不同脫霉產品對西門塔爾肉牛生長性能、免疫性能及組織霉菌毒素殘留的影響

托馬斯·韋恩(美)，劉繼根，張 翼，曹 娜，肖燦輝，趙易藝

(1.美國多格茵生物科學公司，美國 加利福尼亞州 94555；2.長沙道勤生物科技有限公司，長沙 410126)

谷物和動物飼料中的霉菌毒素是曲霉菌、青霉菌以及鐮刀菌等真菌產生的一種有毒次生代謝產物[1]，對飼料造成污染進而對畜牧業的安全生產造成嚴重的危害。牛慢性和亞急性霉菌毒素中毒，可造成生產性能和畜產品品質下降、消化道和肝臟系統病變、免疫機能下降，奶牛乳中霉菌毒素含量升高，進而成了威脅到動物食品的安全和人類健康一個重要因素[2]。以物理吸附為主的方法，在一些畜禽生產應用中取得了良好的效果，但在反芻動物上長期的應用霉菌毒素吸附劑可能對動物機體必需營養元素吸收和利用產生影響[3]。應用以生物吸附和降解方式為主的生物學方法脫毒具有特異降解與反應溫和等優點，作為安全、高效的脫毒手段已成為畜禽研究中的熱點[4]，在豬禽等單胃動物上研究較多[5]，在反芻動物方面特別是肉牛上報道相對較少。本試驗旨在探討西門塔爾牛肉牛飼料中添加不同類型脫霉劑對其生產性能、免疫功能、抗氧化功能以及毒素在肌肉和肝臟中的殘留的影響，為脫霉劑在肉牛生產中的應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及試驗設計

試驗于2021年10月10日—3月15日在湖南省慈利縣楊柳鋪鎮湖南振懷牧業科技公司進行。試驗采用完全隨機設計，選擇膘情正常、體重相近(353.43士20.12 kg)的60頭健康西門塔爾牛雜交后代牛，隨機分為3組，每組20個重復。對照組僅飼喂全混合日糧(TMR),試驗組分為脫霉劑組和解毒包組，分別在全混合日糧基礎上添加0.2 g/kg霉菌毒素吸附劑、1 g/kg解毒包(每天晨喂時一次性投入日糧中)?；A飼糧組成及營養水平見表1。飼養試驗共157 d，其中預飼7 d，正式期150 d。

表1 試驗基礎日糧組成及營養水平(干物質基礎)

1.2 飼養管理

試驗牛飼養管理條件一致，全部采用栓系飼養，每天飼喂2次TMR，分別于每天6:00和15:00各投喂1次,自由采食、飲水，牛群的日常驅蟲、健胃、疫苗注射等健康維護均按照牛場統一標準執行。牛舍每天清理料槽、水槽、清糞并定期消毒。

1.3 試驗材料

脫霉劑購置于市面上在售商品，主要成分為蒙脫石；解毒包由長沙道勤生物科技有限公司，主要成分為復合生物活性解毒酶、褪黑素、β葡萄糖氧化酶等。

1.4 樣品采集與處理

飼養試驗結束后，每組隨機選擇5頭肉牛進行屠宰試驗結束后，分別從3組隨機挑選5頭接近平均體重的肉牛，晨飼前于頸靜脈采集血樣25 mL，靜置30 min，用離心機以3 500 r/min離心15 min，將血清分離并分裝，-20 ℃保存待測。將挑選的試驗牛按常規方法屠宰，分離胴體，采集肝臟、腎臟樣品以及12～13肋骨之間橫截面眼肌面積處的肉樣，所有樣品-20 ℃冷凍保存。

1.5 測定指標及方法

1.5.1 生產性能指標 平均日增重(ADG)測定：正式試驗開始第1天稱重為始重，試驗結束時空腹稱重為末重，計算每頭牛平均日增重。

采食量測定：每天稱量飼料的喂量和飼料的剩余量，計算每頭牛每日的干物質采食量(DMI)。

料重比：即干物質采食量與平均日增重之比(F/G)。

1.5.2 血清生化指標和抗氧化指標 測量血清中血清葡萄糖(GLU)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST),谷胱甘肽還原酶(GR)、谷胱甘肽硫轉移酶(GST)、腺苷脫氨酶(ADA)、總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、活性蛋白酶(SOD)、過氧化物分解酶(GSH-PX)、腺苷脫氨酶(ADA)試劑盒購自南京建成生物工程研究所,均按說明書進行指標測定。

