發酵牡丹籽粕對黃山黑雞生產性能、蛋品質、蛋黃中脂肪酸含量及血清生化指標的影響

劉 偉 陳相名 馬瑞鈺 朱涌峰 戚仁榮 李俊營 萬 意 李 巖 舒 翔 詹 凱*

(1.安徽省農業科學院畜牧獸醫研究所,畜禽產品安全工程安徽省重點實驗室,合肥 230031;2.安徽農業大學生命科學學院,合肥 230036;3.安徽黟品黃山黑雞保種有限公司,黟縣 245500)

隨著現代畜牧業規?；?、集約化發展,常規飼料資源短缺問題凸顯,因此開發利用非常規飼料資源成為了當前研究的重點,也是解決這一問題的有效途徑[1-3]。牡丹籽是牡丹的種子,富含多種營養成分,尤其富含不飽和脂肪酸[4]。牡丹籽粕是牡丹籽榨油后的副產物,含有較為豐富的多糖、蛋白質、多酚、黃酮類等多種活性成分[5],可提高機體免疫力和抗氧化能力。施君君[6]研究表明,牡丹籽粕中含有的牡丹籽粕多糖具有潛在的抗氧化和抗腫瘤活性。但是有研究發現牡丹籽粕中含有芍藥苷、皂甙等抗營養因子,直接飼喂可造成畜禽肝臟等器官損傷,影響生產性能,而經過微生物固態發酵等技術處理后可降解其中大部分抗營養因子,提高其飼用價值[7-8]。微生物發酵飼料具有降低原料中抗營養因子含量、產生有機酸和可溶性小肽等有益代謝產物、改善飼糧適口性和動物對飼糧營養物質的消化吸收等特性和作用[9],可有效改善畜禽生長性能和腸道微生態[10-12],提高家禽生產性能和蛋品質等[13-14],在畜禽生產中有著廣闊應用。目前對發酵牡丹籽粕(fermented peony seed meal,FPSM)的相關研究僅有少量在高產蛋雞中的報道[15-17],可提高蛋雞生產性能以及蛋黃中多不飽和脂肪酸(PUFA)含量。韋春杰[15]研究了發酵牡丹籽粕在京紅1號高產蛋雞產蛋后期飼糧中的應用,發現其可顯著提高蛋黃中PUFA含量,尤其是二十二碳六烯酸(DHA)等ω-3 PUFA含量。陸靜[16]研究表明,在新楊黑雞飼糧中添加7%發酵牡丹籽粕,雞群的產蛋率、料蛋比、軟破蛋率等顯著降低,蛋黃、胸肌中PUFA含量尤其是亞油酸和α-亞麻酸(ALA)含量顯著提高。已有研究結果表明,蛋雞飼糧中添加發酵牡丹籽粕可以促進PUFA在蛋黃中的沉積,但其在地方雞種飼糧中的轉化效率、適宜添加比例仍需進一步驗證。

本試驗旨在研究產蛋期黃山黑雞飼糧中添加不同比例的發酵牡丹籽粕對其生產性能、蛋品質、蛋黃中脂肪酸含量及血清生化指標的影響,以期找出適合地方雞優質雞蛋生產需求的發酵牡丹籽粕添加比例,探討發酵牡丹籽粕對改善地方雞蛋品質和機體健康發揮的作用,為其在優質家禽產品生產中的科學應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本試驗所用發酵牡丹籽粕由安徽省某飼料有限公司提供,其常規營養成分含量見表1。

1.2 試驗設計

隨機選取體重、產蛋率相近的240日齡健康黃山黑雞864只,隨機分為3組,每組4個重復,每個重復72只。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎飼糧,試驗組分別飼喂在基礎飼糧中添加5%(5%FPSM組)和9%發酵牡丹籽粕(9%FPSM組)的試驗飼糧。根據產蛋期黃山黑雞營養需要配制飼糧,各組飼糧的主要營養水平一致,試驗飼糧組成及營養水平見表2。預試期1周,正試期8周。

表2 試驗飼糧組成及營養水平(風干基礎)

1.3 飼養管理

飼養試驗在黟縣安徽黟品黃山黑雞保種有限公司種雞場進行。試驗雞群飼養于有窗式雞舍的3層階梯式產蛋籠的同一側,每相鄰的2組籠具單元為1個重復,每組籠具每層6籠,每籠2只雞,共72只;相鄰的重復飼喂不同類型的飼料。自由采食、飲水,每日人工飼喂2次(08:00和14:00),按每只100 g/d喂料量飼喂。采用自然光照加人工光照,光照時間為16 h,自然通風,其他日常管理按照黃山黑雞飼養管理要求執行。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 營養物質含量

