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一株中華稻蝗內生真菌Fusarium lateritium ZMT01的代謝產物*

2024-02-24 09:02房豪東黃子輝李蘇檸黎楊倩佘志剛熊亞紅李春遠
關鍵詞:孢菌羰基波譜

房豪東, 黃子輝, 李蘇檸, 黎楊倩, 佘志剛, 熊亞紅, 李春遠

1.華南農業大學材料與能源學院 / 生物基材料與能源教育部重點實驗室,廣東 廣州 510642

2.中山大學化學學院,廣東 廣州 510275

據估計,昆蟲種類達3 000 多萬種,昆蟲共生菌種類更為豐富。昆蟲共生菌生長環境復雜多樣,已從其代謝產物中發現大量結構新穎的化合物,其中約50%具有顯著的抗腫瘤、抗菌、除草和抗氧化等生物活性(徐曉等,2018)。鐮刀屬Fusariumsp.真菌在自然界分布廣泛,其次生代謝產物種類豐富且生物活性多樣(Li et al.,2020)。據統計,截至2022 年底,已在鐮刀屬真菌代謝產物中發現大約180 多種抗菌活性物質(Xu et al.,2023)。鐮刀屬真菌是昆蟲共生菌(含內生菌)的常見類型(鄭林宇等,2022),但有關昆蟲共生(含內生)鐮刀菌代謝產物的研究很少,有研究曾從一株中華螽斯腸道內生鐮刀屬真菌Fusarium proliferatumZS07代謝產物中得到了1個具有抗枯草芽孢桿菌活性的新聚酮類化合物O-methylated SMA93 和5 個已知物(Li et al.,2014);從一株中華稻蝗內生真菌磚紅鐮刀菌Fusarium lateritiumZMT01 發酵物內得到3 個具有抗菌活性的新倍半萜和2 個已知類似物(Zhu et al.,2022)等。鑒于Fusarium lateritiumZMT01 提取物在200 μg/mL 質量濃度下對O6 血清型大腸桿菌Escherichia coliO6 及尖孢鐮孢菌Fusarium oxyspo‐rum具有抗菌活性,本文繼續研究其代謝產物,從中分離鑒定了10個化合物(圖1),并測試了抗菌活性,期望發掘具有相應價值的先導化合物。

圖1 化合物1~10的結構Fig.1 The structure of compounds 1-10

1 實驗部分

1.1 儀器、試劑及材料

Bruker/AⅤⅤANCE NEO 600 超導核磁共振譜儀、APⅠ3200 LC-MS、Horiba SEPA-300 旋光儀、G254 薄層硅膠和色譜純甲醇、乙腈,其余試劑為分析純。

Fusarium lateritiumZMT01 從中華稻蝗OxyachinensisThunberg 體內分離得到,通過PCR 技術擴增該真菌核糖體ⅠTS 基因區段(GenBank 號MT875260.1)與NCBⅠ數據庫MK646016.1 菌株對比(相似度99%)鑒定。

O6 血清型大腸桿菌、O78 血清型大腸桿菌、金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus、禾谷鐮孢菌Fusarium graminearum和尖孢鐮孢菌Fusarium oxysporum,引自華南農業大學材料與能源學院天然資源再生與利用研究室。

1.2 菌株發酵與提取分離

采用與陳曉晴等(2020)相同的大米培養基將菌株Fusarium lateritiumZMT01 進行發酵培養,用無水乙醇萃取發酵物,再用乙酸乙酯萃取3次,取上清液減壓濃縮得到粗提物(25.3 g)。使用微生物代謝產物常規的分離手段(陳敏等,2016),依次分離純化出化合物1(139.2 mg)、2(72.6 mg)、3(41.8 mg)、4(6.5 mg)、5(6.2 mg)、6(33.3 mg)、7(1.1 mg)、8(1.7 mg)、9(0.9 mg)和10(35.1 mg)。詳細分離流程見圖2。

