辣蓼黃酮通過調控核因子E2相關因子2信號通路及組蛋白乙?；徑鈧慰袢《靖腥拘∈笳T導的脾臟和肺臟氧化應激

韋玉衡 趙雅琪 陳 奇 周家芳 周淑棉 胡庭俊*

(1.廣西大學動物科學技術學院,南寧 530004;2.貴港市動物疫病預防控制中心,貴港 537100)

偽狂犬病毒(PRV)可感染豬、羊、牛、鼠等動物,引起嚴重的臨床癥狀和急性死亡[1]。豬是其主要宿主和傳染源,各年齡段的豬只均易感染,可引起母豬繁殖障礙,仔豬出現嚴重的呼吸道癥狀和神經癥狀,甚至死亡;豬只感染后終生帶毒,且持續排毒,豬場凈化不到位將導致該病反復感染,導致重大經濟損失[2]。由于PRV感染侵害呼吸系統,因此選擇肺臟為研究目標之一。脾臟是機體最大的免疫器官,占全身淋巴組織總量的25%,含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞,是機體細胞免疫和體液免疫的中心,通過多種機制發揮抗病毒和抗腫瘤等作用,因此選擇脾臟為研究目標之一。

除在中間宿主體內傳播之外,Li等[3]發現養豬場環境中廣泛存在PRV污染,PRV可以通過病毒污染的污染物從豬傳播給其他動物。Liu等[4]從急性人腦炎病例中分離出一種PRV毒株,該分離株與我國PRV變異株具有密切的系統發育關系和相似的病原學特征,表明PRV對公共衛生和養豬業均具有潛在的威脅。

據報道,辣蓼化學成分主要包括有機酸、黃酮類和萜類等,具有抗菌、抗氧化、抗炎、抗病毒、殺蟲等生物活性[5]。研究發現,辣蓼黃酮可以通過調節病毒感染免疫細胞內炎性因子含量來干預炎癥反應[6]?？锬鹊萚7]研究發現,辣蓼黃酮可以通過降低活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)含量,有效緩解脂多糖(LPS)造成的氧化應激損傷和炎癥反應。辣蓼黃酮正丁醇部分(FNB)可以使小鼠耳腫脹程度極顯著降低,表明其對小鼠具有一定的抗炎作用[8]。辣蓼總黃酮無急性毒性作用,也無亞慢性毒性作用[9]。病毒感染會導致小鼠神經瘤細胞內ROS、丙二醛(MDA)含量上升,超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性降低,核因子E2相關因子2(Nrf2)和血紅素加氧酶-1(HO-1)的mRNA和蛋白表達上升,造成氧化應激損傷[10]?？寡趸傅谋磉_受到轉錄因子Nrf2的調控[11],通過使用抗氧化劑維持機體氧化與抗氧化平衡,對病毒感染有一定的治療效果[12]。

組蛋白乙?；潜碛^遺傳學中一種重要的后修飾類型,因為它影響DNA纏繞組蛋白并包裝成染色質的方式[13]。組蛋白乙?；怯山M蛋白乙酰轉移酶(HAT)和組蛋白去乙?；?HDAC)完成的,組蛋白乙?；癄顟B取決于HDAC和HAT活性之間的動態平衡[14]。組蛋白乙?；趦鹊谋碛^遺傳修飾導致的異常表觀遺傳模式被認為是炎癥性系統性疾病的發生及細胞和機體氧化應激損傷的重要原因。研究表明,病毒通過介導宿主組蛋白乙?；絹碚{節炎癥因子的表達[15]。Cao等[16]發現,三七皂苷對豬圓環病毒2型誘導的氧化應激和組蛋白乙?；哂姓{控作用。由于辣蓼黃酮具有良好的抗氧化和抗炎活性,我們推測其可能通過調節組蛋白乙?；讲⒄{控Nrf2氧化應激通路相關因子的表達,進而緩解PRV感染小鼠誘導的脾臟和肺臟氧化應激。

因此,本研究采用PRV感染小鼠造成其氧化應激,通過熒光定量PCR(q-PCR)、免疫組化和蛋白免疫印跡(Western Blot)等方法,觀察辣蓼黃酮對Nrf2氧化應激信號通路相關因子的mRNA和蛋白表達的影響,并觀察組蛋白乙?；欠袷艿秸{控,進而闡明辣蓼黃酮緩解PRV感染小鼠誘導的脾臟和肺臟氧化應激的分子機制。

