外周血TAP聯合HPV、ICAM-1預測圍絕經期宮頸癌變患者術后復發價值及與預后相關性

楊雅樓 何明欣 李 瓏 胡 璇

1.海南醫學院(?？?，571199)；2.海南醫學院第二附屬醫院；3.湖北省天門市第一人民醫院

宮頸癌為女性生殖系統惡性腫瘤疾病，臨床對圍絕經期宮頸癌變患者多采用根治術，術后予以放/化療輔助治療，但仍存在部分患者病情不穩定導致術后復發。探尋有效的腫瘤標志物對患者預后進行有效評估至關重要[1]。宮頸癌變細胞增殖、遷移導致惡性腫瘤復發這一過程中存在多種腫瘤標志物的異常表達，臨床上腫瘤標志物較多且尚無統一標準，探尋并明確腫瘤標志物對術后復診監測及提升預后評估準確度臨床意義重大[2]。近年來相關研究顯示，腫瘤異常糖鏈糖蛋白(TAP)與腫瘤發生發展息息相關，細胞間黏附分子-1(ICAM-1)對腫瘤細胞與淋巴細胞的黏附具有較高的介導效用，提示其對腫瘤癌變細胞的增殖、遷移活性提升具有促進作用，但二者在腹腔鏡宮頸癌根治術后評估復發應用較少[3-4]。人乳頭瘤病毒(HPV)尤其是高危型檢測在子宮頸疾病篩查中有較高預測價值[5]。為進一步明確宮頸癌患者術后復發的有效腫瘤標志物，本研究通過檢測腹腔鏡宮頸癌根治術患者血清TAP、ICAM-1及HPV指標，術后隨訪1年，監測各指標水平變化對術后復發的影響機制，為臨床評估術后復發提供新的腫瘤標志物選擇。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年1月-2021年1月入本院接受宮頸癌根治術治療的圍絕經期患者132例納入宮頸癌組，接受婦科檢查的健康女性77例納入健康對照組。納入標準：①宮頸癌患者術前經臨床病理診斷后符合宮頸癌變診斷標準[6]；②臨床病理資料完整；③均接受宮頸癌根治術，同意并配合本研究調查及隨訪工作直至研究結束；④術后定期入院復查并接受外周血TAP、HPV、ICAM-1指標檢測。排除標準：①合并其他惡性腫瘤疾??；②HPV疫苗接種；③癌變臨床分期為IIb期及以上；④術前因各種原因中途退出本研究。本研究經院倫理委員會審批，納入對象均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1調查方法對納入本研究的所有宮頸癌患者進行為期1年隨訪調查，檢測外周血TAP、ICAM-1及陰道分泌物HPV，隨訪期間若確診患者復發立即停止檢測。

1.2.2血清TAP檢測對照組于入組后完成血清TAP指標檢測，宮頸癌組患者于術前、術后出院時及術后12個月內入院復查時進行檢測。取受檢人員食指末端梢血兩滴置于兩片涂片上，風干后利用TAP檢測試劑均勻間隔相同滴入兩片涂片上，加凝聚助劑干燥，做成血液標本即表面有圓形斑點，利用生物顯微鏡、攝像機圖像傳感器、計算機TAP檢測系統進行觀察和檢測TAP聚物面積。

1.2.3HPV檢測受檢者膀胱截石位，常規收集陰道分泌物，采用Cobas HPV檢測試劑盒檢測，采用聚合酶鏈反應擴增和熒光檢測技術，由?？萍夹g人員嚴格按照試劑盒說明書處理標本提取DNA后進行PCR擴增并判定結果。每次實驗均設置陰性、陽性對照作為質量控制。對照組人員于入組后完成陰道分泌物HPV標本檢測，宮頸癌組于術前、術后3個月及術后12個月內入院復查時完成陰道分泌物HPV檢測。

1.2.4ICAM-1指標檢測對照組入組后取空腹靜脈血離心分離上清，置ICAM-1酶標板上，加待測標本40μg，充分混勻后放置于37℃室溫環境，45 min后洗滌并加抗體工作液，加底物工作液40μg，置于37℃暗處反應15 min，加終止液混勻；450 nm處測吸光度值，根據標準曲線計算每管組織液中ICAM-1水平，所有標本采用雙孔檢測，數值采取復孔均值。宮頸癌組于術前、術后出院時及術后12個月內入院復查時進行檢測，檢驗步驟均同上。

1.3 觀察指標

對比宮頸癌組術前及對照組各項檢測指標水平；分析宮頸癌組術后復發情況并對比臨床資料，對比復發組及未復發組各時間段指標檢測水平；分析外周血TAP、HPV、ICAM-1檢測診斷效能，各指標水平與圍絕經期宮頸癌變患者預后的相關性。

1.4 評估標準

手術后復發指宮頸癌經手術徹底切除，手術標本切緣無腫瘤，術后1年內出現新發腫瘤，且與原腫瘤細胞一致，最終確診依據為病理組織學，若無法行病理診斷則為PET/CT等影像學檢查共同診斷[7]。按部位復發分為中心性復發(包括宮頸、陰道或宮體)，宮旁復發(包括盆壁)，中心性復發和宮旁復發統稱為盆腔復發；遠處復發(或轉移)指盆腔外全身不同部位的腫瘤轉移(包括淋巴結轉移、肺轉移、肝轉移、骨轉移、腦轉移等)。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 兩組臨床基線資料

