紫花牡荊素通過上調miR-342-3p抑制宮頸癌HeLa細胞糖酵解

林佳芝, 寧舒婷, 鄧金金, 馮偉峰, 寧映霞,3*

(1.廣州醫科大學 附屬第一醫院 婦產科, 廣東 廣州 510120; 2.暨南大學 附屬第一醫院 中醫科, 廣東 廣州 510630;3.暨南大學 附屬第一醫院 婦產科, 廣東 廣州 510630)

宮頸癌是全球的四大癌癥之一,同時也是女性腫瘤相關死亡的四大原因之一[1]。隨著人乳頭狀瘤病毒疫苗的推廣,宮頸癌的發病率在全球范圍內有所下降,但是在全球大部分的中低水平發展中國家宮頸癌的發病率及相關的死亡人數仍然居高不下[2]。早期宮頸癌患者可通過手術治療而治愈,但晚期患者生存率很低[3]。因此,迫切需要研究和開發新的治療宮頸癌的靶向藥物以改善宮頸癌晚期患者的臨床結局。

據報道,相比于正常細胞,腫瘤細胞更加傾向于有氧糖酵解和葡萄糖的攝取[4],并將所攝取的葡萄糖代謝為乳酸,而不是在有氧條件下通過氧化磷酸化產生能量,這一現象被稱為“Warburg效應”[5]。微小RNA(microRNAs, miRNAs)是一類長度大約為19～24個核苷酸的內源性、進化保守的非編碼單鏈RNA,是一種轉錄后調節因子[6]。miRNAs異常表達通常會引起包括腫瘤在內的多種疾病發生[6-8]。研究發現miR-342-3p在宮頸癌中呈低表達狀態,并且miR-342-3p與宮頸癌的增殖、侵襲和遷移有關[9-10]。然而有關于miR-342-3p與宮頸癌糖酵解關系的研究目前少見報道。

紫花牡荊素(Casticin)是從牡荊屬植物提取的一種天然黃酮類化合物,是中國傳統中草藥蔓荊子的主要活性成分之一[11],已證明具有消炎和抗腫瘤等多種藥理活性[12]。然而,關于紫花牡荊素能否通過上調miR-342-3p抑制宮頸癌HeLa細胞的糖酵解尚未見報道。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細胞系

宮頸癌HeLa細胞系細胞和永生化人宮頸上皮細胞H8細胞系細胞購自中國科學院細胞庫(上海),凍存于湖南師范大學醫藥學實驗管理中心。

1.1.2 受試物

紫花牡荊素由湖南師范大學醫學院藥學系曹建國教授惠贈,本品性狀為黃色晶狀體,純度為99%。將紫花牡荊素溶解于二甲亞砜(DMSO)中,配制成質量濃度為1 mg/mL的紫花牡荊素儲存液,保存于4℃冰箱。

1.1.3 主要試劑與耗材

DMEM高糖培養基購自美國Gibco公司;胎牛血清購自OriCell?公司;雙抗混合液購自Coolaber?公司;Costar 6孔板細胞培養板和T25培養瓶購自美國Corning公司;Cell Counting Kit-8購自美國MedChemExpress公司;micrON hsa-miR-342-3p mimic、micrOFF hsa-miR-342-3p inhibitor、RiboFECTTMCP Buffer轉染試劑購自中國廣州銳博生物科技有限公司;miRcute miRNA提取分離試劑盒購自中國天根生化科技有限公司;All-in-oneTMmiRNA first-strand cDNA synthesis kit和All-in-oneTMqPCR Mix試劑盒購自美國Genecopoeia公司;葡萄糖(GO)測定試劑盒和乳酸檢測試劑盒購自Sigma公司。

1.1.4 主要儀器設備

超凈工作臺(蘇州凈化設備公司;型號YJ-875);二氧化碳培養箱(美國Thermo公司;型號311);普通高速離心機(上海安亭科學儀器廠;型號TGL-16C);熒光倒置顯微鏡(日本Olympus公司;型號:BX41);Mastercycler Gradient PCR儀(德國eppendorf公司);CFX connect熒光定量PCR分析儀(美國伯樂公司);多功能酶標儀(美國Bio-tek公司;型號Synergy 2型);分光計閱讀器(上海賽默飛世爾儀器有限公司)。

