乳痛軟堅片抗炎鎮痛及調節免疫藥效作用的實驗研究*

鄧東方，王 鑫，姜 帆，雷詩卉，張勝麗，繆程鋅，劉 林，葛安琪

（1.湖南中醫藥大學第一附屬醫院，湖南 長沙 410007；2.湖南中醫藥大學，湖南 長沙 410208）

乳腺增生是發生于育齡期婦女的一種乳腺組織良性增生性疾病[1]，以乳腺疼痛、結塊及腫塊為主要表現。乳腺增生屬于中醫學中“乳癖”的范疇，氣滯、痰凝、血瘀是其發病因素[2]，治法有理氣、化痰、活血等方法。研究表明乳腺增生患者發生乳腺癌的風險為1%～2%，比普通人患乳腺癌的概率增加了4倍左右[3-4]，因此對乳腺增生的研究與治療具有重要的意義。

乳痛軟堅片是湖南中醫藥大學第一附屬醫院專家根據多年的臨床經驗總結研制而成的特色醫院制劑，具有疏肝解郁、化痰散結、活血止痛的功效，對肝郁氣滯、痰瘀互結型乳腺增生患者具有良好的治療效果[5-6]。本研究通過鎮痛、抗炎和調節免疫藥理作用的動物實驗研究，進一步明確其防治乳腺增生的藥理作用機理及特點，旨在為其進一步臨床運用推廣和新藥研發提供實驗依據。

1 材 料

1.1 藥物與試劑 乳痛軟堅片（湖南中醫藥大學第一附屬醫院，批號：201804，人臨床用量為7.2 g/d）；醋酸潑尼松（浙江仙琚制藥股份有限公司，批號：1909215，人臨床用量為60 mg/d）；乳核散結片（廣州白云山中一藥業有限公司，批號：VN0020，人臨床用量為4.32 g/d）；阿司匹林（舒泰神生物制藥股份有限公司，批號：191408，人臨床用量為3.0 g/d）；羅通定（山西云鵬制藥有限公司，批號：200807，人臨床用量為120 mg/次）；左旋咪唑（山西云鵬制藥股份有限公司，批號：B150101）；冰醋酸（天津市致遠化學試劑有限公司，批號：20180901）；角叉菜膠（Solarbio公司，批號：9000-07-1）；豚鼠血清（北京鑫泉永碩科技有限公司，批號：20190702）；印度墨汁（北京雷根生物技術有限公司，批號：1023A20）。

1.2 儀器 UV1800多功能分光光度計（日本島津）；YLS-7B型足趾容積測定儀（山東省醫學科學院設備科）；37370型足底熱痛測試儀（意大利VGO）；AY-120型電子分析天平（日本島津）；101-2ES型電熱鼓風干燥箱（北京永光明醫療儀器有限公司）；TP-2200B電子天平（湘儀天平儀器設備有限公司）；LA612型超純水儀（ELGA）；H1850型低速臺式離心機（湖南湘儀儀器有限公司）；BCD-196TMZL型冰箱（海爾集團）；HDPN-88型電熱恒溫培養箱（上海躍進醫療器械有限公司）。

1.3 實驗動物 SD大鼠，120只，SPF級，雌雄各半，體質量（140±10）g；ICR小鼠，240只，SPF級，雌雄各半，體質量（20±2）g。動物均購自湖南斯萊克景達動物有限公司，許可證號：SCXK（湘）2019-0004。所有動物均適應性喂養4 d后開始實驗，飼養溫度維持在18～24 ℃，濕度40%～70%，照明時間隨同自然晝夜變化，每2 d投喂飼料、清換墊料、清理籠具，定期消毒籠具。本實驗經湖南中醫藥大學第一附屬醫院倫理委員會審查，批號：ZYFY20230509-01。

2 方 法

2.1 鎮痛藥理作用實驗[7]

2.1.1 小鼠扭體實驗[8]取60只ICR小鼠，雌雄各半，體質量18～22 g，按體質量隨機分為模型組、羅通定組（46.8 mg/kg）、乳核散結片組（0.56 g/kg）、乳痛軟堅片高劑量組（3.76 g/kg）、乳痛軟堅片中劑量組（1.88 g/kg）、乳痛軟堅片低劑量組（0.94 g/kg），每組10只。羅通定組、乳核散結片組、乳痛軟堅片高劑量組、乳痛軟堅片中劑量組、乳痛軟堅片低劑量組分別灌胃相應藥物，模型組灌胃等體積純凈水，灌胃體積均為20 mL/kg，1次/d，連續給藥5 d。于末次藥后1 h，腹腔注射0.6%冰醋酸0.2 mL/20 g，記錄15 min內各組小鼠的扭體次數及潛伏期。

