聚維酮碘對青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚的急性毒性和耗氧率影響

劉瑞苛，董艷珍*，徐大勇，鄧思紅

（1.西昌學院動物科學學院，四川 西昌 615013；2.喜德正源水產有限公司，四川 喜德 616750）

0 引言

青海湖裸鯉（Gymnocyprisprzewalskii）俗稱“湟魚”，隸屬鯉形目（Cypriniformes）、鯉科（Cyprinidae）、裂腹魚亞科（Schizothoracinae）、裸鯉屬（Gymnocypri）。該物種是青海湖中經過長期地理隔離演化而成的冷水性特有無磷魚種，主要分布于青海湖及其附屬河流等［1］。青海湖裸鯉適應性強，幼魚孵出后，就會成群游泳，一般多集群于河口淺水地區，作為青海湖唯一的優勢種類，在青海湖生態系統處于核心地位［2］?；ò呗沲帲℅ymnocypriseckloni）也隸屬鯉形目（Cypriniformes）、鯉科（Cyprinidae）、裂腹魚亞科（Schizothoracinae）、裸鯉屬（Gymnocypri），體背呈暗褐色或者青灰色，腹部呈淺黃色或是銀灰色［3］?；ò呗沲帪辄S河上游經濟魚類，屬于雜食性魚類，食性范圍廣，一般棲息于水的中層，許多特征與青海湖裸鯉相似，其不同點在于口裂大，上頜稍突于下頜之前，在四川涼山彝族自治州的喜德縣、越西縣等都有養殖。由于近幾年來環境破壞嚴重，造成青海湖裸鯉漁業資源枯竭［4］，野生種群數量快速減少。為了保護國內相關資源，學者對于青海湖裸鯉進行繁殖、營養等方面的研究［5-7］，但是目前對于青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交后代相關研究卻未曾見到。本試驗材料為青海湖裸鯉與花斑裸鯉的雜交后代，雜交不僅可以綜合雙親的優良性狀，還可以產生雙親沒有的新性狀，使后代獲得可利用的雜種優勢。

聚維酮碘（povidone iodine）又稱碘優、強力碘［8］，是水產養殖中廣泛使用的殺菌劑，具有極強的殺菌能力，也是國際公認的高效、廣譜、無毒的消毒殺菌產品，對細菌有很強的滅殺作用，常用于防治水產動物爛鰓、腐皮等細菌性疾?。?-10］，但超過一定的劑量也會對水產動物產生危害。目前，國內不少學者研究了聚維酮碘對魚類毒性，如泥鰍［11］、鯽魚［12］、梭魚［13］等，但其對青海湖裸鯉及花斑裸鯉毒性的相關報道卻很少。

本試驗研究了聚維酮碘對青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚的急性毒性，在此基礎上探索了不同濃度聚維酮碘對于青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚耗氧率的影響，為今后青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚的人工養殖過程中正確使用該藥提供一定的參考依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料及藥品

材料：青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚（以下簡稱試驗魚），由喜德正源水產良種場提供，體長7~8 cm，體質量（15.34±0.23）g，體型勻稱，健康活潑。試驗前在室內魚缸暫養4 d，每天投餌2次（每日早上9點及下午6點），停食24 h再開始試驗，試驗期間不投飼料。

藥品：聚維酮碘，由河南新鄉市華畜有限公司生產，生產批號20230402，有效碘質量分數為10%。

1.2 試驗設計

1.2.1 急性毒性試驗

試驗在（45 cm×38 cm×20 cm）的玻璃缸中進行，試驗用水為曝氣3 d以上的自來水，加水量為30 L，水溫（19±1）℃，pH 7.5±0.3，溶解氧（dissolved oxygen，DO）（7.6±0.2）mg/L。

在預試驗基礎上，通過等差間距法設置聚維酮碘1.64、2.74、3.84和4.93 μmol/L共4個濃度梯度，設置一組空白對照，每個濃度梯度設置3個平行組，每個平行組放入試驗魚10尾。試驗開始后持續觀察試驗魚的情況，記錄24、48、72、96 h聚維酮碘各濃度下試驗魚的死亡情況。試驗期間每24 h更換藥液1次。在試驗過程中，除停食外，其他條件都和常規培養的條件相同。以魚體失去活力，玻璃棒輕輕接觸魚體30 s內無反應為死魚的判斷依據［14］。

聚維酮碘對試驗魚的急性毒性試驗數據以3個平行組的平均值表示。根據所得數據擬合聚維酮碘溶液濃度（Y）與試驗魚死亡率（X）的回歸方程，通過回歸方程計算出聚維酮碘對試驗魚24、48、72、96 h的半數致死濃度（median lethal concentration，LC50），并計算聚維酮碘對試驗魚的安全濃度（safe concentration，SC）［15］，計算公式如式（1）所示：

