血清asprosin與糖尿病視網膜病變的相關性研究

黃慶先 胡文超 何蘭杰

山東大學齊魯醫院青島院區內分泌科 266035

糖尿病視網膜病變是發展中國家致盲的首要因素，表現為視網膜微血管系統異常、視網膜血管通透性增加和眼內血管增殖[1-2]。糖尿病視網膜病變，尤其是增殖性糖尿病視網膜病變(PDR)的發病機制并不是很明確。研究發現，高血糖在視網膜血管損傷過程中發揮重要作用。許多代謝通路，包括多元醇、糖基化終末產物、蛋白激酶C和己糖胺通路都與高血糖誘導的視網膜血管損傷有關[3]。

Asprosin是一種新發現的脂肪因子，是原纖維蛋白的C末端裂解產物[4]。Asprosin通過G蛋白-蛋白激酶A(PKA)依賴性信號通路誘導肝糖異生，促進肝糖輸出，導致血清胰島素和血糖升高[4]。研究發現，2型糖尿病(T2DM)患者血清asprosin水平升高[5-7]。目前的研究多集中于asprosin與糖尿病的關系，尚無研究涉及asprosin與糖尿病微血管并發癥的聯系。因此，本研究旨在探討血清asprosin與糖尿病視網膜病變的關系。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2018年10月—2019年4月在山東大學齊魯醫院內分泌科就診的住院T2DM患者120例，所有入選T2DM患者診斷均符合1999年WHO的診斷標準。

本研究納入120例T2DM患者(T2DM組)和34名健康對照者(對照組)，兩組的年齡、性別匹配。根據眼底檢查結果，將糖尿病患者分為3個亞組：無視網膜病變的T2DM組(52例)、非增殖性糖尿病視網膜病變(NPDR)組(42例)和PDR組(26例)。糖尿病視網膜病變診斷標準參考2002年《糖尿病視網膜病變的國際臨床分級標準》[8]：(1)NPDR患者診斷標準：僅見微動脈瘤，或4個象限內可見20處以上的視網膜內出血，或2個或以上象限發現視網膜靜脈呈串珠樣改變，或1個或以上象限有明顯的視網膜內微血管異常。(2)PDR診斷標準：明顯的新生血管形成、視網膜前出血或玻璃體出血。排除標準是有眼內手術史、其他眼部疾病、心腦血管、惡性腫瘤疾病病史，受檢前2周有明確感染史等。對照組均無糖尿病家族史及急、慢性心腦血管疾病，無眼部疾病等。

本研究獲得醫院倫理委員會的批準(2018QLHSD0024)，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 一般資料 所有患者均測量身高、體重，計算體重指數=體重(kg)/身高(m)2?；颊咂届o休息至少15 min后采用臺式血壓計測定血壓。

1.2.2 生化指標檢測 所有研究對象晚餐后禁食至少8 h，次日空腹取靜脈血。離心后留取血清檢測血脂和HbA1c，采用全自動生化分析儀測定甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)等生化指標，高效液相法測定HbA1c。

1.2.3 血清asprosin濃度測定 使用EDTA抗凝管抽取3 ml靜脈血，立即以1 000 r/min(r=10 cm)離心20 min，將分離的血清置于-80℃保存，待測定時將所有標本置于37℃恒溫水槽中復融。Asprosin試劑盒購買于Aviscera Biosciences公司，酶聯免疫吸附法測定血清asprosin水平，具體檢測方法根據試劑盒說明書進行操作。

2 結果

2.1 基線的臨床資料 與對照組相比，T2DM組收縮壓、HbA1c、甘油三酯明顯升高，而HDL-C明顯降低(P均<0.05)，見表1。

2.2 血清asprosin水平比較 T2DM組血清asprosin明顯高于對照組，PDR組血清asprosin也明顯高于無視網膜病變的T2DM組以及NPDR組。另外，與無視網膜病變的T2DM組相比，NPDR組血清asprosin顯著升高，差異有統計學意義，見表1。