發酵牡丹籽粕和飼糧中干物質、粗蛋白質、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、鈣、磷和氨基酸含量分別按照GB/T 6435—2014、GB/T 6432—2018、GB/T 6433—2006、GB/T 6434—2022、GB/T 6438—2007、GB/T 6436—2018、GB/T 6437—2018和GB/T 18246—2019[18-25]的方法進行測定。

1.4.2 生產性能

試驗期間,以重復為單位,每天早晨喂料前清理并稱量前1天的剩余料量,計算采食量,每天16:00記錄各重復產蛋數、總蛋重,計算平均日采食量、料蛋比、產蛋率。

1.4.3 蛋品質

試驗第8周末,每組隨機選取40個雞蛋(每個重復10個),測定蛋品質,測定指標包括蛋形指數、蛋殼顏色、蛋殼強度、蛋重、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋黃比率和蛋殼厚度等。雞蛋的長、短徑用數顯游標卡尺分別測定,用于計算蛋形指數;采用蛋殼顏色測定儀(英國TSS公司)測定蛋殼顏色;采用蛋殼強度測定儀(日本Robotmation公司)測定蛋殼強度;采用蛋品質多功能自動分析儀(以色列ORKA公司)測定蛋重、蛋黃顏色、蛋白高度及哈氏單位等;采用蛋黃分離器分離蛋黃后,置于電子天平稱量蛋黃重量,并計算蛋黃比率;人工剝去蛋殼內膜后用數顯千分尺(日本Mitutoyo公司)測定蛋殼厚度。

1.4.4 蛋黃中脂肪酸組成及含量

試驗第8周末,每組隨機選取4個雞蛋(每個重復1個),分離蛋黃并凍干后用于測定蛋黃中脂肪酸含量。檢測方法參照GB/T 21514—2008[26],檢測流程如下:準確稱取適量蛋黃凍干粉至15 mL螺口玻璃試管中,分別向試管中加入4 mL氯乙酰甲醇溶液(1∶10體積比)、1 mL內標溶液和1 mL正己烷,蓋緊瓶蓋振蕩混勻后80 ℃水浴2 h,冷卻至室溫后加入7%碳酸鉀5 mL,振蕩均勻,以1 000 r/min的速度離心10 min后取上層有機相過0.2 μm濾膜裝入進樣小瓶,進行氣相色譜檢測。氣象色譜分析條件:Agilent 6890氣相色譜儀,采用DB-23(60.0 m×250 μm×0.25 μm)色譜柱,載氣為氦氣,恒定流速2.0 mL/min,進樣量1 μL,分流比30∶1,進樣口溫度260 ℃。

1.4.5 血清生化指標

試驗第8周末,每個重復隨機選取2只雞,早晨空腹翅下靜脈采血,血液分別收集于2 mL的真空采血管中,置于離心機中以3 000 r/min離心10 min,分離得到血清,用于測定血清尿素氮(UN)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、丙二醛(MDA)、免疫球蛋白(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量和堿性磷酸酶(ALP)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性及總抗氧化能力(T-AOC)等,由上海聯碩生物科技有限公司進行測定。

1.5 數據統計與分析

采用Excel 2019對試驗數據進行整理,采用SPSS 26.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA),并采用Duncan氏法進行多重比較檢驗。結果以“平均值±標準差”表示,P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。

2 結 果

2.1 飼糧中添加發酵牡丹籽粕對黃山黑雞生產性能的影響

由表3可知,與對照組相比,5%FPSM組的產蛋率顯著升高(P<0.05),料蛋比和平均日采食量顯著降低(P<0.05);9%FPSM組的產蛋率和平均日采食量極顯著降低(P<0.01),料蛋比無顯著差異(P>0.05)。各組之間平均蛋重無顯著差異(P>0.05),但5%FPSM組和9%FPSM組的平均蛋重均低于對照組。

表3 發酵牡丹籽粕對黃山黑雞生產性能的影響

2.2 發酵牡丹籽粕對黃山黑雞蛋品質的影響

由表4可知,與對照組相比,5%FPSM組的各項蛋品質指標均無顯著差異(P>0.05);9%FPSM組的蛋形指數顯著升高(P<0.05),蛋殼顏色顯著降低(P<0.05),蛋殼厚度、蛋殼強度、蛋重、蛋白高度、蛋黃顏色、哈氏單位、蛋黃重和蛋黃比率均無顯著差異(P>0.05)。