圖2 菌株Fusarium lateritium ZMT01次級代謝產物1~10分離流程圖Fig.2 The separation process of the secondary metabolites 1-10 from Fusarium lateritium ZMT01

1.3 體外抗菌活性測試

采用二倍稀釋法(Bhat et al.,2011)體外測試化合物1~6,10 對血清型大腸桿菌(O6,O78)、金黃色葡萄球菌、禾谷鐮孢菌和尖孢鐮孢菌的抗菌活性,用最小抑菌質量濃度MⅠC 表示活性強弱,致病細菌以頭孢拉定為陽性對照,植物病原真菌以三唑酮為陽性對照。

1.4 化合物波譜數據

化合物1:C13H16O5,無色晶體,ESⅠ-MS:m/z253.1[M+H]+,= +209(c0.61, MeOH), CD(MeOH)λmax(Δε), 207 (+ 2.93), 246 (+0.22), 291(+1.14),1H NMR (600 MHz, MeOD)δ4.86 (d,J=8.9 Hz, 1H, H-3), 4.51 (m, 1H, H-9), 4.25 (d,J=6.5 Hz, 1H, H-10), 3.64 (brt,J=8.0 Hz, 1H, H-6′),3.52 (d,J=3.9 Hz, 3H, H-12), 3.22 (m, 1H, H-3′),2.31(m, 1H, H-5), 2.19(m, 1H, H-5), 2.09(m,1H, H-6), 2.03 (m, 1H, H-6), 1.39 (d,J=6.5 Hz,3H, H-11),13C NMR (150 MHz, CDCl3)δ214.4 (C-4,C), 162.3 (C-7, C), 154.4 (C-2, C), 131.5 (C-1, C),87.9 (C-3, CH), 80.5 (C-9, CH), 68.8 (C-10, CH),60.2 (C-12, CH3), 50.9 (C-3′, CH), 43.9 (C-6′,CH), 37.7 (C-5, CH2), 23.6 (C-6, CH2), 17.5 (C-11,CH3)。

化合物2:C13H16O5,黃色油狀物,ESⅠ-MS:m/z253.1[M+H]+,= +281 (c0.15, MeOH), CD(MeOH)λmax(Δε), 234 (+ 10.77), 264 (- 0.84), 296(+ 3.38),1H NMR (600 MHz, CDCl3)δ4.80 (t,J=9.0 Hz, 1H, H-6), 4.49 (dq,J=6.6, 13.1 Hz, 1H, H-3),4.27 (t,J=6.0 Hz, 1H, H-4), 3.60 (q,J=8.8 Hz, 1H,H-11), 3.47 (s, 3H, H-14), 3.10 (q,J=8.1 Hz, 1H,H-7), 2.18 (m, 1H, H-9), 2.14 (m, 1H, H-9), 2.12(m, 1H, H-10), 2.01 (m, 1H, H-10), 1.36 (dd,J=6.5,10.9 Hz, 3H, H-13),13C NMR (150 MHz, CDCl3)δ215.3 (C-8, C), 162.6 (C-1, C), 156.8 (C-5, C),131.3 (C-12, C), 84.8 (C-6, CH), 81.1 (C-3, CH),65.4 (C-4, CH), 60.2 (C-14, CH3), 51.6 (C-7, CH),45.0 (C-11, CH), 38.4 (C-9, CH2), 24.3 (C-10,CH2), 18.5 (C-13, CH3)。