1.2 研究方法

1.2.1 細胞培養

宮頸癌HeLa細胞和人宮頸上皮永生化細胞H8細胞用含雙抗混合液和10%胎牛血清的DMEM高糖培養基,在37 ℃的二氧化碳培養箱中貼壁培養。

1.2.2 紫花牡荊素處理

為了確定紫花牡荊素合適的使用濃度,用不同濃度的紫花牡荊素(0,3,10,30,100,300 nmol/L)處理宮頸癌HeLa細胞和永生化人宮頸上皮細胞H8細胞24 h。

為了測定紫花牡荊素對HeLa細胞miR-342-3p表達、葡萄糖消耗量和乳酸產量的影響,使用0,10,30,100 nmol/L的紫花牡荊素處理HeLa細胞24 h。

為了檢測紫花牡荊素聯合miR-342-3p模擬物或抑制物對HeLa細胞miR-342-3p表達、葡萄糖消耗量和乳酸產量的影響,用或不用紫花牡荊素(30 nmol/L)處理經miR-342-3p模擬物或抑制物轉染的HeLa細胞24 h。

1.2.3 CCK-8實驗

按照Cell Counting Kit-8試劑盒說明書,將宮頸癌HeLa細胞和永生化人宮頸上皮細胞H8細胞以(1×103)/孔接種于96孔板中,用紫花牡荊素(0,3,10,30,100,300 nmol/L)處理上述細胞,置于37 ℃二氧化碳培養箱中培養24 h。用含10 μL CCK-8溶液的100 μL生長培養基更換原有的培養基, 37 ℃培養箱繼續孵育2 h。用分光計閱讀器測量450 nm處的吸光度,評估上述兩種細胞的細胞活性,確定紫花牡荊素的合適的藥物使用濃度。

1.2.4 miRNA轉染

將對數生長期HeLa細胞以(1×106)/孔接種于6孔板中,隨后按照micrON hsa-miR-342-3p mimic的說明書的方法,將miR-342-3p模擬物(miR-342,轉染濃度50 nmol/L)和模擬物陰性對照寡核苷酸(miR-NC)用RiboFECTTMCP Buffer轉染試劑轉入HeLa細胞。按照micrOFF hsa-miR-342-3p inhibitor說明書將miR-342-3p抑制物(Anti-342,轉染濃度100 nmol/L)和抑制物陰性對照寡核苷酸(Anti-NC)使用RiboFECTTMCP Buffer轉染試劑轉入HeLa細胞。細胞轉染后繼續于二氧化碳培養箱培養24 h獲得轉染的細胞,用于后續實驗。

1.2.5 RT-qPCR

根據miRcute miRNA提取分離試劑盒的說明書提取各組細胞的總microRNA,使用酶標儀測定總microRNA的A260/A280值,并根據All-in-oneTMmiRNA first-strand cDNA synthesis kit說明書將所提取的各組總microRNA在PCR儀上進行逆轉錄反應合成cDNA鏈,隨后根據All-in-oneTMqPCR Mix試劑盒說明書用CFX connect熒光定量PCR分析儀完成qPCR反應。以U6作為內參,結果用 2-ΔΔCt方法分析。miR-342-3p和內參 U6 引物如表1所示。

表1 引物序列Table 1 Primer sequences

1.2.6 葡萄糖消耗和乳酸產物的測定

將對數生長期HeLa細胞以(1×106)/孔接種于6孔板,使用不含酚紅的DMEM高糖培養基進行培養,24 h后收集細胞培養液,按照葡萄糖(GO)測定試劑盒說明書檢測各組細胞培養液中葡萄糖濃度,與對照組細胞培養液的葡萄糖濃度的濃度差即為葡萄糖消耗量。按照乳酸檢測試劑盒的說明書檢測不同處理組細胞和對照組細胞培養液中乳酸鹽水平。

1.3 統計學分析

使用SPSS 20.0軟件分析所獲得的各組實驗數據。各實驗組數據用均數±標準差表示,使用One Way ANOVA方差分析;當方差齊性時,多組均數間比較采用LSD法,當方差不齊時,多組均數間采用Dunnett’s檢驗。以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 紫花牡荊素對HeLa細胞的細胞活力的影響

