槲蕨（骨碎補）根莖繁殖技術研究

劉燕琴 肖忠 韓蓉蓉 劉春雷 王黎 吳廷和

摘 要 為了解決市場槲蕨（骨碎補）種苗短缺問題，于2021年開展了槲蕨根莖繁殖技術研究。以在重慶市南川區樂村采集的野生資源為材料，采用樹上定植、基質扦插法研究不同時間、藥劑噴濕對槲蕨根莖繁殖效果的影響。結果表明，4—6月為槲蕨根莖繁殖最佳時間段，其成活率≥90%、單株新生根莖數≥2.0個；藥劑以NAA90 mg·L-1+6-BA5.0 mg·L-1+GA1.0 mg·L-1組合噴施效果最佳。即在適宜時間段用配比藥劑處理，可實現槲蕨根莖的快速繁殖。

關鍵詞 槲蕨；根莖；繁殖技術

中圖分類號：S339.4 文獻標志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2022.19.005

骨碎補入藥早期記載于《開寶本草》，后收錄入《本草綱目》；現《中國藥典》2020版（一部）的水龍骨科植物槲蕨[Drynaria fortunei （Kunze） J. Sm.][1]，即是《中國植物志》記載的水龍骨科槲蕨屬植物槲蕨（Drynaria roosii Nakaike）[2]，其以干燥根狀莖入藥，柚皮苷（C27H32O14）≥0.50%為控制指標。骨碎補性苦、溫；歸肝、腎經；具有療傷止痛、補腎強骨、消風祛斑，治療跌撲閃挫、筋骨折傷、腎虛腰痛、筋骨痿軟、耳鳴耳聾、牙齒松動及斑禿、白癜風的功效[3-4]?，F代醫學研究證明，骨碎補在抗炎癥、預防和治療骨質疏松[5-6]、促進骨折愈合[7-9]、預防牙齒松動[10-11]、改善記憶力[12-13]等方面藥理效果顯著。槲蕨因野生資源采集、破壞嚴重，資源銳減，已于2002年被建議列入珍稀植物三級保護[14]，發展育苗、人工種植成為必然趨勢；根莖育苗技術具有生長周期短、易于推廣等優勢，研究根莖繁殖技術對發展槲蕨人工種植具有重要意義[15]。

1? 材料與方法

1.1? 試驗材料

供試材料采自于重慶市南川區水江鎮樂村石壁（海拔1 386 m，經緯度N29°09.4734′、E107°05.9559′），經重慶市藥物種植研究所植物資源專家劉正宇鑒定，為《中國藥典》（2020年版）中藥材骨碎補基原植物。

1.2? 試驗地點

重慶市南川區華爾寺種植園（海拔701 m，經緯度為N 29°05.4104′、E 107°03.1580′），環境郁閉度為0.5～0.6。

1.3? 試驗方法

1.3.1? 材料前處理及定植方法

選取生長齡為2～3年的健壯根莖，剪去孢子葉，保留營養葉、毛狀鱗片和須根，切成長度為8～12 cm的根狀莖段，作為繁殖材料；切斷口用0.2%～0.3%的高錳酸鉀水溶液噴濕創口消毒，待表面水分風干備用。

樹上定植法：選取樹皮緊致、胸徑在5 cm以上的香樟樹、櫟樹、青岡樹等的樹干為附著物，將根莖須根貼在樹皮上，用帶狀布條纏繞固定，單株間距5～6 cm處綁縛苔蘚，呈0.2～0.5 m2小片定植。

基質扦插法（壟栽）：選取林下郁閉度為0.5～0.6、土壤類型為棕色壤土的坡地（坡度≥15°），起高約40 cm、寬30～50 cm的壟。以V（粗泥炭土）∶V（粗河沙）=2∶3為基質鋪厚約10 cm，根莖插入基質3～4 cm深，株間距8～10 cm，行間距10～12 cm。

1.3.2? 定植時間篩選

在2021年2—11月，每月以樹、壟定植，觀測其生根、葉片生長、新根莖生長等情況。

1.3.3? 藥劑篩選

于2021年4月，以NAA+6-BA+GA組合[1#，50 mg∶5 mg∶1 mg （為NAA、6-BA、GA之比，下同）；2#，90 mg∶5 mg∶1 mg；3#，130 mg∶5 mg∶1 mg；4#，清水對照組]噴濕根莖并風干表面水分，定植，每個處理3個重復，研究藥劑對根莖繁殖的影響。

1.3.4? 田間管理及觀測

根莖定植后，定期用噴霧器噴水（10～20 d噴水1次）保持濕度。

觀測統計指標包括生根時間、新生須根數、新葉生長情況、新根莖生長情況、成活率、植株生長勢。

1.4? 數據統計分析

采用Excel與SPSS 23.0對數據進行處理和分析。

2? 結果與分析

2.1? 定植時間對槲蕨根莖繁殖的影響

由表1、表2可知，在不同定植時間下，槲蕨根莖的生根時間、生根數、新根莖萌發時間及增殖系數、成活率有顯著差異，其中以2—8月扦插繁殖的效果較好；樹上定植、基質扦插法在2—8月時間段成活率均可達到78%以上，其中4—6月扦插繁殖的生根、新根莖生長數、成活率方面表現最好。