表1 糖尿病與對照組各臨床指標的比較

2.3Logistic回歸分析 與無視網膜病變的T2DM組相比，有糖尿病視網膜病變患者的血清asprosin水平顯著升高[(15.78±3.13) μg/L比(18.23±3.19) μg/L]。單因素logistic回歸分析顯示，收縮壓、舒張壓、LDL-C和血清asprosin是糖尿病視網膜病變發病的危險因素，見表2；而進一步多因素logistic回歸分析顯示，血清asprosin與糖尿病視網膜病變的發病風險增加有關，見表3。

表2 單因素logistic回歸分析糖尿病視網膜病變的危險因素

表3 多因素logistic回歸分析糖尿病視網膜病變的危險因素

3 討論

Asprosin是一種新發現的脂肪因子，通過G蛋白-cAMP-蛋白激酶A途徑增加肝細胞葡萄糖釋放，然后引起血漿葡萄糖和胰島素水平升高[4]。Lee等[9]報道，棕櫚酸處理小鼠胰島β細胞，可增加胰島β細胞的炎性標志物，并降低葡萄糖刺激的胰島素分泌和細胞活力。而抑制asprosin則可以逆轉上述變化，改善胰島素分泌和降低胰島β細胞的炎性反應[9]。表明asprosin誘導β細胞的炎性反應，導致β細胞功能障礙。此外，應用asprosin處理骨骼肌，可以抑制胰島素受體底物1和蛋白激酶B磷酸化，減少骨骼肌的葡萄糖攝取，表明asprosin降低骨骼肌的胰島素敏感性[10]。以上研究表明，asprosin與胰島β細胞功能以及胰島素分泌密切相關，可能作為T2DM治療的新靶點。

最近的研究表明，血清asprosin與糖尿病相關。與對照組相比，成年T2DM患者的血清asprosin水平顯著增加[5-7]。此外，與正常糖耐量組相比，糖耐量異常組血清asprosin水平顯著升高[11]。但目前尚沒有研究探討1型糖尿病患者和正常對照者之間血清asprosin的差異，需要后續研究進一步明確。此外，Groener等[12]研究顯示，無癥狀性低血糖患者與存在癥狀性低血糖患者相比，血清asprosin水平沒有差異。與正常孕婦相比，妊娠糖尿病孕婦血清asprosin水平顯著升高[13]。而且，與對照組相比，妊娠糖尿病孕婦的新生兒動脈血中asprosin水平明顯更高[13]。另有研究證實，血清asprosin與空腹血糖、HbA1c呈正相關，提示血清asprosin 與血糖相關指標有關[6，11]。以上研究均提示，血清asprosin與糖尿病有關，可作為糖尿病診斷的血清學標志物。

在因不穩定心絞痛而住院的患者中，與入院時相比，患者在冠狀動脈造影后24 h血清asprosin水平升高[14]。并且，血清asprosin水平與syntax評分(評估冠狀動脈疾病狹窄程度的評分系統)呈正相關[14]。這項研究是在大血管病變人群中開展的，表明asprosin可能與糖尿病大血管并發癥有關。本結果表明，糖尿病視網膜病變患者血清asprosin水平顯著升高，logistic回歸分析顯示，血清asprosin水平升高是糖尿病視網膜病變的危險因素。然而，還需要在后續的研究中，尤其是基礎實驗中，進一步闡明asprosin在糖尿病視網膜病變發病中的確切機制。

本研究存在局限性。首先，其樣本量偏小，還需要后續有較大樣本量的研究進一步證實。其次，本研究為橫斷面研究，屬性限制了結論的強度，還需要后續的前瞻性研究進一步證實血清asprosin與糖尿病視網膜病變發病的關系。

綜上所述，糖尿病視網膜病變患者血清asprosin水平顯著升高，且血清asprosin升高是糖尿病視網膜病變的危險因素。