1.5.3 肌肉和肝臟中AFB1、ZEA、DON殘留含量采用ELISA試劑盒測定。

1.6 試驗儀器

臺式高速離心機(HR185C)上海力辰科技有限公司；紫外分光光度計(UV1901)上海佑科儀器儀表有限公司；酶標儀(SpectraMax M2)美谷分子儀器(上海)有限公司。

1.7 統計分析

統計分析采用SPSS 19.0軟件的ANOVA模塊進行方差分析，用LSD進行多重比較，試驗結果均以“平均值±標準差”表示,P<0.05為差異顯著。

2 結果與分析

2.1 不同脫霉劑對西門塔爾肉牛生產性能的影響

從表2可以看出，與對照組相比，解毒包組與脫霉劑組的日均增重分別高出1.65%和5.79%，差異不顯著(P>0.05)。在日均采食量對比中，脫霉劑組最高，較對照組和解毒包組分別高出1.37%和0.21%，差異不顯著(P>0.05)。解毒包組料重比較對照組和脫霉劑組分別降低了4.34%和4.10%，且差異達到顯著水平(P<0.05)。

表2 不同脫霉劑對西門塔爾肉牛生產性能的影響

2.2 不同脫霉劑對西門塔爾肉牛血清生化指標和抗氧化指標的影響

由表3可知，不同脫霉劑組和對照組的血清生化指標中葡萄糖(GLU)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)無顯著差異(P>0.05)。血清中的谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、谷胱甘肽還原酶(GR)、谷胱甘肽硫轉移酶(GST)和腺苷脫氨酶(ADA)的酶活解毒包組均低于對照組和脫霉劑組，解毒包組ALT、AST、GR、GST、ADA酶活較對照組分別降低了3.24%、0.19%、2.45%、1.81%和0.78%；較脫霉劑組分別降低了4.22%、2.24%、3.86%、1.04%和0.37%。添加解毒包的試驗組總抗氧化能力(T-AOC)較對照組和脫霉寄組分別上升了4.29%(P>0.05)和2.64%(P>0.05)。解毒包組活性蛋白酶(SOD)較對照組和脫霉寄組分別提高了3.98%(P>0.05)和8.55%(P<0.05)。解毒包組血清中過氧化物分解酶(GSH-PX)較對照組和脫霉寄組分別提高了0.50%和4.27%；血清中丙二醛(MDA)解毒包組較對照組和脫霉劑組降低了16.7%和11.8%，差異達到顯著水平(P<0.05)。

表3 不同脫霉劑對西門塔爾肉牛血清生化指標和抗氧化指標的影響

2.3 不同脫霉劑對西門塔爾肉牛肌肉組織和肝臟中AFB1、ZON、DON殘留的影響

不同脫霉劑對西門塔爾肉牛肝臟和肌肉組織中AFB1、ZEN、DON的影響見表4。各組肌肉中檢測到的AFB1、ZON、DON含量低于在肝臟中的殘留，說明霉菌毒素在肝臟中殘留量高于肌肉。與對照組相比，添加脫霉劑在肌肉中AFB1、DON的殘留分別降低了7.88%和8.52%，在肝臟中ZEN、DON的殘留分別降低了3.84%和11.51%。解毒包組3種霉菌毒素較對照組均有所降低，其中肌肉中的AFB1、ZON、DON殘留量比對照組分別下降了63.04%、10.55%和16.64%，肝臟中的AFB1、ZON、DON殘留量比對照組分別下降了9.26%、7.94%和34.04%。