1 材料與方法

1.1 病毒和藥物

豬PRV株(PRV-GXLB-2013)由廣西大學動物科學技術學院預防獸醫學教研室贈予,經測定其組織半數感染量(TCID50)=10-6.75/0.1 mL。辣蓼購自廣西壯族自治區南寧市山草堂,由廣西大學動物科學技術學院獸醫藥理實驗室提取總黃酮。維生素C(VC)購自索萊寶公司。

1.2 主要試劑

Trizol試劑盒購自TaKaRa公司;Nrf2抗體、HO-1抗體、依賴還原型輔酶Ⅰ(Ⅱ)醌氧化還原酶1(NQO1)抗體、誘導型一氧化氮合酶(iNOS)抗體、辣根過氧化物酶連接的兔抗免疫球蛋白G(IgG)均購自Abcam公司;廣譜免疫組化檢測試劑盒購自博奧森生物技術有限公司;脫脂奶粉購自武漢賽維爾生物科技有限公司;β-肌動蛋白(β-actin)抗體、乙?；M蛋白H3(AcH3)抗體和乙?；M蛋白H4(AcH4)抗體均購自CST公司。

1.3 試驗動物

無特定病原體(SPF)級昆明種小鼠,體重(20±2) g,雌雄各占1/2,購自廣西醫科大學實驗動物中心(SYXK桂2014-0003)。于鼠籠恒溫飼養,自由采食,適應7 d以適應新環境。

1.4 試驗設計

將60只小鼠隨機分為6組,每組10只,雌性各占1/2。6組分別為空白對照組、PRV組、VC組以及辣蓼黃酮高、中、低劑量組?？瞻讓φ战M小鼠肌肉注射杜氏改良Eagle培養液(DMEM)0.1 mL/只,其他5組小鼠肌肉注射聯合滴鼻接種10×TCID50PRV病毒液0.1 mL/只;2 h后,空白對照組和PRV組小鼠灌服100 mg/kg BW的DMEM,辣蓼黃酮高、中、低劑量組分別灌服200、100和50 mg/kg BW的辣蓼黃酮混懸液,VC組灌服100 mg/kg BW的VC,各組灌服量均為0.2 mL,VC及高、中、低劑量的辣蓼黃酮溶于DMEM對小鼠進行灌胃。連續灌胃7 d,每天1次。各試驗組小鼠于感染后的第7天剖殺,取脾臟、肺臟組織測定mRNA和蛋白表達。

1.5 Nrf2氧化應激信號通路相關mRNA及HDAC和HAT mRNA表達的測定

采樣后用Trizol法取組織總RNA,將RNA反轉錄為cDNA后,通過q-PCR方法檢測小鼠脾臟、肺臟組織中iNOS、HO-1、NQO1、Nrf2、HAT和HDAC的mRNA表達水平。各基因引物序列見表1。q-PCR結果以β-actin為內參基準分析,通過2-ΔΔCt計算各基因的表達水平。

表1 各基因引物序列

1.6 免疫組化檢測小鼠肺臟組織iNOS及Nrf2氧化應激信號通路相關蛋白表達

采樣后,將固定的組織進行二次取材,經梯度脫水、透明和包埋后,切下4 μm厚度的石蠟片。再對石蠟切片進行避光阻斷、微波修復等處理,同時按1∶1 000稀釋iNOS、Nrf2、HO-1和NQO1等抗體,于4 ℃過夜孵育。而后,按1∶1稀釋二抗并孵育,經二氨基聯苯胺(DAB)避光顯色和蘇木精襯染后,使用甘油明膠封片。最后在光學顯微鏡下觀察并采圖分析,通過Image J軟件計算平均光密度值。

