絞股藍的化學成分和藥理作用及應用研究新進展

沈子琳，王振波，侯會芳，張 莉*，黃建軍*

（1.山東大學威海校區，海洋學院，威海264209；2.參園莊生物科技股份有限公司，威海264211）

絞股藍(Gynostemma Pentaphyllum(Thunb.)Makino)是葫蘆科、絞股藍屬草質攀援植物，又名七葉膽、五葉參等，味甘、苦，性寒，歸肺、脾、腎經。1986年，絞股藍被科技部列為“星火計劃”中待開發的第一位的“名貴中藥材”；2002年被衛生部納入保健品名錄?，F有研究表明，絞股藍的主要化學成分為皂苷、黃酮類化合物、多糖、氨基酸和多種微量元素，現代藥理研究發現其具有多種藥理活性，如降血糖血脂、抗腫瘤、免疫調節、保護肝臟及心血管、抗氧化等作用。2006年至今已有9篇有關絞股藍的化學成分和藥理活性的綜述文章，但對其臨床應用報道較少，在此基礎上，本文結合近幾年年新發表研究性論文，對其化學成分、藥理作用及臨床應用作一綜述，為絞股藍的進一步開發研究提供依據。

1 化學成分

1.1 皂苷類

絞股藍中主要含達瑪烷型皂苷。1976年日本人永井正博等在絞股藍中分離得到了人參二醇和2α-羥基人參二醇，首次揭示了絞股藍中含有達瑪烷型皂苷類成分[1]，1976至2011年間，共分離得到165個絞股藍皂苷[2]。至2016年，又有一些新的皂苷被分離鑒定，現已明確結構的絞股藍皂苷共201個[3]。2018年，周文超等人依次采用硅膠柱層析、超高效液相制備等多種色譜分離技術，首次從絞股藍種子中分離純化和鑒定得到葫蘆烷型皂苷單體化合物[4]。

1.2 黃酮類

目前有關絞股藍中黃酮類化合物的研究報道尚少。絞股藍中總黃酮含量為2%～5%，截至2014年，已報道的黃酮類成分僅有商陸素、蘆丁及槲皮素等10余種[5]。此后，石嫚嫚等首次在絞股藍全草中分離得到黃酮類化合物山奈酚-3-O-[2’-反式-香豆?；?3’-O-β-D-葡萄糖基-3’-O-β-D-葡萄糖蕓香苷][6]。 王玉榮等首次在絞股藍屬中發現4’-O-甲基-山奈酚-3-O-蕓香糖[7]。

1.3 萜類

以前相關文獻中均很少出現對絞股藍中萜類成分的研究報道，2018年，Wang等通過多種色譜方法 （包括HPLC，Sephadex LH-20，硅膠和C18反相硅膠）進行分級分離，得到12種三萜，并通過核磁共振（NMR），高分辨率質譜（HR-MS），紅外光譜（IR），旋光度和化學轉化對其化學結構進行了分析[8]。

1.4 多糖

絞股藍多糖是絞股藍中另一種含量較多的化學成分，因此對絞股藍多糖的研究也日益受到人們的關注。在之前的研究中，馬麗萍等對絞股藍不同部位多糖含量測定的結果表明絞股藍葉中多糖含量為 (1.78±0.6)%，莖中多糖的含量為(0.84±0.23)%，全草中多糖含量葉高于莖[9]。王昭晶等對堿提絞股藍水溶性多糖進行了研究，經葡聚糖凝膠(G-100)柱層析檢測其糖分布情況，表明其可能由兩種多糖組成，其中一種含有結合蛋白質[10]。此后，宋淑亮等對絞股藍多糖進行了較為系統的研究，共分離出了3種絞股藍多糖Gps-2、Gps-3和Gps-4，并對其中的兩種Gps-2、Gps-3進行了深入的研究，確定了Gps-2的分子量為10700Dal，Gps-3的分子量為9100 Dal[11]。2018年，吳秀麗等人采用水加熱回流提取法對絞股藍中多糖進行提取，采用蒽酮-硫酸比色法對不同產地絞股藍中多糖含量進行測定，不同產地絞股藍總多糖含量為:陜西＞內蒙古＞云南＞江西＞四川＞廣東＞湖北＞福建[12]。

1.5 氨基酸類

已有研究表明，絞股藍含有18種氨基酸，其中包含了8種人體必需氨基酸[13]，總氨基酸含量達到6.5824 μg·g-1[14]。鄧世林等的研究發現絞股藍中賴氨酸、亮氨酸、纈氨酸的含量都遠高于多種果蔬[15]。最近，馬赟等建立了UFLC-QTRAP-MS/MS法同時測定絞股藍中11種氨基酸類成分的含有量，為其內在質量的綜合評價和全面控制提供了科學依據[16]。