化合物3:C13H16O5,黃色油狀物,ESⅠ-MS:m/z253.1[M+H]+,= +272(c0.1, MeOH),1H NMR (600 MHz, CDCl3)δ4.93 (d,J=4.8 Hz,1H, H-4), 4.84 (d,J=8.4 Hz, 1H, H-6), 4.10 (m,1H, H-3), 3.60 (m, 1H, H-11), 3.49 (m, 1H, H-7),3.47 (s, 3H, H-14), 2.26 (m, 1H, H-10), 2.24(m, 1H ,H-10), 2.15 ( m, 1H, H-9), 1.95 ( m, 1H, H-9),1.26(m, 3H, H-13),13C NMR (150 MHz, CDCl3)δ214.4 (C-8, C), 171.8 (C-5, C), 168.3 (C-1,C), 140.3 (C-12, C), 83.2 (C-4, CH), 82.5 (C-6,CH), 67.0 (C-3, CH), 59.9 (C-14, CH3), 58.1 (C-7,CH), 40.0 (C-11, CH), 38.2 (C-9, CH2), 23.1 (C-10,CH2), 18.6 (C-13, CH3)。

化合物4:C15H16O6,紅色針狀晶體,ESⅠ-MS:m/z293.1 [M+H]+,= +250 (c0.1, MeOH),1H NMR (600 MHz, CDCl3)δ13.31 (s, 1H, OH-5),13.02 (s, 1H, OH-8), 6.17 (s, 1H, H-3), 4.16 (p,J=6.3 Hz, 1H, H-10), 3.92 (s, 3H, H-13), 2.94 (d,J=6.4 Hz, 2H, H-9), 2.35 (s, 3H, H-12), 1.33 (d,J=6.2 Hz, 3H, H-11),13C NMR (150 MHz, CDCl3)δ184.2 (C-4, C), 177.7 (C-1, C), 162.6 (C-8, C),160.9 (C-5, C), 160.6 (C-2, C), 142.5 (C-6, C), 138.6(C-7, C), 109.7 (C-8′, C), 109.6 (C-3, CH), 108.0(C-4′, C), 67.9 (C-10, CH), 56.9 (C-13, CH3), 36.3(C-9, CH2), 24.1 (C-11, CH3), 13.2 (C-12, CH3)。

化合物5:C15H14O6,紅色針狀晶體,ESⅠ-MS:m/z291.0 [M+H]+,1H NMR (600 MHz, CDCl3)δ13.24 (s, 1H, OH-9), 12.85 (s, 1H, OH-8), 6.20(s, 1H, H-7), 3.93 (s, 3H, H-15), 3.90 (s, 2H, H-11),2.29 (s, 3H, H-14), 2.23 (s, 3H, H-13),13C NMR(150 MHz, CDCl3)δ203.9 (C-12, C), 184.5 (C-4,C), 177.9(C-1, C), 161.5 (C-6, C), 160.7 (C-8,C), 160.5(C-9, C), 142.6 (C-2, C), 134.3 (C-3,C), 109.8 (C-10, C), 109.7 (C-7, CH), 108.5 (C-5,C), 56.9 (C-15, CH3), 41.3 (C-11, CH2), 30.1 (C-13,CH3), 13.0 (C-14, CH3)。

化合物6:C15H16O6,棕色固體,ESⅠ-MS:m/z293.1 [M+H]+,= -39.9 (c0.12, acetone),1H NMR(600 MHz, CDCl3)δ11.63 (s, 1H, OH-6), 6.34(s, 1H, H-7), 5.38 (s, 1H, H-10), 4.17 (dd,J=5.6, 9.3 Hz, 1H, H-4), 3.88(s, 3H, H-12), 3.76(d,J=9.3 Hz, 1H, H-4), 2.98 (d,J=5.5 Hz, 1H,H-3), 2.85 (dd,J=5.8, 7.9 Hz, 1H, H-2), 2.75(dd,J=7.9, 18.0 Hz, 1H, H-1), 2.48(dd,J=5.8,18.0 Hz, 1H, H-1), 2.18 (s, 3H, H-13),13C NMR (150 MHz, CDCl3)δ206.1 (C-11, C), 203.6(C-5, C),158.9(C-6, C), 154.5 (C-8, C), 134.6(C-9, C),127.6 (C-9′, C), 107.3 (C-5′, C), 99.0 (C-7, CH),74.7 (C-10, CH), 66.5 (C-4, CH2), 56.4 (C-12,CH3), 54.1 (C-3, CH), 44.1 (C-2, CH), 44.0 (C-1,CH2), 30.4 (C-13, CH3)。

