飼料添加紅棗提取物對錦鯉生長和非特異性免疫能力的影響

劉 飛 張名遠 王 凡 牛藝霖 閆文慧 伊瑞雅 霍建一

（洛陽師范學院，河南洛陽 471934）

錦鯉是由鯉（Cyprinus carpio）經人工選擇與雜交等而形成的一類觀賞魚，素有“水中活寶石”之美稱，已成為目前主要的名貴觀賞魚之一。為保證錦鯉品系純正，長期進行近親繁殖，導致其免疫力不斷下降，疾病常發生，降低了觀賞價值。因此，開發適宜于錦鯉養殖的飼料免疫增強添加劑很有必要。已有研究表明，紅棗不僅味道鮮美、營養豐富，而且具有保護肝臟、抗氧化、增強機體免疫力、抗腫瘤等多種保健功能[1]。目前有關紅棗及其提取物添加對魚類生長和免疫影響的研究報道較少[2-4]，而對觀賞魚類相關報道更為鮮見。本試驗以紅棗提取物添加飼料飼喂錦鯉，初步研究其對錦鯉生長和內臟器官（肝胰臟和脾臟）非特異免疫指標的影響，從而探討紅棗作為錦鯉飼料促生長和免疫增強添加劑的可能性。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用錦鯉幼魚為洛陽師范學院水產研究所繁殖、體形正常、無病、無畸形的金黃色錦鯉。暫養于直徑1 m、高1 m的圓柱形飼養缸中備用，養殖用水為自來水（充氣泵曝氣48 h）。紅棗提取物為陜西森弗天然制品有限公司提供的20∶1提取物。

1.2 試驗設計

試驗共設4個飼料配方處理組，即按錦鯉基礎飼料配方（表1）中分別添加 0（CK）、0.25%、0.50%、1.00%的紅棗提取物配制成4種試驗飼料。飼料原料按比例配備后使用ZL-600制粒機制得顆粒飼料，風干密封后置于-20℃冰箱保存備用。

表1 錦鯉基礎飼料配方

1.3 試驗方法

供試魚苗暫養7 d后，試驗分組前停食24 h，選取大小基本一致、體質量（1.52±0.07）g、生長狀態良好的錦鯉隨機分成4個試驗組，每組設置2個平行缸，每缸30尾。每組分別投喂上述已制備的4種試驗飼料，試驗養殖期為56 d。每天分早、中、晚3次進行定時、定點飽食投喂，以30 min吃完為宜，及時清理剩余餌料，日總投喂量為總體質量的2%～5%。全天用三合一多功能潛水泵和充氣泵進行增氧、過濾和水體循環；及時清理糞便、清洗濾材并適量換掉底層水，以保持良好水質。飼養期間水溫為20～28℃，pH 值為 7.2±0.2。

魚體用酒精棉消毒后在冰上進行解剖，取出肝胰臟和脾臟放入離心管中，置于-80℃超低溫冰箱中備用。

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生長指標。養殖試驗結束后停食24 h，各缸稱量總重。每個試驗組隨機取36尾，測量體長、體質量。計算肥滿度、增重率和特定生長率，公式如下：肥滿度（g/cm3）=100×終末魚體質量/終末魚體長；增重率（%）=100×（終末魚平均體質量-初始魚平均體質量）/初始魚平均體質量；

特定生長率（%）=100×（ln終末魚平均體質量-ln初始魚平均體質量）/試驗天數。

1.4.2 生化指標。每試驗組隨機分別選5個肝胰臟和脾臟樣品進行生化指標測定?？偟鞍缀?、酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）活性、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）活性、過氧化氫酶（catalase，CAT）活性、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量、總抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）等指標均采用碧云天試劑盒進行測定。

1.5 數據統計與分析

采用Excel 2010進行試驗數據整理，采用SPSS 13.0來進行單因素方差分析，采用LSD法進行平均數的多重比較。

2 結果與分析

2.1 添加紅棗提取物對錦鯉生長相關指標的影響

不同試驗組錦鯉肥滿度、增重率、特定生長率等生長相關指標測定結果見表2?？梢钥闯?，相比CK，在3個添加紅棗提取物處理組中，0.25%組和1.00%組的肥滿度、增重率和特定生長率均略有減少，但在0.50%組中均略有增加。單因素方差分析及其多重比較結果均表明，此3個指標在各紅棗提取物添加組與對照組之間無顯著差異（P＞0.05）。

表2 飼料添加紅棗提取物對錦鯉生長相關指標的影響

2.2 添加紅棗提取物對錦鯉內臟器官非特異性免疫指標的影響

2.2.1 對錦鯉肝胰臟的影響。不同試驗組錦鯉肝胰臟的 ACP、AKP、CAT、T-AOC、MDA 等非特異性免疫相關生化指標測定結果見表3。

表3 飼料添加紅棗提取物對錦鯉肝胰臟生化指標的影響

從表3可以看出，3個紅棗提取物添加組的錦鯉肝胰臟除MDA含量相對于CK減少外，其他4個指標均較CK增加。多重比較結果表明：與CK相比，ACP活性在紅棗提取物添加量為0.25%和0.50%時顯著增加（P＜0.05）；T-AOC在紅棗提取物添加量為0.25%和1.00%時顯著增加（P＜0.05）；MDA含量在紅棗提取物添加量為0.50%時顯著降低（P＜0.05）。其他處理組的這些指標均與CK之間沒有顯著差異（P＞0.05）。

