采精頻率對嘉黎牦牛精液品質的影響

王耀梅，袁 越，趙彥玲

（西藏農牧學院 動物科學學院，西藏 林芝 860000）

牦牛精液品質受多種因素影響，其中采精頻率是一個非常重要的因素[1]。研究最佳采精頻率對充分合理地利用牦牛種公牛具有重要意義。在精液采集過程中需要根據不同的牛種、年齡、身體狀況、繁殖目的等因素合理設定采精頻率[2]。采精頻率對于保障公牛的生殖健康和精液品質非常重要，如果采精頻率過低，將導致公牛射精不充分、精子老化、精液積聚過多等，影響精液的質量和產量；如果采精頻率過高，就會導致公牛體力不足、精液質量下降，影響精子的品質和數量，甚至還會影響公牛的身體健康[3-5]。原因是采精頻率過低，會使附睪內儲存的精液時間過長，導致精子密度偏低，精子長時間停留在附睪內會降低精子的活力和受孕能力，增加精子死亡率；而采精頻率過高，精液在附睪內儲存的時間短，會導致精子成熟率降低或數量減少，生產效率顯著下降[6]。因此，本研究利用計算機輔助精液分析儀對不同采精頻率的嘉黎牦牛的精液品質進行測定，以探索最佳采精頻率，為嘉黎牦牛種公牛的合理應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

選用拉薩市當雄縣當雄牦牛凍精站中體況、年齡相近的12頭健康成年嘉黎牦牛作為試驗動物。

1.2 試驗方法

按照不同的采精頻率將牦牛分為A、B、C、D 4個組，每組3頭。A組采精2次/周、B組采精3次/周、C組采精4次/周、D組采精5次/周。試驗采用假陰道法采精，采精時間為早晨9：00左右，試驗期為1周，每次采精完成后立即送往實驗室進行精液品質檢測。

1.3 測定指標及測定方法

用計算機輔助精液分析系統（casa）檢測精子濃度、活力和運動參數等指標。把采集的精液放在37 ℃水浴鍋中孵育10 min后，將3 μL精液滴在預熱（37 ℃）的makler精子計數板上，待精液靜止穩定后，放置到顯微鏡下，采用精子圖像分析儀檢測精子的濃度、活力和運動參數等相關指標。

用改良巴氏染色方法檢測精子畸形率和頂體完整率?？捡R斯亮藍染色液在37 ℃水浴中預熱10 min，將精子涂片浸泡在染色液中5～7 min后沖洗干凈并晾干，干燥后密封，用改良巴氏染色法染色，在顯微鏡下觀察精子畸形率和頂體完整率。

1.4 統計分析

數據均以“平均值±標準差”表示，精子的各項指標數據用SPSS 19.0軟件進行分析，均值比較采用單因素方差分析，用鄧肯多重比較進行顯著性分析，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 采精頻率對嘉黎牦牛精液品質的影響

從表1可以看出，嘉黎牦牛采精頻率為3次/周時，精液品質達到最高。其中，采精頻率為3次/周的精子密度顯著高于2次/周與5次/周的精子密度（P＜0.05），而與4次/周的精子密度差異不顯著（P＞0.05）；采精頻率為3次/周的精子活力也顯著高于其他組（P＜0.05）；采精頻率2次/周、3次/周、4次/周時的精液量各組間差異不顯著（P＞0.05），但均與5次/周組差異顯著（P＜0.05），精液量隨著采精頻率的增加而逐漸減少；采精頻率為2次/周、3次/周時精子畸形率差異不顯著（P＞0.05），但均與采精頻率為4次/周、5次/周的精子畸形率差異顯著（P＜0.05）；采精頻率為5次/周時精液的頂體完整率顯著低于其他組（P＜0.05）。

表1 采精頻率對嘉黎牦牛精液品質的影響

2.2 采精頻率對嘉黎牦牛精子運動速度的影響

由表2可知，精子的曲線運動速率（VCL）、平均路徑速度（VAP）、直線速率（VSL）均在采精頻率為3次/周時達到最高值，與4次/周差異不顯著，與2次/周和5次/周差異顯著（P＜0.05）。

表2 采精頻率對嘉黎牦牛精子運動速度的影響

精液的數量和質量易受環境、天氣和遺傳因素影響[7]，公牦牛精液質量的好壞直接影響牦牛的受孕率，其中采精頻率是一個重要的影響因素。本試驗結果顯示，精子的密度和活力指標均在采精頻率為3次/周時達到峰值；精液量在采精頻率為2次/周時最多，當采精頻率增加到5次/周時，精液量最少；精子的VCL、VAP、VSL均在3次/周時達到最高值，與4次/周差異不顯著，與2次/周和5次/周差異顯著。Meding[8]的研究表明，采集精液頻率過高的公豬精液品質相對較差。Audet等[9]和胡國娟[10]的研究結果均表明，成年種公豬每隔5～6天采精1次，其精液品質最佳。謝靜靜等[11]的研究結果表明，豬采精間隔為3～5 d時綜合性能最佳。易宗容等[12]研究發現，采精頻率為3次/周時精液品質最佳，精子頂體完整率隨著采精頻率的增加而出現顯著下降趨勢。陽文攀等[13]的研究結果表明，豬的采精間隔時間越長，其精液量、精子活力、精液密度指標越好，采精間隔為5 d時綜合性能最佳，但長時間不采精會導致精子活力降低，這表明采精頻率對精液質量有較大影響。也有研究發現，精子活力高說明精子的運動性能較強，相關的運動參數也會相應提高。在本試驗中，精子的VCL、VAP、VSL隨著采精頻率的增加呈現先增加后下降的趨勢，在3次/周時，VCL、VAP、VSL指標達到峰值。李碧波等[14]的研究表明，高頻率的采精會給公羊帶來過度刺激，導致其陰莖難以恢復，出現疲憊、精神不佳和性欲下降等情況，同時會影響公羊的正?；顒雍头敝衬芰?。張佳慧等[15]的研究結果表明，湖羊的采精量及精子密度會隨著采精頻率的增加而下降。Bunaciu等[16]和趙輝玲等[17]的研究結果表明，兔的精子密度和采精量均會隨著采精頻率的增加而出現下降趨勢。精子密度和射精量隨著采精頻率的增加而降低，動物由于品種不同，其合適的采精頻率也有所差異。李雪賢等[18]研究發現，種公驢采精頻率為3 d/次時最佳，梅軍四等[19]研究結果表明，長白種公豬精子的畸形率、精液密度和采精量隨著采精頻率的增加出現明顯下降趨勢。本試驗結果表明，除射精量在采精頻率為2次/周時較高外，精子密度、精子活率、精子的曲線運動速率、平均路徑速度、直線速率均在采精頻率為3次/周時最佳。

3 結論

嘉黎牦牛采精頻率為3次/周時，精子的密度、活力高于2次/周、4次/周、5次/周；精液量和精子頂體完整率在采精頻率為2次/周時達到最高；精子畸形率在采精頻率為3次/周時最低，呈現出隨采精頻率的增加而升高的趨勢。精子曲線運動速率、平均路徑速度、直線速率均在3次/周時達到最高值。綜上所述，嘉黎牦牛的最佳采精頻率為2～3次/周。