常見消毒劑消毒效果評價

劉杰 韓薇 崔雪志 吳蕾 常海霞 韓帥琪 張向奎 劉振林 李文鋒 李建和 李超 許傳田

摘? 要：為評價規?；B殖場常用消毒劑的消毒效果，用規?；B殖場分離鑒定的三株細菌（大腸桿菌、沙門氏菌和葡萄球菌）作為標準菌株，用菌懸混合液定量殺菌法分別對13種消毒劑的殺菌效果進行比較。在相同實驗室條件下，將大腸桿菌、沙門氏菌、葡萄球菌分別與消毒劑按不同稀釋比例混勻后作用15 min，培養并計數殺菌后的菌落總數。結果顯示：A、B、I 比例為1∶2000;C、D比例為1∶1000;H比例為1∶800;G比例為1∶600;E、F、L、M濃度為0.3%（其中L和M以碘含量計）;J濃度為0.05%;K濃度為0.02%;以上濃度均可達到100%殺菌效果。

關鍵詞：大腸桿菌;沙門氏菌;葡萄球菌;消毒劑

中圖分類號：S859.79+9.1? ? 文獻標識碼：B? ? ?文章編號：1673-1085（2020）9-0003-05

規?；B殖場疫病爆發多是由于外界病原微生物入侵或者內環境病原微生物污染擴散造成的[1]，消毒能效阻斷傳染病病原體傳播[2]，通過消毒可將病原微生物隔離在養殖場和動物體外。因而選擇高效安全的消毒劑產品是做好消毒工作的關鍵，亦是做好生物安全工作的重中之重。目前市場上消毒劑種類繁多、效果各異，養殖場人員在選擇消毒劑時無所適從。本試驗通過對13種消毒劑分別對大腸桿菌、沙門氏菌和葡萄球菌的殺菌效果比較，并結合每種消毒劑的使用成本和消毒機制，篩選消毒效果較好、性價比高的產品，為養殖場合理選擇選消毒劑提供依據。

1? 材料與方法

1.1? 材料

1.1.1? 消毒劑及主要成分? 戊二醛苯扎溴銨溶液（A），戊二醛苯扎溴銨溶液（B），戊二醛苯扎溴銨溶液（C），復方戊二醛溶液（D），復合酚（E），復合酚（F），過硫酸氫鉀復合物粉（G），過氧乙酸、過氧化氫溶液（H），戊二醛苯扎溴銨、甲醛、乙二醛（I），三氯異氰尿酸粉（J），癸甲溴銨溶液（K），10%聚維酮碘溶液（L），10%聚維酮碘溶液（M）。

1.1.2? 試驗菌株? 試驗用大腸桿菌、沙門氏菌和葡萄球菌均來自養殖現場。

1.1.3? 器材? MHB和平板計數瓊脂均為陸橋產品;蘇凈牌超凈工作臺、一恒37 ℃恒溫培養箱、申安牌高壓滅菌鍋、100～1000 μL單道移液器、吸頭、18 mm×180 mm試管（帶塞子）、酒精燈等。

1.2? 方法

1.2.1? 細菌培養? 將養殖場分離鑒定的大腸桿菌、沙門氏菌和葡萄球菌復蘇后，加入到已滅菌MHB溶液，37 ℃恒溫培養箱培養24 h。

1.2.2? 計算MHB溶液中菌落含量? 室溫條件下（25℃）將培養24 h的MHB溶液在超凈工作臺中用滅菌生理鹽水作10倍倍比稀釋，稀釋至108，再分別從已稀釋好的梯度（104～108）中分別取0.1 mL菌液加入到滅菌的90 mm平皿中，倒入平板計數瓊脂，凝固后置于37 ℃恒溫培養箱培養18～24 h，計算三種菌株的菌落總數。

1.2.3? 消毒劑與菌懸液作用? 室溫條件下（25 ℃），根據廠家推薦消毒濃度設置消毒劑的稀釋比例（見表1）將A、B、C、D、G、H和I分別用蒸餾水進行1∶200、1∶400、1∶600、1∶800、1∶1000、1∶2000倍稀釋;E和F作0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%、1.2%稀釋;J稀釋至0.05%、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%;K稀釋至0.008%、0.016%、0.02%、0.035%、0.04%、0.05%;L、M稀釋至0.1%、0.3%、0.5%、1%、2%（以碘含量計）。震蕩混勻后，在超凈工作臺中將相應菌株加入到不同稀釋倍數的消毒劑中，消毒劑與菌懸液的比例為10∶1（10 mL消毒劑∶1mL菌液）混合均勻，反應15 min。在超凈工作臺中分別取0.1 mL反應后混合液加入平皿中，倒入平板計數瓊脂、混勻，凝固后倒置于37 ℃恒溫培養箱中培養18～24 h，計算不同平皿中的菌落總數。試驗過程中設陽性對照（滅菌蒸餾水∶菌懸液=10∶1）和陰性對照（滅菌蒸餾水）。