化合物7:C23H32O2,白黃色粉末,ESⅠ-MS:m/z341.2 [M+H]+,1H NMR (600 MHz, acetone-d6)δ7.09 (s, 4H, H-5, H-5′, H-3, H-3′), 5.89 (s, 2H,H-1, H-1′), 3.94 (s, 2H, H-12), 2.32 (s, 6H, H-4,H-4′), 1.47 (s, 18H, H-9, H-9′, H-10, H-10′, H-11,H-11′),13C NMR (150 MHz, acetone-d6)δ150.1 (C-1,C-1′, C), 141.4 (C-6, C-6′, C), 138.3 (C-4, C-4′,C), 130.4 (C-5, C-5′, CH), 129.1 (C-3, C-3′, CH),126.4 (C-2, C-2′, C), 34.0 (C-12, CH2), 32.1 (C-7,C-7′, CH3), 30.2 (C-8, C-8′, C), 21.1 (C-9, C-9′, C-10,C-10′,C-11,C-11′, CH3)。

化合物8:C15H18O3,無色晶體,ESⅠ-MS:m/z247.1[M+H]+,1H NMR (600 MHz, CDCl3)δ7.31(m, 1H, H-8), 7.24 (m, 1H, H-7), 7.12 (s, 1H, H-1),6.84 (m, 1H, H-6), 6.60 (d,J=6.0 Hz, 1H, H-3),4.61 (s, 2H, H-9), 4.43 (sept,J=6.0 Hz, 1H, H-11),3.79 (s, 3H, H-10), 1.37 (d,J=6.0 Hz, 6H, H-12, H-13),13C NMR(150 MHz, CDCl3)δ157.0 (C-4, C), 153.9(C-5, C), 139.1 (C-2, C), 137.1 (C-7, CH), 125.9(C-1′, C), 121.6 (C-8, CH), 118.7 (C-1, CH), 118.0(C-4′, C), 113.1 (C-3, CH), 105.0 (C-6, CH), 72.9(C-11, CH), 64.6(C-9, CH2), 55.9(C-10, CH3),21.7 (C-12, CH3), 21.6 (C-13, CH3)。

化合物9:C29H50O,白色粉末,ESⅠ-MS:m/z415.3 [M+H]+,= -27 (c0.1, CHCl3),1H NMR(600 MHz, CDCl3)δ5.35 (t,J=6.4 Hz, 1H, H-6),3.50 (tdd,J=3.8, 4.2, 4.5 Hz, 1H, H-3), 2.27~1.08(m, 29H, H-1~2, H-4, H-7, H-8~9, H-11~12, H-14,H-15~16, H-17~18, H-20~21, H-22, H-23, H-25),1.02 (s, 3H, H-29), 0.94 (d,J=6.5 Hz, 3H, H-19),0.85 (t,J=7.2 Hz, 3H, H-24), 0.82 (d,J=6.4 Hz,3H, H-26), 0.80 (d,J=6.4 Hz, 3H, H-27), 0.66 (s,3H, H-28),13C NMR (150 MHz, CDCl3)δ141.1 (C-5,C), 122.0 (C-6, CH), 72.1 (C-3, CH), 57.0 (C-14,CH), 56.1 (C-17, CH), 50.4 (C-9, CH), 46.1 (C-22,CH), 43.0 (C-4, CH2), 42.5 (C-13, C), 40.0 (C-12,CH2), 37.6 (C-1, CH2), 36.7 (C-18, CH), 36.5 (C-10,C), 34.0 (C-20, CH2), 32.3 (C-7, CH2), 32.1 (C-8,CH), 32.0 (C-2, CH2), 29.3 (C-25, CH), 28.4 (C-16,CH2), 26.3 (C-21, CH2), 26.3 (C-15, CH2), 23.2 (C-23,CH2), 21.2 (C-11, CH2), 20.0 (C-26, CH3), 19.5 (C-27,CH3), 19.3 (C-19, CH3), 18.9 (C-28, CH3), 12.1 (C-24,CH3), 12.0 (C-29, CH3)。