表4 發酵牡丹籽粕對黃山黑雞蛋品質的影響

2.3 發酵牡丹籽粕對黃山黑雞蛋黃中脂肪酸含量的影響

由表5可知,與對照組相比,5%FPSM組的蛋黃中飽和脂肪酸(SFA)中山崳酸含量顯著升高(P<0.05),肉豆蔻酸含量顯著降低(P<0.05),棕櫚酸含量極顯著降低(P<0.01);單不飽和脂肪酸(MUFA)含量無顯著差異(P>0.05);PUFA中二十碳五烯酸(EPA)含量顯著升高(P<0.05),ALA和DHA含量無顯著差異(P>0.05),但分別提高了73.65%和29.55%,ω-3 PUFA含量顯著升高(P<0.05)。與對照組相比,9%FPSM組的蛋黃中SFA中月桂酸、肉豆蔻酸和棕櫚酸含量顯著或極顯著降低(P<0.05或P<0.01),其他SFA含量均無顯著差異(P>0.05),總SFA含量顯著降低(P<0.05);MUFA中肉豆蔻烯酸含量顯著降低(P<0.05),棕櫚酸含量極顯著降低(P<0.01),其他MUFA含量均無顯著差異(P>0.05);PUFA中ALA、DHA含量極顯著升高(P<0.01),分別提高了221.56%和94.89%,二十碳二烯酸含量顯著降低(P<0.05),亞油酸和EPA含量無顯著差異(P>0.05),但分別提高了43.90%和80.00%,其他PUFA含量均無顯著差異(P>0.05);總PUFA含量顯著升高(P<0.05),ω-3 PUFA含量極顯著升高(P<0.01),ω-6/ω-3 PUFA極顯著降低(P<0.01)。

表5 發酵牡丹籽粕對黃山黑雞蛋黃中脂肪酸含量的影響

2.4 發酵牡丹籽粕對黃山黑雞血清生化指標的影響

由表6可知,與對照組相比,5%FPSM組的血清TG、IgA、IgG含量和ALP活性及T-AOC極顯著升高(P<0.01),血清SOD、GSH-Px活性和IgM含量極顯著降低(P<0.01);9%FPSM組的血清LDL、TG、UN、IgA、IgM含量和T-AOC極顯著升高(P<0.01),血清ALP活性顯著升高(P<0.05),血清HDL和DMA含量極顯著降低(P<0.01)。

表6 發酵牡丹籽粕對黃山黑雞血清生化指標的影響

3 討 論

3.1 發酵牡丹籽粕對黃山黑雞生產性能的影響

本試驗結果表明,5%FPSM組的黃山黑雞產蛋率顯著高于對照組,同時料蛋比和平均日采食量顯著低于對照組;9%FPSM組的黃山黑雞料蛋比、平均日采食量極顯著低于對照組。這表明飼糧中發酵牡丹籽粕添加比例為5%時可以提高黃山黑雞生產性能,添加比例為9%時會對降低黃山黑雞生產性能。有研究表明,發酵可降低飼料中的抗營養因子含量,提升飼料營養價值,促進動物生產性能[27-29]。陸靜[16]研究發現,發酵牡丹籽粕添加比例對新楊黑雞蛋雞采食量無影響,與本研究結果不一致。而韋春杰[15]研究發現,飼糧中添加5%和10%的發酵牡丹籽粕顯著降低了京紅1號蛋雞采食量,但添加比例不超過7.5%時對蛋雞其他生產性能指標無明顯抑制作用,與本研究結果一致。這可能是由于采用的試驗雞品種不同造成的,不同品種雞的營養需要、對飼糧中抗營養因子耐受程度等有所不同,同時飼料發酵后的酸味也會影響雞群采食量。

3.2 發酵牡丹籽粕對黃山黑雞蛋品質的影響

本試驗結果表明,飼糧中添加不同比例的發酵牡丹籽粕對黃山黑雞的大部分蛋品質指標無顯著影響。蛋品質主要通過蛋型指數、蛋殼強度、哈氏單位和蛋黃顏色等指標綜合反映。哈氏單位是評價雞蛋品質的重要指標,與蛋白高度直接相關,其數值越大表明雞蛋品質越好。蛋黃顏色是影響消費者購買意愿的重要因素之一[30],蛋黃顏色主要受蛋雞飼糧組成影響。飼糧中添加發酵飼料可補充多種維生素,促進飼糧中類胡蘿卜素等有關的色素沉積到蛋黃中[31],從而使蛋黃顏色變黃。陶振陽等[32]研究表明,飼糧中添加發酵構樹對蛋雞產蛋后期蛋品質無顯著影響,與本研究結果一致,表明飼糧中添加發酵牡丹籽粕對黃山黑雞蛋品質無不良影響。