表4 不同脫霉劑對西門塔爾肉牛肝臟和肌肉組織中AFB1、ZEN、DON的影響 μg/kg

3 討 論

3.1 不同脫霉劑對西門塔爾肉牛生長性能的影響

反芻動物受瘤胃微生物的影響，相對單胃動物對各種霉菌毒素有更強的耐受性和不敏感性，但仍會引起反芻動物拒食、腹瀉、繁殖問題甚至死亡，以及在霉菌毒素的代謝產物會從奶牛的乳汁中排出，從而對人類的健康構成極大威脅[6]。蘆春蓮等[7]研究表明添加0.05%和0.10%的黃曲霉毒素B1分解酶后，有提高肉牛的生產性能的趨勢。李瑞銀等[8]研究表明在西門塔爾牛日糧中添加0.2 g/kg霉菌毒素吸附劑使ADG、DIM分別提高3.57%和1.53%，同時F/G降低了3.27%。本試驗結果表明，解毒包組平均日增重和平均日采食量較對照組分別提高了5.79%和1.16%，料重比下降了4.34%，表明日糧中添加解毒包能在不同程度上提高生產性能，與前人報道的基本一致。

3.2 不同脫霉劑對西門塔爾肉牛血清和肝臟中生化指標的影響

通過血液生化指標的數據能反映家畜機體生理功能和代謝是否正常。血漿中的葡萄糖和總蛋白、白蛋白分別反映了動物機體能量平衡狀況和機體蛋白質代謝情況。血液生化指標AST和ALT是能反映動物肝臟功能健康狀況的兩種氨基酸轉氨酶。若肝臟受損，血清中AST、ALT含量會迅速增加[9]。谷胱甘肽硫轉移酶(GST)也是肝臟損傷的敏感指標,廣泛存在于動物以肝臟為主的各組織中，能增強機體對有毒化合物的代謝同時保護細胞免受急性毒性化學物質攻擊，是抵御有害親電子化合物的主要防御系統，當肝臟功能嚴重受損時，GST釋放到血液中導致血清GST異常升高[7]。本試驗結果表明，脫霉劑組、解毒包組與對照組相比，血清中葡萄糖、總蛋白、白蛋白差異不顯著，表明日糧中添加脫霉劑對機體能量平衡和蛋白質代謝的影響不顯著。本試驗中添加解毒包后血清中ALT、AST、GST、GR、ADA酶活比對照組有不同程度的降低，表明解毒包有保護和修復肝臟損傷，改善肉牛肝臟健康狀況的趨勢。

丙二醛(MDA)是在當機體自由基的濃度升高時導致脂質過氧化的產物，從而造成細胞損傷[10]?；钚缘鞍酌?SOD)是一種含有金屬元素的活性蛋白酶，能及時修復因自由基造成的損傷，是生物體內清除自由基的首要物質。過氧化物分解酶(GSH-PX)是動物機體內一種重要的過氧化物分解酶，能還原有毒的過氧化物，從而保護細胞膜的結構及功能不受過氧化物的干擾及損害[11]。本試驗中解毒包組T-AOC、GSH-PX有顯著升高的趨勢，MDA有顯著降低的趨勢，表明添加解毒包能一定程度上改善肉牛機體抗氧化能力。

3.3 不同脫霉劑對西門塔爾肉牛肌肉組織和器官中AFB1、ZEA、DON殘留的影響

動物采食霉菌毒素污染的飼料后，在肝臟、肌肉中均有一定程度的殘留。李瑞銀等[12]研究發現，添加0.2 g/kg霉菌毒素吸附劑肝臟中AFB1、DON均有所降低，對ZEA含量影響不大。蘆春蓮等[7]研究添加黃曲霉毒素B1分解酶顯著降低了毒素在肝臟和腎臟中的殘留。本試驗研究表明，日糧中添加解毒包對AFB1、ZEA、DON 3種霉菌毒素在肝臟和肌肉中的殘留量都有不同程度的降低。

4 結 論

日糧中添加1 g/kg解毒包在一定程度上改善了肉牛的生長性能，降低了料重比，提高機體的抗氧化能力并改善肝臟健康狀況，同時降低了霉菌毒素在肌肉和肝臟中的殘留。