自動化及免疫學技術在微生物檢測中的應用進展

吳柳萍

（羅城仫佬族自治縣中醫醫院，廣西 羅城，546400）

感染性疾病是指由真菌、細菌、病毒等致病微生物引起的相關疾病，該類疾病多為炎癥性疾病，對呼吸、消化等多系統均產生影響。常有肺炎、泌尿系統、腸炎等，患者多伴有體溫升高、局部炎癥等全身癥狀，面對該類疾病需提高警惕，及時給予合理有效的診斷及治療，謹防疾病惡化給患者生命健康造成嚴重傷害[1-2]、降低疾病傳播風險。傳統微生物檢驗技術被廣泛應用于該類疾病的診療中，但有研究[3-4]表明該技術存在檢測效率低、準確率不足等弊端。隨著現代醫學技術不斷進步，微生物快速檢驗技術得到更多應用，該技術可有效針對人體各個系統的感染性疾病，彌補傳統檢驗技術的不足。本文通過分析幾種常見的微生物快速檢測技術應用進展，現報道如下：

1.微生物自動化鑒定技術

傳統微生物鑒定技術需經過漫長細菌培養階段，這樣的方式會顯著降低檢測效率，且該操作易出現失誤[5]。蘇章庭，周露的研究[6]對比了傳統技術與微生物自動化鑒定技術，結果發現微生物自動化鑒定技術檢測時間低于前者，且在節省人力資源、提升檢測精準度方面均有優勢。全自動微生物專家檢測系統：這一專家系統是美國微生物學會1999年首次提出，該系統是指根據臨床微生物種類等，同時結合臨床發表、出版的數據信息，為檢測結果提供解釋說明[7-8]。該技術大幅度提升了檢測速度，在幾小時內即可輸出檢測結果。該技術為臨床傳染性疾病提供診斷依據與治療建議。全自動微生物培養檢測系統：該系統采用不可逆CO2顏色改變技術，可快速檢測出培養皿內是否有微生物生長[9]。其優勢在于技術人員不需要做復雜操作，僅需要將培養皿置于檢測儀器中，檢測結束后，儀器會自動分開陽性與陰性結果[10]，顯著提升了檢測效率及精準度。

2.免疫學試驗技術

臨床對于抗原及抗體檢測時均要對患者行靜脈抽血提取血清，故存在于體外的抗原及抗體反應亦被稱為血清學試驗。該試驗極大簡化了微生物病原檢測的步驟，提高了檢測效率，是臨床微生物檢測的主要方法之一[11]。

2.1 凝集反應在溫度、酸堿度、電解質合適的條件細菌等抗原與抗體可發生特異性結合，并能出現肉眼可觀察到的凝集反應，即反應后出現的凝集塊[12]。該反應較適用于肺炎鏈球菌、志賀菌、沙門菌等菌落的分型與鑒定。有研究[13]指出該檢測手段具有操作便捷、檢測效率高、準確度高、特異性強等優勢。

2.2 沉淀反應該反應是指可溶性抗原與相應抗體在有電解質存在的情況下，按適當比例所形成的可見沉淀物現象。主要包括環狀、瓊脂擴散法、絮狀三種類型。其中環狀類型常用于炭疽、肺炎鏈球菌的診斷、鑒定。絮狀常用于定量測定毒素、類毒素等[14]。

2.3 酶聯免疫技術該技術于1974 法國研究者首次提出，近些年數據[15]發現，免疫酶技術在臨床使用頻率正不斷提高，使用范圍極廣，該技術主要通過酶的特殊作用將所檢物質轉化，其主要利用了抗原抗體的特殊反應。同時提取微生物代謝出來的酶，并將其置于特殊的顯色底板上并觀察顯色反應，最后對培養微生物進行著色。該技術主要應用于傳染性流感及肺炎等，其具有靈敏度較高、特異性強等優勢，同時其可從定性及定量兩個方向展開檢測。

2.4 熒光免疫技術熒光免疫技術是指將抗原抗體特異與熒光技術結合，檢測過程中將熒光素作為特殊標記物，檢測主要通過顯微鏡下對熒光素的觀察來確定。這種技術具有靈敏度高、操作簡便等特點。另外有研究[16]提出在該技術上改造出來的快速檢驗紙片法在特殊微生物檢測方面效果良好，靈敏度較高。例如，金黃色葡萄菌，大腸菌等。

2.5 補體結合反應該反應原理是補體能被任何抗原抗體復合物激活，并且其能將紅細胞和溶血素的復合物結合。多用于檢測立克次體、螺旋體患者體內抗體及病毒分型中。

3.微生物快速檢測注意事項

近些年研究[17-19]表明微生物快速檢查過程中有諸多注意事項，其是影響最終檢測結果的重要因素，故在檢測過程中需提高重視程度。根據研究得出以下幾個結論，培養基的滅菌及使用：配制是需仔細查看是否在有效期內并保證其是密封保存，培養基在使用前需經過嚴格消毒處理，嚴格管理培養基保存溫度；檢測環境的維持：大環境方面需保證檢測室門窗關閉，避免空氣流動對檢測結果產生影響。小環境方面及時對檢查設備進行清理及滅菌，并在檢測前提前開啟紫外燈；樣本采集及檢測：保證采樣器的無菌性，采集人員在采集樣本前要充分做到手部及身體暴露部位滅菌處理。

微生物培養環節需嚴格按照《微生物檢驗規范》進行，定時觀察培養基情況，若出現異常應及時處理，防止其對后期檢測結果產生影響。

4.小結

隨著近些年傳染病的爆發，微生物檢驗技術越來越受到人們重視，同時在傳染病大規模傳播的情況下，各種微生物快速檢測的效率及精準度成了臨床需面對的巨大挑戰。臨床微生物檢驗技術需充分結合數字化、自動化等高新技術，綜合考慮疾病因素及患者情況，為患者選用最有效率的檢測方法。臨床目前的微生物快速檢驗技術已基本成熟，但尚未形成統一規范化、統一性檢測方案，同時隨著醫療技術進步，各種新型微生物檢驗技術開始應用于臨床，故后續研究仍需在提升檢測效率、增強檢測精準度等方面作出深入探討。