檢測不同濃度紫花牡荊素對 HeLa細胞和 H8細胞的存活力的影響,結果如圖1所示:與對照組(0 nmol/L)紫花牡荊素處理的細胞相比,100和300 nmol/L的紫花牡荊素顯著抑制HeLa細胞的存活力,但不影響正常H8細胞的存活力(P<0.05)。由于100 nmol/L和300 nmol/L的紫花牡荊素均對H8細胞無細胞毒性,而對HeLa細胞具有顯著的細胞毒性,因此在后續實驗中選用最少用藥劑量為本研究的最大用藥濃度,即確定本研究實驗中紫花牡荊素的用藥濃度范圍為0,10,30,100 nmol/L。

1)與對照組比較,P<0.05;2)與100 nmol/L的紫花牡荊素比較,P<0.051)Compared with control group, P<0.05; 2)Compared with 100 nmol/L Casticin,P<0.05圖1 紫花牡荊素對宮頸癌HeLa細胞的細胞毒性作用Figure 1 The toxic effect of Casticin on cervical cancer HeLa cells

2.2 紫花牡荊素對宮頸癌抑癌性miRNAs表達水平的影響

紫花牡荊素對宮頸癌抑癌性miRNAs表達水平的影響結果如圖2所示:紫花牡荊素明顯上調miR-342-3p、miR-43c-5p、miR-1284的表達水平,尤其是顯著上調miR-342-3p的表達水平(P<0.05)。

1)與對照組(0.1%DOSM)比較,P<0.051) Compared with control group (0.1%DOSM), P<0.05圖2 紫花牡荊素對宮頸癌抑癌性miRNAs表達水平的影響Figure 2 The effect of Casticin on the expression level of cancer-suppressing miRNAs in cervical cancer

2.3 紫花牡荊素對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響

紫花牡荊素對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響結果如圖3所示:10、30、100 nmol/L的紫花牡荊素上調HeLa細胞miR-342-3p表達,其中100 nmol/L的紫花牡荊素上調HeLa細胞miR-342-3p表達最為顯著。

1)與對照組比較,P<0.05;2)與10 nmol/L的紫花牡荊素比較,P<0.05;3)與30 nmol/L的紫花牡荊素比較,P<0.051) Compared with control group, P<0.05; 2)Compared with 10 nmol/L Casticin,P<0.05; 3)Compared with 30 nmol/L Casticin,P<0.05圖3 紫花牡荊素對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響Figure 3 The effect of casticin on the expression of miR-342-3p in HeLa cells

2.4 紫花牡荊素對HeLa細胞糖酵解的影響

紫花牡荊素對HeLa細胞糖酵解的影響結果如圖4所示:10、30、100 nmol/L的紫花牡荊素處理24 h后均降低HeLa細胞對葡萄糖的消耗量(圖4A)和抑制HeLa細胞的乳酸產量(圖4B),與濃度10、30 nmol/L的紫花牡荊素相比,100 nmol/L的紫花牡荊素顯著降低體外培養HeLa細胞的葡萄糖消耗量和乳酸產量。

1)與對照組比較,P<0.05;2)與10或30 nmol/L的紫花牡荊素比較,P<0.051)Compared with control group, P<0.05; 2)Compared with 10 nmol/L or 30 nmol/L Casticin,P<0.05A:紫花牡荊素處理的HeLa細胞葡萄糖消耗量;B:紫花牡荊素處理的HeLa細胞乳酸產量A: The glucose consumption in HeLa cells treated with Casticin; B: The lactate production in HeLa cells treated with Casticin.圖4 紫花牡荊素對HeLa細胞糖酵解的影響Figure 4 The effect of Casticin on glycolysis of HeLa cells

2.5 miR-342-3p模擬物對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響

miR-342-3p模擬物對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響結果如圖5所示:與未轉染的HeLa細胞和轉染陰性對照組的細胞(miR-NC)相比,miR-342-3p模擬物顯著上調HeLa細胞的miR-342-3p表達(P<0.05)。

1)與未轉染的HeLa細胞或轉染miR-NC的HeLa細胞比較,P<0.05。1) Compared with HeLa or miR-NC, P<0.05.圖5 miR-342-3p模擬物對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響Figure 5 The effect of miR-342-3p mimic on the expression of miR-342-3p in HeLa cells

2.6 miR-342-3p模擬物對HeLa細胞糖酵解的影響

miR-342-3p模擬物對HeLa細胞糖酵解的影響結果如圖6:miR-342-3p模擬物降低HeLa細胞的相對葡萄糖消耗量和乳酸產量(P<0.05)。

1)與HeLa細胞或miR-NC比較,P<0.051)Compared with HeLa cells or miR-NC, P<0.05A:miR-342-3p模擬物對HeLa細胞的葡萄糖消耗量的影響;B:miR-342-3p模擬物對HeLa細胞乳酸產量的影響A: The effect of miR-342-3p mimic on glucose consumption in HeLa cells; B:The effect of miR-342-3p mimic on lactate production in HeLa cells.圖6 miR-342-3p模擬物對HeLa細胞糖酵解的影響Figure 6 The effect of miR-342-3p mimic on glycolysis of HeLa cells

