CIN中P16INK4A 的表達及與HPV感染的關系探究

成 瑤

焦作市溫縣人民醫院病理科 (河南 焦作 454850)

宮頸癌是在臨床上婦科常見的惡性疾病之一，腫瘤組織擴散，將其轉移到子宮下段及宮體，其危險系數也隨之而增加，由于宮頸癌早期及宮頸上皮內瘤變(cer vical intraepithelial neoplasia，CIN)有著類似的的臨床表現，鑒別診斷程度比較困難[1-2]。CIN是與宮頸浸潤癌相關的癌變的總稱，可有效反映宮頸癌發生、發展的過程[3]。由于多數CIN無明顯的臨床癥狀及體征，部分患者出現充血、白帶帶血、白帶增多等表現，但仍有絕大數患者無法準確診斷，進而導致臨床上漏診的現象發生。已有研究表明，人乳頭瘤病毒(HPV)與宮頸上皮內瘤變發生、發展具有密切的相關性[4-5]。本文選取自2018年2月至2020年2月期間本院收治的96例CIN患者，探討在CIN中P16INK4A的表達及與HPV感染的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料分析的方法為回顧性分析，研究對象為2018年2月至2020年2月期間我院收治的96例CIN患者。

納入標準：患者及家屬有知情同意權并能完整參加本次的研究。

排除標準：孕產婦；免疫功能缺陷者；患有糖尿病者；嚴重的臟器疾??；精神疾病者；臨床資料不完整者?；颊吣挲g在23～45歲之間，平均年齡(31.23±3.45)歲；CIN Ⅰ級有45例，CIN Ⅱ～Ⅲ級有30例，宮頸鱗癌有21例。

1.2 方法免疫組化技術SP法：取標本，采用10%甲醛固定，并用石蠟固定。每一份標本連續制作4張切片，行常規病理檢查、P16INK4A染色。切片經過微波抗原修復預處理后，P16INK4A則采用性檸檬酸進行高溫修復，所有操作均按照說明書來操作。雜交捕獲二代法：從子宮頸管采集患者標本，將其分泌物置于專用保存液中，并采用DL-2000基因雜交擴大儀來進行第二代雜交捕獲法。所有操作均按照說明書來操作。

1.3 診斷標準[6]P16INK4A陽性標準：胞核或者胞漿著色，分為3+(棕褐色粗顆粒)、2+(棕黃色顆粒)、+(棕黃色細顆粒)、-(無棕黃色粗顆粒)。HPV-DNA的陽性標準：HPV-DNA＞1pg/L。

1.4 統計學分析應用SPSS 13.0分析數據，計數資料采用百分比(%)表示，用χ2檢驗，計量資料用(±s)表示，比較用t檢驗，若P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

CIN Ⅰ級患者的HPV持續感染率明顯高于CIN Ⅱ～Ⅲ級、宮頸鱗癌患者，差異有統計學意義(P＜0.05)。CIN Ⅰ級患者的P16INK4A陰性率明顯高于CIN Ⅱ～Ⅲ級與宮頸鱗癌患者，差異有統計學意義(P＜0.05)。隨著HPV陽性率越高，P16INK4A表達強度也越高，具體見表1。

表1 P16INK4A、HPV感染在宮頸病變中的檢測分析[n(%)]

3 討論

宮頸癌是女性易發的惡性腫瘤之一，并且年輕的女性中發生率也越來越高，對女性的生命健康和生活質量有著巨大的威脅，臨床癥狀主要為陰道流血和排液等，晚期癌癥患者還會出現一些繼發性的癥狀，如尿頻、尿急、下肢腫痛以及便秘等[7]。癌腫壓迫到輸尿管部位時，會使輸尿管發生梗阻、腎盂積水甚至出現尿毒癥等，晚期患者會出現貧血、惡病質等危及生命的全身衰竭癥狀[8]。宮頸癌的早期癥狀不明顯，因此，通過及早發現、及時診斷及治療，進而提高宮頸病變者的生存質量。

HPV感染是宮頸鱗癌與上內皮瘤變發生的必要因素，HPV感染是沒有癥狀的，在多數國家中，HPV感染較常見[9]。當前已有100多種HPV病毒，大部分病毒屬于低危型病毒，并不會導致宮頸癌。另外有13種HPV可持續感染，常見的引起宮頸癌的HPV有16型、18型，其在溫暖潮濕的環境下會大量繁殖，人體的外生殖器和肛周部位是最容易產生感染的地方，感染后極易誘發宮頸癌[10]。在受到高危型HPV感染后，以整合形式進入宿主細胞的DNA會引發癌基因E6、E7的表達。通過E6與p53蛋白、E7與pBb蛋白結合，會阻斷細胞周期的兩個抑制性環節，使宿主細胞發生惡性增殖。抑癌基因P16INK4A和它的產物會抑制視網膜母細胞瘤蛋白發生磷酸化，會阻止細胞從G1期到達S期，從而抑制細胞的惡性增殖。被HPV感染的宮頸組織中的E7蛋白會造成pBb功能的失活，最終解除pBb對P16INK4A蛋白表達的抑制，導致P16INK4A表達過度。本研究結果顯示：隨著宮頸瘤病變程度的加重，P16INK4A表達水平也隨之而升高，表明P16INK4A蛋白水平檢測可鑒別宮頸瘤病變與宮頸癌。這也說明HPV感染會引起宮頸瘤病變進展為宮頸磷癌，這個過程中伴隨著細胞周期蛋白、癌基因之間的相互作用，采取聯合監測HPV感染和P16INK4A的表達情況，會使宮頸癌的診斷率大大提高。

綜上所述，CIN中P16INK4A有著較高表達水平，在HPV持續感染患者中，通過監測P16INK4A水平，可盡早診斷宮頸瘤變。