對照組患者年齡(47.0±3.7)歲(40～55歲)，體質指數(BMI)(21.7±2.6)kg/m2(18.6～26.8kg/m2)；宮頸癌組年齡(46.7±3.9)歲(43～54歲)，BMI(21.6±2.5)kg/m2(18.4～27.1kg/m2)。兩組對比無差異(t=-0.533、-0.300，P=0.594、0.764)。

2.2 兩組各指標檢測水平

宮頸癌組血清TAP、ICAM-1水平及高危型HPV陽性率均高于對照組(均P<0.001)。見表1。

表1 術前兩組各項指標檢測水平對比

2.3 宮頸癌組術后1年復發情況

隨訪1年，統計圍絕經期宮頸癌患者預后情況，分為復發組(37例)及未復發組(95例)，兩組臨床基線資料對比未見差異(P>0.05)。見表2。

表2 宮頸癌術后1年不同預后患者臨床基線資料對比

2.4 宮頸癌組術后不同時期隨訪指標檢測水平

血清TAP、ICAM水平及高危型HPV陽性率，術前、術后3個月復發組與未復發組未見差異(均P>0.05)；術后12個月，復發組均高于術后3個月，未復發組均低于術前及術后3個月，且復發組各指標水平均高于未復發組(均P<0.001)。見表3。

表3 兩組不同時期各指標檢測水平對比

2.5 外周血TAP、ICAM-1及HPV預測術后復發效能

ROC曲線分析顯示，血清TAP、ICAM-1及HPV聯合檢測曲線下面積(AUC)高于單項指標檢測。見表4。

表4 TAP、ICAM-1、HPV預測宮頸癌術后復發價值

2.6 TAP、ICAM-1、HPV與圍絕經期宮頸癌變患者手術預后的相關性

Spearman相關系數分析顯示，TAP、ICAM-1水平及高危型HPV陽性率與患者手術預后均呈正相關(r=0.788、0.728、0.748，均P<0.001)。

3 討論

臨床數據表明，宮頸癌患者接受手術治療后5年內再復發率為15%，術后復發是導致患者死亡率上升的重要危險因素，而復發的重要機制及臨床特征為惡性腫瘤細胞增殖并遷移，術后復發是導致宮頸癌患者死亡的重要原因[8]。臨床中雖然對宮頸癌術式進行不斷改良，使其趨向操作簡單化、微創化發展，臨床療效也得到有效提升，但對患者而言，體內存在的癌變細胞已喪失正常細胞形態及功能，具有難以抑制和易轉移等特點，且多數患者就診較晚，手術治療后仍會出現復發現象。尋找有效的預測和診斷標志物，對術后早期預警尤為重要[9-10]。

本研究結果顯示，圍絕經期宮頸癌變患者術前TAP、ICAM-1水平及高危型HPV陽性率均呈水平異常升高，術后出院時均明顯降低水平趨向正常，而1年隨訪中，復發患者各指標水平與未復發患者存在明顯差異，提示TAP、ICAM-1及高危型HPV陽性率與宮頸癌變發生發展有關。分析可能機制：TAP是惡性腫瘤患者機體中癌細胞進行新陳代謝所排放的一類異常糖蛋白與鈣-組蛋白的復合物，患者體內正常細胞在癌變過程中，細胞膜表面的聚糖結構受其影響而導致分支增加，這一過程誘導TAP大量釋放，因而宮頸癌變術后復發患者TAP指標異常升高，楊雙祥等[11]研究結果也證實了這一點。細胞黏附分子(CAM)泛指一類調節細胞與細胞間、細胞與細胞外基質間相互結合和起黏附作用的膜表面糖蛋白，目前發現有ICAM-1、ICAM-2和ICAM-3[12]。國內一項關于宮頸癌變機制的研究顯示，宮頸癌的原發灶及淋巴轉移灶中檢測到 ICAM-1 表達，轉移灶中 ICAM-1表達明顯高于原發灶，分析原因可能 ICAM-1能與淋巴細胞功能相關蛋白結合，從而參與機體免疫、炎癥及腫瘤的發生和轉移等過程[13]。HPV是臨床已知能夠導致宮頸癌發生的重要因素之一，已感染病毒的患者若不及時采取積極有效的治療方案，很有可能導致病毒進一步發展，進而促進宮頸癌變，甚至出現浸潤瘤[14]。HPV病毒的感染方式具有多樣性。相關研究表明，宮頸炎的發生與HPV的感染率關系較低，而宮頸癌變發生受HPV的感染率影響較高，可見，宮頸癌術后復發與HPV感染也具有相關性[15]。本研究對宮頸癌根治術患者隨訪觀察，明確根治術能夠有效切除患者的腫瘤病灶，有效抑制了宮頸癌細胞的進一步分化，避免了癌細胞嚴重惡化，減少患者體內TAP、ICAM-1、HPV等產生。ROC曲線分析，3項指標聯合檢測預測患者術后復發有較高效用，且3項指標與患者預后均密切相關，表明腹腔鏡宮頸癌根治術后監測TAP、ICAM-1、高危型HPV等指標對評估患者復發風險具有重要參考價值。

綜上所述，腹腔鏡宮頸癌根治術后患者，聯合TAP、ICAM-1、高危型HPV可提高疾病復發的預測效能，以盡早預后評估并對復發風險做出針對性處理，提高宮頸癌患者的術后生存率。