2.2.2 對錦鯉脾臟的影響。不同試驗組錦鯉脾臟的ACP、AKP、CAT、T-AOC、MDA 等非特異性免疫相關生化指標測定結果見表4?？梢钥闯?，總體上各生化指標在各試驗組間情況有所不同。與CK相比，3個紅棗提取物添加組脾臟AKP活性、CAT活性均增加，MDA含量減少；ACP活性和T-AOC方面，均表現為2個紅棗提取物添加組增加、1個添加組基本持平。多重比較結果表明，脾臟的5個指標中，除紅棗提取物添加量為0.50%時MDA含量顯著低于CK（P＜0.05）外，其他各紅棗提取物添加組均與CK之間無顯著差異（P＞0.05）。

3 結論與討論

3.1 結論

本試驗結果表明，添加紅棗提取物對錦鯉肥滿度、增重率、特定生長率等生長指標沒有顯著影響，但添加適量的紅棗提取物能顯著提高肝胰臟ACP活性與總抗氧化能力，顯著降低肝胰臟和脾臟的MDA含量，從而增強機體的非特異性免疫功能。

3.2 討論

3.2.1 飼料添加紅棗提取物對錦鯉生長的影響。本試驗中，與對照組相比，添加紅棗提取物的3個試驗組錦鯉在肥滿度、增重率、特定生長率等3個生長相關指標上均無顯著變化。這說明飼料中添加紅棗提取物對錦鯉生長幾乎無影響。這一結果與添加紅棗提取物對虹鱒的生長速度幾乎無影響[2]基本一致，但與添加棗粉可顯著提高豬、肉牛、綿羊的增重[5-7]等結果不一致。其原因很可能是這些試驗動物都是陸生動物，而錦鯉是水生動物；此外，使用的紅棗成分、添加形式及添加量不一致。已有研究表明，紅棗提取物添加能提高鯉魚[起始體質量為（10.79±0.05）g]的生長性能[3]，這與本研究不一致。這可能有以下2個原因：一是本試驗使用的錦鯉個體較小，起始體質量為（1.52±0.07）g，難以很好地消化吸收紅棗提取物；二是錦鯉相對于一般鯉魚，其核心考量性狀并非生長速度而是體色與體型，可能其生長性能與一般鯉魚存在一定差異。

3.2.2 飼料添加紅棗提取物對錦鯉非特異性免疫功能的影響。動物體內的磷酸酶根據其催化最適pH值可以分為ACP和AKP這2種，均參與營養物質的消化吸收和運轉[8]。其中：ACP被認為是高等動物體內巨噬細胞溶酶體的標志酶，參與能量的轉化和信號的轉導，進而提高機體的非特異性免疫水平和營養代謝水平[9]；AKP是一種重要的代謝調控酶，其活性高低與動物生長性能關系密切[10]。在本試驗中，與對照組相比，3個紅棗提取物組錦鯉脾臟和肝胰臟的ACP和AKP活性均提高，且肝胰臟ACP活性在0.25%組和0.50%組顯著提高。這很可能說明飼料添加一定濃度的紅棗提取物能夠通過提高機體組織，特別是肝胰臟ACP的活性，從而增強機體非特異性免疫功能。

抗氧化系統是魚類非特異性免疫系統的重要組成部分之一，它由抗氧化酶（如CAT）和其他非酶類抗氧化物質等構成，可消減魚類機體的自由基和活性氧，避免機體受到氧化損傷；MDA是機體脂質過氧化反應的主要代謝產物，能在一定程度上代表機體氧化的損傷結果；細胞內存在非酶促和酶促防御體系以清除自由基，非酶促體系主要通過T-AOC來檢測，其大小反映了機體對外來刺激的代償能力以及機體自由基代謝狀態[11-12]。已有不少研究表明，紅棗多糖能提高小鼠血清和肝臟中CAT等酶活力、降低其MDA含量[13-15]；馬可為等[16]研究發現，適量的棗粉添加飼料能顯著降低血清MDA含量；馮鑫歡等[17]研究發現，紅棗水提物能降低糖尿病小鼠肝臟的MDA含量；Yu等[18]以西洋參和紅棗提取物為原料制成復方制對小鼠連續灌胃能顯著提高其肝、脾臟和血清中的CAT活性，顯著降低其MDA含量；劉 飛等[2]研究表明，飼料添加紅棗提取物能顯著提高虹鱒肝CAT活性，顯著降低其腎臟MDA含量。這些結果與本研究結果基本一致。本研究結果表明，飼料添加一定濃度的紅棗提取物能在一定程度上提高肝胰臟和脾臟的CAT活性、T-AOC，以及降低其MDA含量，且肝胰臟T-AOC在0.25%組和1.00%組顯著提高，肝胰臟和脾臟MDA在0.50%組均顯著下降。這很可能說明一定濃度的紅棗（及其提取物）能提高動物機體抗氧化能力。已有研究結果表明，添加紅棗提取物能提高鯉魚的非特異性免疫能力[3-4]。這與本研究結果具有一致性。本試驗結果表明，對于錦鯉，其飼料中添加適量紅棗提取物能夠通過提高機體組織，特別是肝胰臟和脾臟的抗氧化能力，增強機體的非特異性免疫功能。