HPLC小貼士—超聲波制備HPLC試樣時的影響因素

文/DR.Stavros Kromidas

超聲波制備HPLC試樣時的小貼士// HPLC高效液相色譜試樣的正確制備對檢驗分析的結果有著決定性的影響。本期HPLC小貼士告訴你使用超聲波制備試樣時的影響因素有哪些？

在實驗室中，超聲波洗滌技術不僅適用于玻璃器皿的清洗、乳化液和懸浮液的分離，還可用于制備HPLC的試驗樣本。而HPLC試樣的正確制備對檢驗分析的結果有著決定性影響，故不可小覷超聲波的后期影響。那超聲波制備HPLC試樣時的影響因素有哪些呢？

1.物理因素

（1）使用的是自來水還是蒸餾水？水位、水溫的高低？例如：水位低時，能量大、洗滌能力強；水位高時，能量小、但分布均勻。一般情況下，當水溫較高時樣本的水解、重排或者成分發生改變的風險更大，這種情況在某些活性成分的檢測中都能看到，如乙酰氨基酚、維生素、氨基酸和著色劑等。

（2）超聲波洗浴池的材料、大小、幾何形狀（圓形還是方形）、壁厚及放置位置，如直接放在試驗臺上還是有橡膠墊減震隔離等。

（3）洗滌時器皿的材料（燒杯還是實驗室器皿架）、放置位置？例如，燒杯是直接放在洗浴池中與其底部接觸還是距底部有5~20 cm的高度。

2.不同的實驗手法

（1）當樣本比較復雜時（如淀粉），在超聲波洗滌過程中是否搖動樣本溶液。

（2）當達到超聲波洗滌時間后，是否讓樣本在洗滌液中停留一段時間再將其拿出？例如，到了規定的5分鐘洗滌時間，立即將樣本取出還是停留15分鐘后再將其取出。

（3）超聲波洗滌池中的水是否長時間沒有更換或者是否有在洗滌液中加入少量的異丙醇，以減緩藻類的形成等。

作為“穩健”的實驗分析，最好對超聲波制備HPLC試樣帶來的影響進行全面的檢查。如果對樣本的穩定性和重復再現性產生了影響，一般是上面提到的因素之一。