1.6 微量元素

絞股藍中微量元素含量因產地而異，但各地生產的絞股藍測定結果表明，絞股藍含有23種無機元素，其中含13種人體必需的微量元素和鈣、磷、鉀、鈉、鎂等5種人體必需的常量元素[17]。陳劍平等從絞股藍中測定了19種微量元素，其中含量最高的為Ca，達23352μg/g，其次為 Mg，達 3181μg/g，第三為 P，含量達2900μg/g，最低的為Co，僅為0.38μg/g,這19種無機元素的含量依次為:Ca＞Mg＞P＞Al＞Fe＞Ti＞Sr＞Ba＞Mn＞B＞Zn＞Cu＞Ni＞Pb＞Cr＞V＞ Li＞Cd＞Co[18]。

1.7 其他

絞股藍中除含有皂苷類、黃酮類、萜類、氨基酸及微量元素等外，還含有許多其他化學成分，如生物堿、有機酸、維生素、磷脂、蛋白質等。

2 藥理活性

2.1 抗腫瘤作用

絞股藍皂苷的水解產物有顯著的抗腫瘤活性。胡春華等人研究發現，絞股藍中提取的黃酮類化合物可通過下調MTA1 mRNA的表達，從而發揮抑制乳腺腫瘤MCF-7細胞株轉移與抗乳腺腫瘤作用[19]。魏依蘭等研究發現絞股藍總苷具有抑制U87細胞生長及減弱癌細胞遷移能力，尤以10 mg/mL的絞股藍總苷效果更佳，其機制可能與其可抑制IL-6蛋白表達有關[20]。Xing等研究發現一種來自絞股藍的達瑪烷型皂苷Damulin B可通過在G0/G1期早期阻斷細胞周期并抑制遷移從而誘導細胞凋亡，且對人肺癌A549細胞具有最強的活性[21]。Zhang等還發現一種新型的達瑪烷型三萜Gypensapogenin H能顯著抑制人乳腺癌細胞MDA-MB-231 的生長[22]。

2.2 抗炎、抗病毒活性

方磊涵等結果表明，斷奶仔豬在接種疫苗同時在飼料添加不同劑量的絞股藍多糖，在第14天、第28天，試驗組的抗體效價水顯著高于對照組，其中試驗C組(添加0.8%絞股藍多糖)免疫效果最好，抗體效價最高，表明絞股藍多糖對豬的免疫功能具有明顯的增強作用[23]。周文超等利用硅膠柱層析和半制備高效液相色譜技術在絞股藍中得到一種三萜皂苷，并通過氫譜碳譜及二維核磁，高分辨質譜，紅外光譜鑒定其結構，其結構為 25-O-acetyl-cucurbitacin-L-2-O-[αrhamnopyranosyl(1→2)][α-L-arabinopyranosyl(1→3)]-β-glucopyranoside.通過對脂多糖誘導的小鼠巨噬細胞RAW 264癥模型測試新化合物抑制炎癥因子的能力，發現其具有一定的抗炎活性[24]。

2.3 調節血脂作用

Lu等研究表明，絞股藍總皂苷具有顯著的降低血脂的作用，且其降脂作用的潛在靶點可能與FXR介導的膽汁酸代謝通路有關[25]。雷婧等人用不同含量的絞股藍進行相同實驗，研究結果表明，不同含量絞股藍皂苷(40%、80%、98%)均能有效降低高脂血癥大鼠血脂水平并與皂苷的含量呈負相關，且絞股藍皂苷98%含量組改善更明顯[26]。

2.4 降血糖作用

張瓊等人發現絞股藍總皂苷能夠顯著改善II型糖尿病小鼠糖脂代謝水平，并說明其發揮作用的機制可能與調節肝臟自噬基因Beclin-1及LC3B的表達有關[27]。歐守珍等研究了四氧嘧啶誘發高血糖小鼠模型，證實海南絞股藍乙醇提取物能明顯抑制葡萄糖引致的小鼠血糖的升高，但對正常小鼠血糖無明顯影響[28]。

2.5 保護肝臟

南瑛等人實驗證明絞股藍皂苷可通過激活Nrf2/NF-κB信號通路有效地保護小鼠急性酒精性肝損傷[29]。彭心怡等人研究發現一定劑量川楝子連續給藥可導致ICR小鼠慢性肝損傷,影響肝細胞內抗氧化系統，而絞股藍與川楝子配伍有減少脂質過氧化產物、抗肝損傷的作用[30]。吳柳松等人研究發現絞股藍總苷能抑制肝臟PCSK9表達，并增加LDLR表達量，與辛伐他汀聯用可降低藥物對肝臟的影響，從而起到保護肝臟的作用[31]。