可以看出，樹上定植與基質扦插的成活率隨定植時間呈現相似的趨勢，并均在4—6月達到最高。

2.2? 藥劑處理對槲蕨根莖繁殖的影響

由表3、表4可知，藥劑處理對扦插根莖生長有一定的促進作用，如對新生須根數、新生根莖數有促進作用，但對孢子葉的萌發有延緩效果。本試驗中，1#、2#、3#藥劑的6-BA和GA濃度相同，只是NAA濃度隨編號擴大而逐漸增大，可見隨著NAA濃度增加其啟動效果呈現先上升后下降的趨勢，2#藥劑處理在兩種定植方法中均表現較好。

3? 討論與小結

3.1? 討論

3.1.1? 槲蕨根莖繁殖時間與其生物學特性有較大關系

槲蕨為附生蕨類植物，附著在樹皮、石壁等地方生長，生物學特性及生境特別[4]。目前槲蕨資源大都是野生孢子繁殖，但是孢子繁殖周期長，成本高，限制了人工種植。采用樹上定植、基質扦插可以有效地模擬槲蕨附生特性，實現其快速人工繁殖。

根據西南地區槲蕨生長周期及特點，發現在10—12月及次年1月溫度較低、空氣濕度低，不利于槲蕨生長，生長緩慢；在溫度較高、空氣濕度高的7—8月，也不利于槲蕨生長。而在溫度、濕度適宜的2—6月，其單株平均新生根數、新生塊莖數、成活率等方面均呈現出優勢。

3.1.2? 藥劑處理對槲蕨根莖繁殖的影響

藥劑處理槲蕨根莖，對槲蕨新根生長、新根莖萌發等有一定的促進作用。文偉等以槲蕨的莖、葉片、葉柄等為外植體，研究不同培養基對其生根效果的影響，發現以1/2MS+NAA0.1 mg·L－1培養基的生根效果最好[16]；嚴福林等研究發現，適當的藥劑處理、扦插基質對槲蕨的扦插繁殖有促進作用[17]；這些研究結果與本研究結果相似。

3.2? 小結

本試驗結果表明，在西南地區4—6月，采用組合藥劑NAA90 mg +6-BA5 mg +GA1 mg噴施，槲蕨（骨碎補）根莖在樹上定植和基質扦插均可實現有效的繁殖。

參考文獻：

[1]? 蒲標網.藥典2020版-一部-藥材和飲片：骨碎補[EB/OL].https：//db.ouryao.com/yd2020/view.php？id=f1ed7cf1e3，2022-08-12.

[2]? 植物智.蕨類植物門-水龍骨科-槲蕨屬：槲蕨 Drynaria roosii[EB/OL].Drynariahttp：//www.iplant.cn/info/Drynaria%20roosii？t=z，2022-08-12.

[3]? 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[M].2015年版.北京：中國醫藥科技出版社，2020.

[4]? 中國科學院中國植物志編委會.中國植物志[M].北京：科學出版社，2000.

[5]? 田剛，張治國，付小偉，等.骨碎補對卵巢切除所致大鼠骨質疏松癥的治療作用及其機理探討[J].中國中醫基礎醫學雜志，2013，19（1）：47-49.

[6]? 鄧強，喬小萬，李中鋒，等.骨碎補活性成分治療骨骼系統疾病研究進展[J].遼寧中醫藥大學學報，2022，24（7）：1-5.

[7]? 彭雙，韓立峰，王濤，等.骨碎補中的化學成分及藥理作用研究進展[J].天津中醫藥大學學報，2012，31（2）：122-125.

[8]? 張軍，李浩鵬，楊平林，等.骨碎補總黃酮含藥血清對成骨細胞增殖、分化、周期及凋亡的影響[J].中藥材，2009，32（7）：1090-1093.

[9]? 諶順清，梁偉，張雪妹，等.骨碎補化學成分和藥理作用研究進展[J].中國中藥雜志，2021，46（11）：2737-2745.

[10]? 檀龍顏，洪娜.骨碎補藥理作用的研究進展[J].中國民族民間醫藥，2017，26（11）：66-70.

[11]? 殷方明，肖漣波，張昀.骨碎補柚皮苷對炎癥及骨作用的相關研究進展[J].中國骨傷，2015，28（2）：182-186.

[12]? 王一同，徐艷明，張智博，等.骨碎補總黃酮對氫化可的松模型小鼠腦內海馬NMDAR1、GluR2和 CaMKⅡ表達的影響[J/OL].海南醫學院學報. https：//doi.org/10.13210/j.cnki.jhmu.20220913.001.

[13]? 孫婷，崔悅，趙晨宇，等.骨碎補總黃酮對亞硝酸鈉和東莨菪堿所致記憶障礙小鼠下丘腦區形態和雌激素受體表達的影響[J].中華中醫藥雜志，2022，37（8）：4418-4422.

[14]? 李楊，石雷.中國槲蕨屬藥用植物資源保護利用研究進展[C]//國際生物多樣性計劃中國委員會.第十屆全國生物多樣性保護與持續利用研討會論文集：2014年版.北京：氣象出版社，2014：91-92.

[15]? 李翠，黃雪彥，呂惠珍，等.骨碎補繁殖技術研究進展[J].熱帶生物學報，2012，3（4）：384-386.

[16]? 文偉.骨碎補愈傷組織的誘導及無性系建立的研究[J].黑龍江農業科學，2010（2）：3-6.

[17]? 嚴福林，杜富強，涂俊，等.藥用蕨類植物骨碎補（Drynaria fortune）根莖繁殖研究[J].北方園藝，2019（21）：95-101.

（責任編輯：丁志祥）