3.3 發酵牡丹籽粕對黃山黑雞蛋黃中脂肪酸含量的影響

本試驗結果表明,隨著飼糧中發酵牡丹籽粕添加比例增加,蛋黃中SFA含量逐漸降低,MUFA含量略有降低,PUFA含量逐漸增加,ω-6 PUFA和ω-3 PUFA含量逐漸增加。與對照組相比,5%FPSM和9%FPSM組的蛋黃中ALA含量分別提高了73.65%和243.11%,EPA含量分別提高了220.00%和80.00%,DHA含量分別提高了29.55%和94.89%;隨著飼糧中發酵牡丹籽粕添加比例增加,ω-6/ω-3 PUFA逐漸降低,從對照組的15.85分別降為13.20和8.75。這表明飼糧中添加發酵牡丹籽粕可以增加蛋黃中PUFA含量,尤其是ω-3 PUFA含量,改善蛋黃中脂肪酸組成,提高雞蛋的營養價值,與前人研究結果[16-17]一致。研究表明,雞蛋脂質組成的變化是蛋雞脂質合成和代謝發生改變的結果,而營養調控是主要途徑之一[33]。Whitehead[34]研究發現,飼糧脂肪酸組成可影響蛋黃中脂肪酸的沉積和組成。Herber等[35]研究表明,飼糧中添加ω-3 PUFA能顯著提高蛋黃中總PUFA含量,促進蛋黃中ω-3 PUFA的富集,降低蛋黃中ω-6 PUFA含量及ω-6/ω-3 PUFA。在本研究中,飼糧中添加發酵牡丹籽粕可提高蛋黃中ω-6 PUFA和ω-3 PUFA含量,ω-6 PUFA含量提高主要原因是蛋黃中亞油酸(屬ω-6 PUFA)含量增加所致,ω-3 PUFA含量提高是蛋黃中ALA、EPA和DHA等含量增加所致,與多數研究結論[36-38]一致。

3.4 發酵牡丹籽粕對黃山黑雞血清生化指標的影響

本試驗結果表明,與對照組相比,各試驗組參與脂質及蛋白質代謝的生化指標含量有所增高,且9%FPSM組與對照組差異顯著。這表明飼糧中添加5%的發酵牡丹籽粕對黃山黑雞營養代謝無顯著影響,但當發酵牡丹籽粕添加比例增加到9%時可能會對機體營養物質代謝有負面影響。本研究結果與前人研究結果[39-40]不一致,其可能原因一方面是使用的試驗動物、試驗材料不同導致的;另一方面是牡丹籽粕中的抗營養因子未能通過發酵降解完全,飼糧中發酵牡丹籽粕添加比例過高時超過了機體耐受力,從而影響了營養物質的代謝吸收,提示我們需要進一步深入開展牡丹籽粕中抗營養因子消除技術和不同品種雞飼糧中發酵牡丹籽粕適宜添加比例研究。

與對照組相比,飼糧中添發酵牡丹籽粕可極顯著提高血清T-AOC,表明添加發酵牡丹籽粕可提高機體抗氧化能力,降低機體氧化損傷;飼糧中添發酵牡丹籽粕可極顯著提高血清IgA含量,表明添加發酵牡丹籽粕可提高機體免疫力。多數研究表明,飼糧中添加發酵飼料可提高機體抗氧化能力和免疫力[41-43],與本研究結果一致。這可能是發酵牡丹籽粕中具有的強抗氧化活性的黃酮類物質發揮了作用[44],降低了機體脂質過氧化程度;同時發酵牡丹籽粕中的枯草芽孢桿菌、酵母菌等有益菌起到了活化雞腸道相關淋巴組織、刺激免疫器官從而形成大量免疫球蛋白的作用,同時抑制動物腸道內的有害微生物的繁殖與生長,起到替代抗生素的效果[45],增強了機體免疫力。

4 結 論

飼糧中添加5%的發酵牡丹籽粕可以提高黃山黑雞的生產性能;添加5%和9%的發酵牡丹籽粕可以提高蛋黃中DHA、ALA等ω-3 PUFA含量,降低ω-6/ω-3 PUFA,生產富含ω-3 PUFA的優質雞蛋,同時提高機體抗氧化能力和免疫力。本試驗條件下,黃山黑雞飼糧中發酵牡丹籽粕的適宜添加比例為5%。