式中：cSC表示安全濃度，μmol/L；c48表示48 h時的半致死濃度，μmol/L；c24表示24 h時的半致死濃度，μmol/L。

1.2.2 耗氧率試驗

根據急性毒性試驗結果，選擇安全濃度以及生產上的使用濃度進行耗氧率的測定，每個濃度設置3個平行組，每個平行組放入10尾試驗魚。將試驗魚放入盛有30 L水的玻璃缸（45 cm×38 cm×20 cm）中，試驗用水為曝氣3 d以上的自來水，水溫（19±1）℃，pH 7.5±0.3，使用保鮮膜密封玻璃缸。玻璃缸中試驗魚死亡半數時結束試驗，魚體死亡判斷標準同1.2.1。使用碘量法［16］測量試驗前和試驗后水體的溶解氧質量濃度，計算耗氧率，計算公式如式（2）所示：

式中：Q為耗氧率，mg/（g·h）；V為容器實際體積，L；A1為放魚前水體的溶解氧質量濃度，mg /L；A2為試驗魚死亡半數時水體的溶解氧質量濃度，mg /L；M為試驗魚的體質量，g；T為試驗時間，h。

1.3 數據分析

用Excel 2019對試驗數據進行圖表制作和基本計算；利用SPSS27軟件算出線性回歸方程。利用SPSS27軟件進行耗氧率以及窒息點的方差分析。

2 結果與分析

2.1 聚維酮碘對試驗魚的毒性癥狀及急性毒性

試驗剛開始時各濃度組均未出現明顯中毒現象，2 h以后4.93 μmol/L組的試驗魚出現焦慮不安的現象，之后魚體翻肚，倒懸于水中，7 h左右出現死亡個體，死亡個體鰓和皮膚出現大量黏液，體色發黑。對照組幼魚未出現異?，F象和死亡個體。

不同濃度聚維酮碘處理下試驗魚平均死亡率不同，隨著聚維酮碘濃度升高，試驗魚死亡數量增加，即青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚（試驗魚）的死亡率隨著聚維酮碘濃度的增大而升高；最高濃度試驗組試驗魚在24 h的死亡率達到100%，最低濃度組試驗魚在72 h才出現死亡個體，空白對照組96 h未出現死亡個體（表1）。

表1 不同濃度聚維酮碘處理下試驗魚的死亡率

聚維酮碘溶液濃度（Y）與試驗魚死亡率（X）呈顯著或極顯著的線性相關；聚維酮碘溶液對試驗魚24、48、72、96 h 的 LC50分別為3.37 、3.15、2.75和2.51 μmol/L，安全濃度為0.84 μmol/L（表2）。

表2 聚維酮碘對試驗魚半致死濃度（LC50）和安全濃度（SC）

2.2 聚維酮碘對試驗魚的耗氧率及窒息點的影響

本試驗測定青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚在聚維酮碘下安全濃度0.84和生產使用濃度0.22 μmol/L的耗氧率與窒息點如表3所示。對于耗氧率，安全濃度組和生產使用濃度組均顯著高于對照組（P<0.05），而安全濃度組的耗氧率又顯著高于生產濃度組（P<0.05）。對于窒息點，安全濃度組顯著高于生產濃度組和對照組（P<0.05），生產濃度組高于對照組，但二者差異無統計學意義（P>0.05）。

表3 試驗魚的耗氧率及窒息點

3 討論與結論

聚維酮碘會影響青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚的存活，濃度越高、作用時間越長，青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚的死亡率越高。聚維酮碘是一類廣譜消毒殺菌劑，作用于體表，具有強氧化性。當前市售的聚維酮碘大多沒有詳細的使用說明，養殖戶在水產養殖中通常憑借經驗進行潑灑，有相當高的不確定性［17］，在水產苗種培育過程中聚維酮碘的用量一般控制在0.16~0.33 μmol/L。相關研究也表明魚類種類、規格等都會影響魚類對聚維酮碘的耐受性，如聚維酮碘對異育銀鯽的安全濃度為2.05 μmol/L［18］，對斜帶石斑魚幼魚的安全濃度為3.94 μmol/L［19］，對泥鰍的安全濃度為24.66 μmol/L［11］。本研究得出的安全濃度為0.84 μmolL，表明青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚對聚維酮碘的耐受力較低，參考《化學農藥環境安全評價試驗準則》中農藥對魚類毒性的分類標準（表4），聚維酮碘對青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚為中毒藥物，在生產中可以使用，但是需要根據實際情況綜合考慮各因素（如水溫、水質、魚體情況等）的影響來確定用量。

表4 不同質量濃度藥物對魚類毒性的分類標準

雷曼紅等［20］認為，魚類窒息點能反映其生理機能狀態，窒息點最低時是魚類抵抗力最強、體質最好、生理機能最佳的時候。本研究表明安全濃度及生產濃度下，聚維酮碘顯著提高青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚的耗氧率，提高幼魚窒息點。

高濃度的聚維酮碘會使青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚直接死亡，低濃度的聚維酮碘會使青海湖裸鯉（♀）×花斑裸鯉（♂）雜交幼魚的耗氧率和窒息點都顯著升高，因此生產上在使用聚維酮碘時要嚴格控制用量，密切關注用藥后幼魚的反應，及時處置。