UV法測定紫草中羥基萘醌總色素含量的不確定度評定及應用

關卓明 何敬銘 林泳儀 李礪

【摘要】對采用紫外-可見分光光度（UV）法測定紫草中羥基萘醌總色素含量全過程進行分析，建立數學模型，確定影響總色素測定不確定度的因素并對其進行評估。結果表明，總色素含量測定的擴展不確定度為0.06%，測定結果表示為（1.69±0.06）%（k=2），能力驗證結果為滿意。

【關鍵詞】紫草；羥基萘醌；分光光度法；能力驗證；不確定度

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.01.009

Determination of Total Hydroxynaphthoquinone Pigment Content in Purple Grass by Spectrophotometry Evaluation of Uncertainty and Application in Capability Verification

GUAN Zhuoming， HE Jingming， LIN Yongyi， LI Li*（Sinopharm group fengliaoxing〔Foshan〕herbal medicine decoction pieces Co.， Ltd.， Foshan 528000， China）

Abstract： To verify the ability of UV spectrophotometry to determine the total content of hydroxynaphthoquinone pigments in purple grass， establish a mathematical model， determine the factors that affect uncertainty， and evaluate each factor. Results showed that the expanded uncertainty of the total pigment content determination was 0.06%， and the determination result was expressed as （1.69±0.06）% （k=2）， indicating a satisfactory capability validation result.

Keywords： hydroxyanaphthoquinone； spectrophotometry； capability verification； uncertainty

紫草的使用歷史非常悠久?！渡褶r本草經》中記載，紫草性寒，具有活血和清熱解毒的功效?，F代研究表明，紫草含有多種活性成分，包含羥基萘醌類、三萜類、生物堿類等有效物質。其中，羥基萘醌類是紫草中最重要、最具代表性的活性有效成分，具有抗炎、抗菌、抗腫瘤等藥理活性。

《中華人民共和國藥典（2020年版）》收錄了以UV法測定羥基萘醌總色素的含量，以左旋紫草素的吸光系數進行計算。使用UV法測定羥基萘醌總色素的含量會受到多種因素的影響，如儀器精度、實驗員的主觀因素、操作實驗條件和玻璃量具的校準等。測量得到的總含量與其真實值之間存在偏差，要對測量的羥基萘醌總色素含量的可靠性進行客觀評價，這就需要引進測量不確定度的概念。

實驗室檢測方法的能力驗證是實驗室質量控制內容之一。能力驗證能夠綜合考察實驗室的檢測能力，是實驗室管理非常重要的手段[1]。本研究測量了參加能力比對驗證的紫草試樣中羥基萘醌總色素的含量，同時對測量的不確定度進行評定，找到影響不確定度的因素，對不確定度貢獻率進行分析。建立了羥基萘醌總色素測定能力驗證的測量不確定度評定方法，為紫草中羥基萘醌總色素含量的測定方法改善提供參考。

1.1儀器與試劑

UV計（北京普析TU-1901）；電子天平（上海舜宇恒平FA2104），25 mL和100 mL量瓶、5 mL移液管；紫草（能力驗證樣品）；乙醇（分析純）。

1.2測量方法

《中華人民共和國藥典（2020年版）：一部》中的紫草質量標準規定進行檢測。為減少測量誤差，使檢測結果準確性更加可靠，本研究同步進行了含量測定不確定度的分析。

2.1不確定度數學模型

2.2不確定度來源分析

采用UV法測定羥基萘醌總色素含量的不確定度來源主要有：方法本身引入不確定度，天平稱量不確定度，體積測量不確定度，UV計引入不確定度。體積測量不確定度主要有兩個來源：一是，測量器具最大允許誤差引起不確定度；二是，實驗室溫度變化引起體積變化不確定度[2]。

經分析確定，影響本試驗紫草含量測定結果的不確定度因素主要有樣品稱量、樣品稀釋和儀器測量等。

2.3分量不確定度的測量

2.3.1方法精密度相對標準不確定度

測量重復性的相對標準不確定度urel（ P ）。測定10份供試品中羥基萘醌總色素的含量，具體結果見表1。采用A類評定。

2.4計算合成相對標準不確定度urel（ X ）

測量不確定度各分量結果見表2。

通過紫草中羥基萘醌總色素含量能力驗證不確定度評定可知，采用UV法測定總色素含量時，主要不確定因素為UV計的吸光度測定和溶液稀釋定容。由此可知，對UV計進行定期校準維護和提高操作員對儀器熟練程度是降低吸光度引起的不確定度的兩個主要方法。體積越小的玻璃量器引起不確定度越大，因而盡可能使用A級大容量容量瓶和移液管。通過對紫草中羥基萘醌總色素含量測定的不確定度評定，詳細分析計算各項不確定度來源，為提高測量結果的準確性提供了依據。實驗室能力驗證結果得到了滿意的答復。

【參考文獻】

[1]李向威.檢驗檢測機構能力驗證實施探討[J].中國檢驗檢測，2023，31（1）：95-96.

[2]趙富華，楊星，韓寧寧，等.紫外-可見分光光度法測定甲磺酸達氟沙星粉含量的不確定度評定[J].中獸醫醫藥雜志，2022，41（5）：53-56.

【作者簡介】

關卓明，男，1987年出生，中級中藥師，學士，研究方向為藥品、食品安全檢測。

通訊作者：李礪，女，1977年出生，副主任藥師，研究方向為中藥及食品檢驗。電子郵箱：toby319@126.com。

（編輯：侯睿琪）