2.7 miR-342-3p模擬物聯合紫花牡荊素對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響

miR-342-3p模擬物聯合紫花牡荊素對 HeLa細胞miR-342-3p表達水平的作用,結果如圖7所示:miR-342-3p模擬物和30 nmol/L紫花牡荊素均上調HeLa細胞的miR-342-3p表達;miR-342-3p模擬物增強紫花牡荊素上調HeLa細胞的miR-342-3p表達的作用(P<0.05)。

1)與miR-NC比較,P<0.05;2)與單獨的miR-342或30 nmol/L的紫花牡荊素比較,P<0.051)Compared with miR-NC, P<0.05; 2)Compared with miR-342 or 30 nmol/L Casticin alone,P<0.05圖7 miR-342-3p模擬物聯合紫花牡荊素對HeLa細胞miR-342-3p表達水平的影響Figure 7 The effect of miR-342-3p mimic combined with Casticin on the expression level of miR-342-3p in HeLa cells

2.8 miR-342-3p模擬物聯合紫花牡荊素對HeLa細胞糖酵解的影響

miR-342-3p模擬物聯合紫花牡荊素對HeLa細胞糖酵解的影響結果如圖8所示:miR-342-3p模擬物轉染和30 nmol/L的紫花牡荊素處理均降低HeLa細胞葡萄糖消耗量(A)和抑制HeLa細胞的乳酸產生(B),并且miR-342-3p模擬物增強紫花牡荊素抑制HeLa細胞葡萄糖消耗量(A)和抑制HeLa細胞的乳酸產生的作用(B)。

1)與miR-NC比較,P<0.05;2)與單獨的miR-342或30 nmol/L的紫花牡荊素比較,P<0.051)Compared with miR-NC, P<0.05; 2)Compared with miR-342 or 30 nmol/L Casticin alone,P<0.05A:miR-342-3p模擬物聯合紫花牡荊素處理的HeLa細胞的葡萄糖消耗量;B:miR-342-3p模擬物聯合紫花牡荊素處理的HeLa細胞的乳酸產量A:The glucose consumption in HeLa cells treated with miR-342-3p mimic combined with Casticin; B: The lactate production in HeLa cells treated with miR-342-3p mimic combined with Casticin.圖8 miR-342-3p模擬物聯合紫花牡荊素對HeLa細胞糖酵解的影響Figure 8 The effect of miR-342-3p mimic combined with Casticin on glycolysis of HeLa cells

2.9 miR-342-3p抑制物對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響

miR-342-3p抑制物對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響結果如圖9所示:與未轉染的HeLa細胞和陰性對照組的細胞(Anti-NC)相比,miR-342-3p抑制物降低HeLa細胞miR-342-3p表達水平(P<0.05)。

1)與未轉染的HeLa細胞或轉染Anti-NC的HeLa細胞比較,P<0.05。1) Compared with HeLa or Anti-NC, P<0.05.圖9 miR-342-3p抑制物對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響Figure 9 The effect of miR-342-3p inhibitor on the expression of miR-342-3p in HeLa cells

2.10 miR-342-3p抑制物對HeLa細胞糖酵解的影響

miR-342-3p抑制物對HeLa細胞糖酵解的影響結果如圖10所示:miR-342-3p抑制物增加HeLa細胞的相對葡萄糖消耗量和乳酸產量(P<0.05)。

1)與HeLa細胞或Anti-NC比較,P<0.051)Compared with HeLa cells or miR-NC, P<0.05A:miR-342-3p抑制物對HeLa細胞的葡萄糖消耗量的影響;B:miR-342-3p抑制物對HeLa細胞乳酸產量的影響A: The effect of miR-342-3p inhibitor on glucose consumption in HeLa cells; B:The effect of miR-342-3p inhibitor on lactate production in HeLa cells.圖10 miR-342-3p抑制物對HeLa細胞糖酵解的影響Figure 10 The effect of miR-342-3p inhibitor on glycolysis of HeLa cells