2? 試驗結果

2.1? MHB溶液中細菌含量? 試驗結果見表2。

由表2計算可知，三種菌株菌懸液中含菌量：大腸桿菌為6.8×109 CFU/mL，沙門氏菌為7.2×108 CFU/mL，葡萄球菌為4.5×108 CFU/mL。

2.2? 各種消毒劑殺菌效果? 消毒劑對三種細菌的殺菌效果見表3。結果顯示，13種消毒劑的不同稀釋比例對菌懸液（大腸桿菌、沙門氏菌、葡萄球菌）作用15 min，并菌落計數100 μL。A、B、I 比例為1∶2000，C、D比例為1∶1000，H 比例為1∶800，G比例為1∶600，E、F、L、M濃度為0.3%，J濃度為0.05%，K濃度為0.02%，以上濃度對三種菌均可達到100%殺菌效果。

2.3? 不同消毒劑的成本比較? 在實驗室條件下，13種消毒劑推薦使用比例與市場價格計算得出其消毒成本，由低到高依次為K

3? 討論

在實驗室條件下，13種消毒劑按廠家推薦比例對大腸桿菌、沙門氏菌、葡萄糖球菌均可達到100%殺菌效果。比較各種消毒劑消毒效果和成本，消毒劑K性價比較高，其主要成分為癸甲溴銨，是一種雙鏈季銨鹽消毒劑，殺菌普廣，對多數細菌、真菌、病毒有殺滅效果，為中效消毒劑，無色、無味、無刺激和腐蝕性，但受有機物影響大，對芽孢和無囊膜病毒效果較差，可帶禽和飲水等消毒[3，4]。

消毒劑J主要成分為三氯異氰尿酸粉，可殺滅各種微生物，主要對細菌、芽孢、病毒及真菌殺菌作用強，屬于高效消毒劑;但其藥效持續時間較短，有較強的刺激性和腐蝕性，種禽場多用于空舍期及其車輛消毒[5]。

消毒劑A、B、C、D、I主要消毒成分為戊二醛苯扎溴銨或者復方戊二醛，均為醛類消毒劑，殺菌作用和滲透力強， 對任何細菌、病毒、霉菌及頑固的芽孢等有殺滅作用， 可用于空欄、用具、運輸車輛等的消毒， 還可用于熏蒸消毒[6];受溫度和有機物影響較小，主要用于禽舍、器具噴霧等消毒。

消毒劑E和F成分是復合酚，為酚類消毒劑，通過使病原微生物蛋白變性、沉淀達到消毒效果，殺菌普廣，但有臭味和刺激性[7]，所以主要用于墻壁、地面、外環境和用具消毒。

消毒劑L和M主要成分為聚維酮碘，可殺死大部分細菌、真菌和病毒[8]，殺菌快且效力強，但使用濃度較高、不溶于水、有殘留、受有機物影響較大，主要用于帶畜禽消毒、飲用水消毒等。

消毒劑G成分為過硫酸氫鉀復合物粉，是一種廣譜、高效、低毒獸用消毒劑[9]，主要用于畜禽舍水線和帶畜禽消毒。

消毒劑H主要成分為過氧乙酸和過氧化氫，殺菌普廣、高效、環保，可以迅速殺滅大腸桿菌和金黃色葡萄球菌等微生物[10]，主要用于畜禽圈舍和設備表面消毒。

本實驗數據是在實驗室條件下所得，養殖場在實際消毒過程中，因消毒對象、溫度、濕度、作用時間、消毒方式、有機物及污染程度等因素都會對消毒效果產生一定的影響;因此養殖現場選擇消毒劑要根據消毒對象選擇適當類型消毒劑，并根據消毒條件調整消毒劑使用比例，以達到理想消毒效果。

參考文獻：

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[7]? 張波.畜禽養殖場消毒劑的選擇[J].畜牧獸醫科技信息，2016（08）：47-48.

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[9]? 楊絨娟，李朋朋，周德剛.過硫酸氫鉀復合物粉對不同菌株的消毒效果研究[J].安徽農業科學，2020，48（14）：85-87.

[10]? 王歡歡，王家新，鄭鵬，等.過氧乙酸和來蘇爾對大腸桿菌殺滅效果的比較研究[J].上海畜牧獸醫通訊，2019（05）：42-45.