化合物10:C6H8O3,淡黃色油狀物,ESⅠ-MS:m/z129.0 [M+H]+,= -31.5 (c0.45, CHCl3),1H NMR (600 MHz, MeOD)δ5.81 (d,J=1.6 Hz,1H, H-2), 4.41 (dd,J=3.9, 11.9 Hz, 1H, H-5), 4.28(dd,J=4.5, 11.9 Hz, 1H, H-5), 4.16 (t,J=4.2 Hz,1H, H-4), 2.07 (s, 3H, H-6),13C NMR (150 MHz,MeOD)δ166.1 (C-1, C), 161.1 (C-3, C), 117.3 (C-2,CH), 72.6 (C-5, CH2), 64.8 (C-4, CH), 19.9 (C-6,CH3)。

2 結果與討論

化合物1:ESⅠ-MS 顯示準分子離子峰為m/z253.1[M+H]+,結合1H和13C NMR推測其分子式為C13H16O5,不飽和度為6。1H NMR 譜圖中,δH1.39為甲基質子信號,δH2.31~2.03為亞甲基質子信號,δH3.52 為甲氧基信號。13C NMR 譜圖中,存在2 個羰基碳(δC214.4, 162.3),2 個烯碳(δC154.4,131.5),1 個甲氧基碳δC60.2,其中雙鍵,2 個羰基占3個不飽和度,故推測化合物具有三環體系。結合分子式,可知還含有1 個-OH。據此與Chen et al.(2018)波譜、比旋光度及CD 數據對比基本一致,鑒定為fusopoltide A。

化合物2:比較化合物2 和1 的13C NMR 數據,僅δC84.8處與化合物1的δC87.9相比差異明顯,推測連接甲氧基處的手性碳相對于1有不同構型。與Ariefta et al.(2019)的波譜、比旋光度及CD 數據對比基本一致,鑒定為fusopoltide B。

化合物3:波譜數據與1、2 類似,表明具有與1、2 相似的三環結構,但3 的13C NMR 譜δC171.8(C-5)的信號與1 的δC156.8(C-5)有顯著不同,推測原六元內酯環轉變成為五元內酯環,據此與Ari‐efta et al.(2019)的波譜及比旋光度數據對比基本一致,鑒定為fusopoltide D。

化合物4:ESⅠ-MS 顯示準分子離子峰為m/z293.1[M+H]+,相對分子質量為292,結合化合物的1H 和13C NMR 數據推測分子式為C15H16O6,不飽和度為8。1H NMR 譜在高場區有2 個甲基信號(δH2.35, 1.33),1 個亞甲基信號δH2.94,1 個甲氧基信號δH3.92;在低場區有2 個酚羥基信號(δH13.31, 13.02),1 個共軛烯氫信號δH6.17。13C NMR 譜顯示2 個羰基碳(δC184.2, 177.7),8 個sp2雜化的碳,用去了6 個不飽和度,因此化合物4還具有雙環體系,結合13C NMR 譜中2 個典型的與雙鍵共軛的羰基碳化學位移值δC184.2和177.7,推測該化合物具有萘醌骨架。據此與Kimura et al.(1988)的波譜及比旋光度數據對比基本一致,鑒定為solaniol。