1.7 Western Blot檢測小鼠脾臟、肺臟組織AcH3和AcH4蛋白表達

采樣后,提取小鼠脾臟、肺臟組織蛋白,測定蛋白濃度,通過Western Blot測定AcH3和AcH4的蛋白表達水平。首先配制十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)凝膠,待凝膠于電泳槽內凝固后,加入蛋白樣品進行電泳。以標記物(Marker)為參考,選取所需要的目的蛋白和內參蛋白所在位置,將其余部分膠裁去,再根據膠面積裁剪出對應大小的聚偏二氟乙烯(PVDF)膜。將PVDF膜放入甲醇中活化,再使用與PVDF膜相當大小的厚濾紙按三明治結構包夾凝膠和PVDF膜,置于半干轉膜儀上,恒流轉膜。轉膜結束后,使用5%的脫脂奶粉封閉PVDF膜2 h。最后,將PVDF膜放入1∶1 000稀釋的AcH3和AcH4抗體中,低溫過夜孵育,次日孵育1∶400稀釋后的二抗,便可于蛋白成像儀觀察蛋白條帶,通過Image J計算灰度值。

1.8 數據分析

試驗數據使用SPSS 21.0統計軟件進行單因素方差分析,選擇LSD檢驗進行差異性分析。結果用平均值±標準誤表示,P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。

2 結 果

2.1 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠脾臟和肺臟組織中iNOS和Nrf2 mRNA表達的影響

如表2所示,與空白對照組相比,PRV組脾臟組織中iNOS的mRNA表達水平顯著升高(P<0.05),肺臟組織中iNOS的mRNA表達水平極顯著升高(P<0.01)。與PRV組相比,VC組及辣蓼黃酮高、中、低劑量組肺臟組織中iNOS的mRNA表達水平極顯著降低(P<0.01)。

表2 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠脾臟和肺臟組織中iNOS和Nrf2 mRNA表達的影響

與空白對照組相比,PRV組肺臟組織中Nrf2的mRNA表達水平顯著升高(P<0.05)。與PRV組相比,VC組及辣蓼黃酮高、中、低劑量組脾臟中Nrf2的mRNA表達水平極顯著升高(P<0.01),VC組及辣蓼黃酮高劑量組肺臟組織中Nrf2的mRNA表達水平顯著或極顯著升高(P<0.05或P<0.01)。

2.2 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠脾臟和肺臟組織中HO-1和NQO-1 mRNA表達的影響

如表3所示,與空白對照組相比,PRV組脾臟組織中HO-1的mRNA表達水平極顯著降低(P<0.01),肺臟組織中HO-1的mRNA表達水平顯著升高(P<0.05)。與PRV組相比,VC組及辣蓼黃酮高、中、低劑量組脾臟組織中HO-1的mRNA表達水平極顯著升高(P<0.01),VC組及辣蓼黃酮高、中劑量組肺臟組織中HO-1的mRNA表達水平顯著或極顯著降低(P<0.05或P<0.01)。

表3 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠脾臟和肺臟組織中HO-1和NQO1 mRNA表達的影響

與空白對照組相比,PRV組肺臟組織中NQO1的mRNA表達水平顯著升高(P<0.05)。與PRV組相比,VC組及辣蓼黃酮高、中劑量組脾臟組織中NQO1的mRNA表達水平極顯著升高(P<0.01),VC組及辣蓼黃酮高劑量組肺臟組織中NQO1的mRNA表達水平顯著或極顯著升高(P<0.05或P<0.01)。

2.3 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠脾臟和肺臟組織中HAT和HDAC mRNA表達的影響

如表4所示,與空白對照組相比,PRV組脾臟和肺臟組織中HAT的mRNA表達水平極顯著升高(P<0.01)。與PRV組相比,VC組及辣蓼黃酮高、中、低劑量組脾臟和肺臟組織中HAT的mRNA表達水平極顯著降低(P<0.01)。

表4 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠脾臟和肺臟組織中HAT和HDAC mRNA表達的影響

與空白對照組相比,PRV組脾臟組織中HDAC的mRNA表達水平極顯著降低(P<0.01)。與PRV組相比,VC組及辣蓼黃酮高、中、低劑量組脾臟組織中HDAC的mRNA表達水平極顯著升高(P<0.01),VC組及辣蓼黃酮中、低劑量組肺臟組織中HDAC的mRNA表達水平顯著升高(P<0.05)。