2.11 miR-342-3p抑制物聯合紫花牡荊素對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響

紫花牡荊素和 miR-342-3p模擬物聯合使用對 HeLa細胞 miR-342-3p表達水平的作用,結果如圖11所示:miR-342-3p抑制物降低HeLa細胞的miR-342-3p表達水平;30 nmol/L紫花牡荊素處理上調HeLa細胞的miR-342-3p表達;miR-342-3p抑制物救援紫花牡荊素上調HeLa細胞miR-342-3p表達作用(P<0.05)。

1)與Anti-NC比較,P<0.05;2)與Anti-342比較,P<0.05;3) 與 30 nmol/L紫花牡荊素比較,P<0.051)Compared with miR-NC, P<0.05; 2)Compared with Anti-342, P<0.05; 3)Compared with 30 nmol/L Casticin, P<0.05圖11 miR-342-3p抑制物聯合紫花牡荊素對HeLa細胞miR-342-3p表達的影響Figure 11 The effect of miR-342-3p inhibitor combined with Casticin on the expression level of miR-342-3p in HeLa cells

2.12 miR-342-3p抑制物聯合紫花牡荊素對HeLa細胞糖酵解的影響

miR-342-3p抑制物聯合紫花牡荊素對 HeLa細胞糖酵解的影響,結果如圖12所示:miR-342-3p抑制物增加HeLa細胞的葡萄糖消耗量(A)和乳酸產量(B);30 nmol/L紫花牡荊素處理降低HeLa細胞葡萄糖消耗量(A)和抑制乳酸產量(B);miR-342-3p抑制物減弱紫花牡荊素降低HeLa細胞葡萄糖消耗量(A)和乳酸產量(B)作用。

1)與Anti-NC比較,P<0.05;2)與Anti-342比較,P<0.05;3)與 30 nmol/L紫花牡荊素比較,P<0.051)Compared with miR-NC, P<0.05; Compared with Anti-342, P<0.05; 3)Compared with 30 nmol/L Casticin, P<0.05A:miR-342-3p抑制物聯合紫花牡荊素處理的HeLa細胞的葡萄糖消耗量;B:miR-342-3p抑制物聯合紫花牡荊素處理的HeLa細胞的乳酸產量A: The glucose consumption in HeLa cells treated with miR-342-3p inhibitor combined with Casticin; B: The lactate production in HeLa cells treated with miR-342-3p inhibitor combined with Casticin.圖12 miR-342-3p抑制物聯合紫花牡荊素對HeLa細胞糖酵解的影響Figure 12 The effect of miR-342-3p inhibitor combined with Casticin on glycolysis of HeLa cells

3 討論

宮頸癌是女性腫瘤死亡的主要原因之一[1]。機體表達異常的miRNAs是引起腫瘤及其他疾病發生的一個關鍵因素[6-8],同時腫瘤的進展與腫瘤細胞自身的能量代謝特征相關[5]。因此研究和開發治療宮頸癌的新藥物對改善宮頸癌患者的臨床結局具有重要的意義。

miRNAs與腫瘤細胞的糖酵解有著密切聯系?，F有的研究表明,在結直腸癌中,低氧的環境下miR-103a-3p能促進結直腸癌細胞的糖酵解[13]。在肝細胞癌中,miR-30a-5p則降低肝細胞癌的乳酸生成和葡萄糖消耗[14],并且miR-210-3p、miR-105-5p和miR-767-5p促進三陰性乳腺癌細胞的乳酸生成和葡萄糖消耗[15]。Hou等[16]研究發現miR-30d通過直接靶向轉錄因子RUNX1抑制胰腺癌細胞的糖酵解;miR-34a抑制HeLa和SiHa細胞的葡萄糖消耗;miR-145降低宮頸癌細胞的糖酵解[17]。本團隊前期研究中同樣發現,miR-99a-5p抑制卵巢癌SKOV3細胞的糖酵解[18]。Wang等[19]研究發現使用 miR-99a-5p模擬物轉染宮頸癌SiHa細胞后顯著降低其糖酵解并誘導細胞凋亡,Zhang等[20]的研究也表明miR-34a顯著抑制HeLa和SiHa細胞的葡萄糖消耗。Romero-Cordoba等[21]的研究發現,miR-342-3p的低表達導致MCT1過度表達最終促進三陰性乳腺癌細胞的糖酵解。劉文鵬[22]的研究表明,miR-342-3p抑制肝細胞癌對葡萄糖的攝取和乳酸的產生。然而有關于miR-342-3p與宮頸癌糖酵解關系目前未見報道。在本研究中,用miR-342-3p模擬物或抑制物轉染宮頸癌HeLa細胞,發現miR-342-3p模擬物降低HeLa細胞的葡萄糖消耗量和乳酸產量,相反miR-342-3p抑制物則促進宮頸癌HeLa細胞對葡萄糖的攝取和乳酸的產生,這些結果證實miR-342-3p抑制宮頸癌細胞的糖酵解。