化合物5:化合物5 和4 的1H 和13C NMR 譜十分類似,表明具有相同萘醌骨架,13C NMR 譜中,前者比后者多出1 個δC203.9 的脂肪酮羰基碳,少了1個連氧的δC67.9的次甲基碳信號,推測前者是后者支鏈上的羥基氧化成羰基的衍生物,進一步與Chowdhury et al.(2017)的波譜數據對比一致,鑒定為javanicin。

化合物6:通過ESⅠ-MS,13C NMR 譜和元素分析確定分子式為C15H16O6,不飽和度為8。1H NMR 譜δH6.34 表明存在1 個五取代苯環,δH11.63 (s, 1H) 是和羰基形成分子內氫鍵的羥基信號。13C NMR 譜顯示2 個羰基碳(δC206.1,203.6),6 個sp2雜化的碳,剩余2 個不飽和度,表明除苯環外,分子中還存在另外2 個環;δC74.7,66.5 的2 個處于較低場的連氧脂肪碳,結合其余的碳信號,推測其中一個環是環己酮,另一個是與之橋接的五元氧雜環。由此判斷化合物6屬于苯并環己酮類型且環己酮橋接了1 個五元氧雜環。1H NMR 譜δH3.88 (s, 3H) 和2.18 (s, 3H) 表明存在1 個甲基和1 個甲氧基,2.75 (dd,J=7.9,18.0 Hz, 1H),2.48 (dd,J=5.8, 18.0 Hz, 1H) 是與手性碳相連的亞甲基,δH5.38 (s,1H) 推測是同時和氧及雙鍵相連的次甲基信號,3.76 (d,J=9.3 Hz,1H),4.17 (dd,J=5.6, 9.3 Hz, 1H) 是連氧的亞甲基信號,2.98 (d,J=5.5 Hz, 1H),2.85 (dd,J=5.8,7.9 Hz, 1H) 是2 個次甲基信號。據此與Korn‐sakulkarn et al.(2011)的波譜和比旋光度數據對比基本一致,鑒定為(1S, 4S, 10S)-3,4-dihydro-6,9-dihydroxy-8-methoxy-10-(2-oxopropyl)-1,4-methano-2-benzoxepin-5 (1H)-one。

化合物7: ESⅠ-MS 譜m/z341.2 [M+H]+,1H NMR 譜δH7.09 (s, 4H) 表明存在2 個對稱的1,2,4,6-四取代苯環,δH1.47 (s, 18H) 表明含有2 個叔丁基,δH2.32(s, 6H) 表明存在2 個甲基,δH5.89 (s, 2H) 滴加重水交換后信號消失,表明是2個羥基,因此δH3.94 (s, 2H) 是連接2 個苯環的亞甲基。以上分析與13C NMR 譜信號顯示的結構信息吻合。據此與Ai Zoubi et al.(2017)的波譜數據對比基本一致,鑒定為2,2′‐methylenebis (4‐methyl‐6‐tert‐butylphenol)。

化合物8:分子式C15H18O3通過ESⅠ-MS,1H和13C NMR 譜確定,不飽和度為7。13C NMR 譜中δC105.0~157.0是10個sp2雜化的碳,推測化合物具有萘環。1H NMR 譜δH4.61 (s, 2H) 表明存在羥甲基,δH3.79 (s, 3H) 是甲氧基信號,δH4.43 (sept,J=6.0 Hz, 1H),1.37 (d,J=6.0 Hz, 6H) 推測是與氧相連的異丙基。進一步與Bringmann et al.(1998)的數據對比基本一致,鑒定為2-hydroxymethyl-5-iso‐propoxy-4-methoxynaphthalen。

化合物9:1H NMR 譜δHδH2.27~1.08(29 H)的連續多重峰信號及積分情況表明具有多個亞甲基和次甲基且相互重疊,同時δH0.66~1.02 高場區顯示了6 組甲基信號,它們與13C NMR 譜中δC12.0~57.0 中大量的甲基、亞甲基次甲基碳信號相吻合,符合甾醇類物質的核磁波譜特征(Gao et al.,2022)。此外,13C NMR 譜中還觀察到1 組雙鍵碳δc 141.1(s, C-5), 122.0 (s, C-6)和環上連羥基的碳δc 72.1(s, C-3)信號。據此與Chaturvedula et al.(2012)的數據對比基本一致,鑒定為β-sitosterol。