2.4 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠肺臟組織中iNOS和Nrf2蛋白表達的影響

如圖1所示,肺臟組織中iNOS蛋白在PRV組有較多的陽性表達,顯示為棕黃色或棕褐色,主要分布在支氣管上皮細胞的胞漿中。如表5所示,與空白對照組相比,PRV組肺臟組織中iNOS的蛋白表達水平極顯著升高(P<0.01)。與PRV組相比,VC組及辣蓼黃酮高、低劑量組肺臟組織中iNOS的蛋白表達水平極顯著降低(P<0.01)。

A:空白對照組;B:PRV組;C:VC組;D:辣蓼黃酮低劑量組;E:辣蓼黃酮中劑量組;F:辣蓼黃酮高劑量組;比例尺:50 μm。下圖同。

表5 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠肺臟組織中iNOS和Nrf2蛋白表達的影響

如圖2所示,肺臟組織中Nrf2蛋白在各試驗組均有陽性表達,顯示為棕褐色,主要分布在肺泡細胞和血管上皮細胞的胞漿中,同時Nrf2蛋白在支氣管上皮細胞的胞核中亦有表達。如表5所示,與空白對照組相比,PRV組肺臟組織中Nrf2的蛋白表達水平極顯著升高(P<0.01)。與PRV組相比,VC組肺臟組織中Nrf2的蛋白表達水平極顯著升高(P<0.01),而辣蓼黃酮高、中、低劑量組肺臟組織中Nrf2的蛋白表達水平差異不顯著(P>0.05)。

圖2 PRV感染小鼠肺臟組織中Nrf2蛋白免疫組化切片圖

2.5 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠肺臟組織中HO-1和NQO1蛋白表達的影響

如圖3所示,肺臟組織中HO-1蛋白在各試驗組均有陽性表達,主要分布在胞漿或支氣管上皮細胞的胞漿或胞核中,肺泡細胞中也有少許分布,呈棕黃色或棕褐色。如表6所示,與空白對照組相比,PRV組肺臟組織中HO-1的蛋白表達水平有所降低,但差異不顯著(P>0.05)。與PRV組相比,VC組及辣蓼黃酮高、低劑量組肺臟組織中HO-1的蛋白表達水平極顯著升高(P<0.01)。

圖3 PRV感染小鼠肺臟組織中HO-1蛋白免疫組化切片圖

表6 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠肺臟組織中HO-1和NQO1蛋白表達的影響

如圖4所示,肺臟組織中NQO1蛋白在空白對照組表達較少,在其他各試驗組均有表達,顯示為棕褐色或者黃色,主要分布在肺泡壁細胞的胞漿中,同時NQO1蛋白在支氣管上皮細胞的胞核中亦有分布。如表6所示,與空白對照組相比,PRV組肺臟組織中NQO1的蛋白表達水平有所升高,但差異不顯著(P>0.05)。與PRV組相比,辣蓼黃酮高劑量組肺臟組織中NQO1的蛋白表達水平顯著升高(P<0.05),辣蓼黃酮低劑量組肺臟組織中NQO1的蛋白表達水平顯著降低(P<0.05)。

圖4 PRV感染小鼠肺臟組織中NQO1蛋白免疫組化切片圖

2.6 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠脾臟和肺臟組織中AcH3和AcH4蛋白表達的影響

如圖5和圖6所示,與空白對照組相比,PRV組脾臟和肺臟組織中AcH3的蛋白表達水平極顯著升高(P<0.01)。與PRV組相比,VC組及辣蓼黃酮高、中、低劑量組脾臟和肺臟組織中AcH3的蛋白表達水平顯著或極顯著降低(P<0.05)。

圖5 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠脾臟組織中AcH3和AcH4蛋白表達的影響

圖6 辣蓼黃酮對PRV感染小鼠肺臟組織中AcH3和AcH4蛋白表達的影響

與空白對照組相比,PRV組肺臟組織中AcH4的蛋白表達水平極顯著降低(P<0.01)。與PRV組相比,VC組及辣蓼黃酮高、中、低劑量組脾臟組織中AcH4的蛋白表達水平顯著升高(P<0.05),辣蓼黃酮高、中、低劑量組肺臟組織中AcH4的蛋白表達水平極顯著升高(P<0.01)。