研究報道,紫花牡荊素可上調急性髓細胞白血病細胞miR-338-3p的表達[23]。本團隊前期研究表明紫花牡荊素上調肝細胞癌miR-148a-3p表達[24]。來自大豆中的天然黃酮類化合物金雀異黃素能通過miR-199a-5p抑制卵巢癌細胞的糖酵解[18]。另外本團隊前期研究還發現,蔓荊子總黃酮能上調肝細胞癌的 miR-342-3p,并抑制肝細胞癌的干性特征[25],在鼻咽癌中,紫花牡荊素通過靶向抑制磷脂酰肌醇 3-激酶抑制鼻咽癌細胞的生長[26],經紫花牡荊素處理后的大腸腺癌(DLD-1)、結直腸癌(HCT116)和結腸腺癌(Caco-2)細胞的增殖活性降低,同時抑制DLD-1細胞的集落形成能力[27]。另外,紫花牡荊素抑制人轉化因子-β1誘導的宮頸癌HeLa細胞上皮——間質轉化和侵襲能力[28]。然而,對于天然黃酮類類化合物的紫花牡荊素在宮頸癌microRNA調節和宮頸癌細胞糖酵解的作用尚未見報道。據此,本研究為探討紫花牡荊素對宮頸癌HeLa細胞miR-342-3p表達和糖酵解的影響,用RT-qPCR檢測不同濃度(0,10,30,100 nmol/L)的紫花牡荊素處理宮頸癌HeLa細胞后miR-342-3p表達水平,結果發現紫花牡荊素以濃度依賴的方式上調HeLa細胞miR-342-3p表達及以濃度依賴方式降低HeLa細胞葡萄糖消耗量和乳酸產量。研究顯示另一種天然的黃酮類化合物金雀異黃素通過上調miR-199a-5p表達抑制卵巢癌SKOV3細胞的糖酵解[18]。因此,為進一步探究天然黃酮類化合物紫花牡荊素是否以類似的方式對宮頸癌HeLa細胞糖酵解進行調控,本研究用或不用紫花牡荊素(30 nmol/L)處理miR-342-3p模擬物或抑制物轉染的HeLa細胞24 h,隨后用RT-qPCR分析細胞miR-342-3p表達和測定細胞葡萄糖消耗量及乳酸產量,結果發現miR-342-3p模擬物增強花牡荊素上調HeLa細胞miR-342-3p表達,同時增強紫花牡荊素抑制HeLa細胞葡萄糖消耗量及乳酸產量,相反,miR-342-3p抑制物減弱紫花牡荊素上調HeLa細胞miR-342-3p表達作用及減弱紫花牡荊素抑制HeLa細胞葡萄糖消耗量與乳酸產量作用。因此,本研究揭示紫花牡荊素通過上調miR-342-3p表達抑制宮頸癌HeLa細胞糖酵解的藥物作用機制。

天然黃酮類化合物已被證實具有抑制腫瘤干細胞活性[28]的作用,例如紫花牡荊素抑制人轉化因子-β1所誘導的宮頸癌 HeLa細胞上皮間質轉化和侵襲能力[29]。金雀異黃素抑制鼻咽癌腫瘤干細胞特性[30]及本團隊前期研究[24]表明紫花牡荊素通過破壞DNA甲基轉移酶1和miR-148a-3p之間的相互負調控聯系抑制肝細胞癌的干性。然而,有關于紫花牡荊素調控宮頸癌細胞miR-342-3p表達抑制糖酵解的具體機制尚有待進一步研究。

作者貢獻聲明

林佳芝:實驗操作,統計分析數據,撰寫論文;寧舒婷、鄧金金:實驗操作;馮偉峰:設計實驗,修改論文;寧映霞:提出研究思路和框架,修改論文。

利益沖突聲明

本研究未受到企業、公司等第三方資助,所有作者之間不存在潛在利益沖突。