化合物10:ESⅠ-MS 顯示準分子離子峰為m/z129.0 [M+H]+,結合1H 和13C NMR 譜推測分子式為C6H8O3,不飽和度為3。13C NMR 譜中δC166.1,161.1,117.3 表明存在1 個酯羰基碳和1 個雙鍵,且互相共軛,剩余不飽和度表明還具有1個環狀結構單元,推測為六元內酯環。1H NMR 譜圖中,δH4.41,4.28,4.19 是連氧的質子信號,δH2.07 (s,3H) 是甲基信號,結合分子式,表明還有1 個羥基,據此與Kim et al.(2011)的波譜及比旋光度數據對比基本一致,鑒定為walterolactone A。

從內生真菌Fusarium lateritiumZMT01 分離到上述10 個次生代謝產物,化合物1~6 屬于聚酮類,化合物7、8 屬于酚類,化合物9 屬于甾醇,化合物10屬于內酯類?;衔?~3的可能的生源合成途徑及關系已有報道:6 個乙酰輔酶A 經聚合得到六酮(Hexaketide),再經環化、重排、氧化、甲基化得到共同前體,接著通過兩種不同的環氧化得到(3S,4S)和(3R,4R)兩種中間體,前者經1,3 環化和1,4 環化分別得到化合物2 和3,后者經1,3 環化得到化合物1(Ariefta et al.,2019)。根據化合物10的結構特點結合化合物1~3的生源合成途徑,推測其可能的生源合成途徑為2個乙酰輔酶A 先聚合為乙酰乙酰輔酶A,再和1 個乙酰輔酶A 聚合為甲戊二羥酸,接著經過氧化、環化、脫水形成產物?;衔?、10 為首次從Fusarium屬中分離得到,豐富了鐮刀菌屬的代謝產物庫。除化合物9外,其他化合物均為首次從Fusarium lateritium中得到,豐富了磚紅鐮刀菌的次生代謝產物庫。

化合物2 曾被報道對環氧合酶-2(COX-2)具有顯著的抑制作用(Chen et al.,2018),化合物4 能顯著下調HMG-CoA 合成酶基因表達,同時還具有抗結核分枝桿菌H37Rv 株的活性,MⅠC 為32 μg/mL(Niu et al.,2019;Shah et al.,2017),化合物6 具有抗結核分枝桿菌的活性,MⅠC 為25 μg/mL(Korn‐sakulkarn et al.,2011),化合物7是一種抗氧化劑,在1 mmol/L 下清除DPPH 活性與沒食子酸相當(Ai Zoubi et al.,2017)。本文進一步測試了所分離化合物對大腸桿菌(O6、O78 血清型)等病原菌的抑菌活性,化合物4、5 對人致病性O6 血清型大腸桿菌的MⅠC均為6.25 μg/mL,與陽性對照頭孢拉定活性接近(MⅠC 3.13 μg/mL),化合物4 對引起番茄枯萎病的尖孢鐮孢菌的MⅠC 為200 μg/mL,顯示中等抗菌活性(陽性對照三唑酮MⅠC 100 μg/mL),其余化合物對所測病原菌的MⅠC 均高于200 μg/mL。本文篩選出化合物4、5 對O6 血清型大腸桿菌有強抑菌作用,為抗O6 血清型大腸桿菌藥物的研究提供了先導化合物?;衔? 具有中等抗尖孢鐮孢菌活性,可進一步開展活性優化或溫室作物防病研究,為防治番茄枯萎病農藥的研制提供相應的理論基礎。

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