3 討 論

研究表明,iNOS是合成NO的關鍵酶,在iNOS的催化下,NO可以在較長的時間內以恒定速率合成[17]。而NO是一種高反應性細胞毒性自由基。因此,iNOS被認為是評估氧化應激反應過程的有效生物標志物之一。陳奇等[18]研究發現,豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)感染后將誘導細胞發生氧化應激,且iNOS分泌水平在測定的各個時間點均高于空白對照組。本研究結果顯示,PRV感染小鼠后,小鼠脾臟和肺臟組織中iNOS的mRNA表達水平升高,這與前人的研究結果一致,說明PRV感染造成了小鼠的氧化應激。高、中、低3個劑量的辣蓼黃酮可下調小鼠肺臟組織中iNOS的mRNA和蛋白表達水平,說明辣蓼黃酮能夠緩解PRV感染誘導的氧化應激。

生物體內,自由基作用于脂質發生過氧化反應,氧化終產物為MDA,會引起蛋白質、核酸等生命大分子的交聯聚合,且具有細胞毒性。MDA含量是反映機體抗氧化潛在能力的重要參數,可以反映機體脂質過氧化速率和強度,也能間接反映組織過氧化損傷程度。髓過氧化物酶(MPO)又稱過氧化物酶,是血紅素輔基的血紅素蛋白酶,是血紅素過氧化物酶超家族成員之一?？偪寡趸芰?T-AOC)是指各種抗氧化物質和抗氧化酶等構成的總抗氧化水平,如抗氧化物酶、維生素C、維生素E和胡蘿卜素等,為保護細胞和機體免于活性氧自由基造成的氧化應激損傷,因此可用T-AOC來評價生物活性物質的抗氧化能力。SOD是生物體內存在的一種抗氧化金屬酶,它能夠催化超氧陰離子自由基歧化生成氧和過氧化氫,在機體氧化與抗氧化平衡中起到至關重要的作用,與很多疾病的發生、發展密不可分。本實驗室前期研究表明,辣蓼黃酮可極顯著降低LPS誘導的小鼠小腸中MDA和MPO的分泌水平,同時,其還可極顯著升高小鼠血清中谷胱甘肽的分泌水平,高劑量的辣蓼黃酮能夠顯著或極顯著提高小鼠肝臟中T-AOC和SOD活性[19]。此外,Ren等[20]研究表明,辣蓼黃酮乙酸乙酯部位可顯著或極顯著降低PRV感染RAW264.7細胞內ROS、NO含量和iNOS活性,本研究結果與其一致。由此表明,辣蓼黃酮能夠緩解外來病原感染小鼠造成的氧化應激,并提高小鼠自身機體的抗氧化能力。

此外,Wang等[21]研究表明,氧化應激是由紫外線輻射等破壞性刺激引起的皮膚損傷的主要原因,而間質干細胞衍生外泌體(MSC-Exo)作為一種納米治療劑可通過降低小鼠體內ROS含量、提高MDA含量而緩解氧化應激和皮膚損傷;敲低Nrf2的表達減弱了MSC-Exo在體內和體外的抗氧化能力,表明該治療藥物提升的抗氧化能力是通過Nrf2信號通路介導的。Yang等[22]研究表明,藥物Maresin1可降低小鼠肝臟中ROS和MDA等氧化應激指標的含量而緩解LPS誘導造成的氧化應激和急性肝臟損傷;而敲低Nrf2基因后,小鼠肝臟中HO-1和谷胱甘肽過氧化物酶4(GPX4)的表達水平隨之降低,Maresin1的保護作用也明顯下降,表明Nrf2/HO-1/GPX4的激活可抑制ROS的產生,Nrf2信號通路及其下游抗氧化酶HO-1、GPX4和NQO1等的表達水平高低可在一定程度上反映機體抗氧化能力的強弱。