2.6 心血管保護作用

孫立峰等人研究表明絞股藍總黃酮可以顯著改善缺血再灌注大鼠氧化應激反應，減少心肌梗死面積，起到保護心肌作用[32]。馬翔等研究證實絞股藍總苷具有保護血管內皮細胞活性、維持線粒體膜電位水平、提高血管內皮細胞抗氧化活性等藥理作用，并通過以上作用機制起到對氧化低密度脂蛋白損傷的血管內皮細胞的保護作用[33]。宋囡等人基于對mTOR/ULK1自噬信號通路的研究，探討了絞股藍總苷改善動脈粥樣硬化模型小鼠主動脈脂質沉積的作用機制，并指出絞股藍總苷可能通過調控自噬緩解動脈粥樣硬化斑塊形成，進而起到防治動脈粥樣硬化的作用[34]。

2.7 抗衰老作用

王潔等人研究表明絞股藍總苷可通過抑制細胞內活性氧的產生以及Bax的表達，以及激活Bcl-2、Caspase-3信號通路而逆轉UVA誘導的HSF細胞凋亡，進而延緩HSF細胞的光老化現象[35]。杜楠等人通過注射D-半乳糖建立衰老模型，同時以絞股藍籽油作為抗衰老試驗藥物，按2.0,3.0,4.0mL/kg的劑量進行灌胃給藥，60天后檢測小鼠體質量、各臟器指數及血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)濃度，以及小鼠肝臟、腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性、總抗氧化能力(T-AOC)、過氧化氫酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量，并觀察小鼠肝臟組織的病理變化，其實驗結果表明，表明絞股藍籽油可能通過增強機體的總抗氧化能力從而有效清除多余的自由基，降低機體細胞損傷程度，間接保護正常細胞，從而起到抗衰老作用[36]。

3 臨床應用

3.1 治療高血脂癥

徐洪等選取2013年5月～2014年12月某院收治的高脂血癥患者100例，通過一系列研究證實絞股藍復方制劑治療高脂血癥的臨床療效顯著，不良反應小，安全性高[37]。禹震霞等通過研究36例以甘油三酯升高為主的混合型高脂血癥患者，證實阿昔莫司膠囊聯合絞股藍總苷片治療以甘油三酯升高為主的混合型高脂血癥療效確切，可使糖尿病合并混合型高脂血癥患者的血糖顯著降低[38]。

3.2 治療口腔疾病

宣靜等將105例口腔扁平苔蘚患者分為濕熱內阻、陰虛內燥、氣滯血瘀、氣血虧虛及肝陽上亢等五型，各證型均給予復方絞股藍膠囊，濕熱內阻證加用枳術寬中丸，陰虛內燥證加用六味地黃丸，氣滯血瘀證加用獨一味膠囊，氣血虧虛證加用貞芪扶正膠囊，肝陽上亢證加用天麻鉤藤顆粒，所有患者連續服藥3個月為1個療程，共治療2個療程，分別于每個療程后觀察臨床療效。證實復方絞股藍膠囊聯合使用中成藥可以有效地治療口腔扁平苔蘚[39]。孫寧某院口腔門診已確診為復發性口腔潰瘍的患者81例，采用隨機數表法將患者分為試驗組41例和對照組40例，對照組予貝復濟局部噴于潰瘍面，試驗組在對照組基礎上加用維生素B12片和絞股藍煎劑聯合治療，研究發現維生素B12聯合絞股藍煎劑能有效調節復發性口腔潰瘍患者免疫功能，改善臨床癥狀，降低復發率，對臨床治療復發性口腔潰瘍具有重要意義[40]。

3.3 治療非酒精性脂肪性肝病

馬海芝等選取100例非酒精性脂肪性肝病伴糖尿病前期的患者，觀察血脂康膠囊聯合絞股藍及小劑量二甲雙胍對于非酒精性脂肪性肝病伴糖尿病前期的臨床療效，研究結果表明，聯合治療對非酒精性脂肪性肝病伴糖尿病前期具有一定的臨床價值，并對有肝郁脾虛證和痰濕內阻證的患者療效尤為顯著[41]。

3.4 治療腫瘤

現有研究表明，絞股藍總苷對胃癌、直腸癌、子宮癌、食管癌及膽、胰、腎、肺、肝、舌、膽癌及肉瘤等均有效。據報道，19例惡性腫瘤患者服用絞股藍沖劑(每包含總皂苷400mg)1個月后，患者癥狀均有改善，總有效率為89.47%，并且其不僅能提高惡性腫瘤患者的細胞免疫功能，而且還能降低Ig G、Ig M含量，誘導T淋巴細胞分化致敏為T淋巴細胞，直接與相應靶腫瘤細胞接觸后起殺傷作用[42]。

4 結語與展望

就目前的研究結果而言，絞股藍的化學成分和藥理已有較為深入的研究，對其臨床應用的研究仍較少。絞股藍含有包括皂苷類、萜類等在內的多種化學成分，且多具有顯著的藥理活性，如抗腫瘤、調節血糖，保護肝臟等，但許多藥理活性的研究僅停留在試驗階段，臨床相關藥物開發相對較少，因此，有必要對絞股藍的藥理活性及臨床應用進行深層次的研究，有望帶來良好的社會效益和經濟效益。