表述），但總體情況良好，茂名地區開展H7N9免疫后，2017年用苗3597.25萬ml，沒有發生過H7N9疫情。

3.3 推薦免疫程序

數據顯示免疫劑量大效果偏好，免疫兩次比免疫一次好，因此推薦免疫程序為，生長期超過70d的家禽實行兩次免疫，首免14日齡二免35～42日齡。對人工飼養的雞、鵪鶉、鴿子、珍禽等，疫苗免疫接種方法及劑量按相關產品說明書規定操作，即首免接種0.3ml，二免接種0.5ml。對只免疫一次的肉雞，建議在20～35日齡接種0.7ml.對鴨鵝建議2～5周齡，每只接種 0.7ml；對5周齡以上的鴨，每只接種1ml；對5周齡以上的鵝，每只接種1.5ml。