Nrf2在氧化應激過程中發揮保護作用,在ROS存在下,Kelch樣環氧氯丙烷相關蛋白1(Keap1)-Nrf2復合物解離,Nrf2從細胞質易位,并于細胞核中結合抗氧化反應元件(ARE)參與抗氧化反應的基因的轉錄,其產物主要是具有滅活ROS能力的酶[23]。其中一種ARE酶是HO-1,可保護細胞遭受氧化應激損傷,已被證明具有抗炎、抗氧化和抗凋亡作用[24]。另一種酶是NQO1,是一種抗氧化酶,可催化幾種不同類別的醌樣化合物的雙電子還原,以避免單電子還原啟動氧化還原循環產生活性氧并造成氧化應激[25]。劉澤霖等[10]在Nrf2通路對日本腦炎病毒(JEV)感染小鼠神經瘤細胞引起的氧化應激反應進行研究發現,JEV激活了Nrf2的mRNA和蛋白的表達。慢性萎縮性胃炎模型大鼠胃黏膜組織Nrf2、NQO1、谷胱甘肽S轉移酶(GST)蛋白及mRNA表達水平升高[26]。薰衣草總黃酮能夠明顯減輕小鼠皮膚光損傷引起的氧化應激,減輕皮膚外觀損傷程度、表皮厚度及皮膚組織的病理學變化,且能顯著增強Nrf2、HO-1、NQO1的蛋白表達水平[27]。在本研究中,PRV感染會導致小鼠肺臟組織中Nrf2和NQO1的mRNA和蛋白表達水平上調,且導致HO-1的mRNA表達水平上調,這與前人的研究結果相一致。此外,高、中、低劑量的辣蓼黃酮能上調PRV感染小鼠脾臟組織中Nrf2、HO-1和NQO1的mRNA表達水平,且高、低劑量的辣蓼黃酮能上調PRV感染小鼠脾臟組織中HO-1和NQO1的蛋白表達水平,這同樣與前人的研究結果相類似。由此表明,辣蓼黃酮可通過調控Nrf2信號通路,增強抗氧化酶相關基因和蛋白的表達,發揮抗氧化作用,緩解PRV感染小鼠誘導的氧化應激。其中,200 mg/kg BW的高劑量辣蓼黃酮效果最好。

組蛋白H3和組蛋白H4中賴氨酸殘基的乙?；潜谎芯孔疃嗟慕M蛋白修飾類型,它受到HAT和HDAC活性的嚴格控制[28]。HAT和HDAC活性之間的平衡保證了穩定的組蛋白乙?；?而這種平衡的改變會導致疾病的發生[29]。據報道,1型即艾滋病病毒(HIV-1)可以降低HDAC活性,增加HAT活性,并上調組蛋白H3和組蛋白H4的乙?；饔肹30]。另有研究表明,抑制HIV-1復制與HDAC活性的增加和組蛋白乙?；囊种朴嘘P,而高HAT活性與HIV-1活性轉錄相對應[31-32]。據報道,豬圓環病毒2型(PCV2)感染在小鼠體內誘導了氧化應激和組蛋白乙?；?三七皂甙可以通過降低HAT活性并增加PCV2感染小鼠脾臟組織中HDAC活性來降低組蛋白H3的乙?；?緩解氧化應激造成的損傷[16]。Chen等[33]研究表明,馬尾藻多糖通過降低HAT的分泌水平,升高HDAC的分泌水平,下調組蛋白H3和組蛋白H4的乙?；?顯著抑制炎癥反應,從而保護細胞免受PCV2誘導的損傷。在本研究中,PRV感染上調了小鼠脾臟和肺臟組織中HAT的mRNA表達水平,下調了小鼠脾臟組織中HDAC的mRNA表達水平,并上調了組蛋白H3的乙?；?。這與前人的研究結果相類似。而高、中、低3個劑量的辣蓼黃酮能下調小鼠脾臟和肺臟組織中HAT的mRNA表達水平,上調小鼠脾臟和肺臟組織中HDAC的mRNA表達水平,下調組蛋白H3的乙?；?。上述結果表明,辣蓼可通過上調HDAC的mRNA表達水平,進而下調調控組蛋白乙?；?發揮抗氧化作用,緩解PRV感染小鼠誘導的氧化應激。綜合分析來看,200 mg/kg BW的高劑量辣蓼黃酮效果最好。

4 結 論

辣蓼黃酮對Nrf2信號通路和組蛋白乙?；揎椌哂姓{控作用,且其通過該調控作用而緩解PRV感染小鼠脾臟和肺臟誘導的氧化應激。