2.1.2 小鼠熱板法實驗 預選痛閾在5～30 s內的18～22 g雌性ICR小鼠60只，按痛閾值隨機分為模型組、羅通定組（46.8 mg/kg）、乳核散結片組（0.56 g/kg）、乳痛軟堅片高劑量組（3.76 g/kg）、乳痛軟堅片中劑量組（1.88g/kg）、乳痛軟堅片低劑量組（0.94g/kg），每組10只。羅通定組、乳核散結片組、乳痛軟堅片高劑量組、乳痛軟堅片中劑量組、乳痛軟堅片低劑量組小鼠分別灌胃相應藥物，模型組灌胃等體積純凈水，灌胃體積均為20 mL/kg，1次/d，連續給藥5 d。用熱板法分別測小鼠末次給藥后1、2、3 h痛閾值。小鼠的足部受熱板刺激而產生疼痛時，會發生舔舐后足（后足為身體支撐點）的特殊反應，以接觸熱板到舔舐后足所需的時間作為痛閾值。

2.2 抗炎藥理作用實驗[7]

2.2.1 大鼠肉芽腫實驗 取60只SD大鼠，雌雄各半，體質量130～150 g，麻醉后進行腹部切口，將50 mg棉球（青霉素消毒）植入大鼠兩側腹股溝皮下，左右各1個，縫合，誘導大鼠肉芽腫增生。于手術后24 h，按體質量隨機分為模型組、醋酸潑尼松組（5.4 mg/kg）、乳核散結片組（0.39 g/kg）、乳痛軟堅片高劑量組（2.6 g/kg）、乳痛軟堅片中劑量組（1.3 g/kg）、乳痛軟堅片低劑量組（0.65 g/kg），每組10只。醋酸潑尼松組、乳核散結片組、乳痛軟堅片高劑量組、乳痛軟堅片中劑量組、乳痛軟堅片低劑量組大鼠分別灌胃相應藥物，模型組大鼠灌胃給予等體積純凈水，灌胃體積均為10 mL/kg，1次/d，連續7 d。末次灌胃1 h后，處死動物，將棉球和肉芽組織一同摘出，于60 ℃干燥24 h至恒重后，稱重，空白棉球同法處理。肉芽組織與棉球的質量減去空白棉球質量，即為肉芽腫凈重，按動物體質量折算成“肉芽腫質量(mg)/體質量（100 g）”。

2.2.2 大鼠足腫脹實驗[9]取60只SD大鼠，雌雄各半，體質量130～150 g。按性別、體質量機分為模型組、阿司匹林組（0.27 g/kg）、乳核散結片組（0.39 g/kg）、乳痛軟堅片高劑量組（2.6 g/kg）、乳痛軟堅片中劑量組（1.3 g/kg）、乳痛軟堅片低劑量組（0.65 g/kg），每組10只。阿司匹林組、乳核散結片組、乳痛軟堅片高劑量組、乳痛軟堅片中劑量組、乳痛軟堅片低劑量組大鼠分別灌胃相應藥物，模型組灌大鼠胃等體積純凈水，灌胃體積均為10 mL/kg，1次/d，連續7 d。末次給藥前，用足趾容積測定儀測定大鼠右踝關節下容積為致炎前容積，末次給藥30 min后，大鼠右后肢足跖皮下注射1%角叉菜膠0.1 mL致炎。于致炎后1、2、3、4、5、6 h測右踝關節下容積1次。以足腫脹度為指標。腫脹度=致炎后足趾容積-致炎前足趾容積。

2.3 調節免疫功能藥理作用實驗[10]

2.3.1 小鼠血清溶血素實驗 取ICR小鼠60只，體質量18～22 g，雌雄各半，按體質量隨機分為模型組、左旋咪唑組（22.75mg/kg）、乳核散結片組（0.56 g/kg)、乳痛軟堅片高劑量組（3.76 g/kg）、乳痛軟堅片中劑量組（1.88g/kg）、乳痛軟堅片低劑量組（0.94g/kg），每組10只。左旋咪唑組、乳核散結片組、乳痛軟堅片高劑量組、乳痛軟堅片中劑量組、乳痛軟堅片低劑量組小鼠分別灌胃相應藥物，模型組小鼠灌胃等體積純凈水，灌胃體積均為20 mL/kg，1次/d，連續3 d。末次給藥1 h后，腹腔注射5%氯化鈉溶液雞紅細胞混懸液0.2 mL進行免疫，免疫后繼續灌胃給藥7d，第10天給藥30 min后，各組小鼠摘眼球取血，3 000 r/min（離心半徑10 cm），離心15 min，取血清用生理鹽水稀釋100倍，取稀釋血清1 mL，與5%雞紅細胞混懸液0.5 mL、補體（10%豚鼠的血清）0.5 mL混合，37 ℃恒溫箱保溫30 min后，置0 ℃冰箱內中止反應，再離心待測定。另設不加血清的空白管，即5%雞紅細胞混懸液0.5 mL，10%補體0.5 mL混合，在37 ℃水浴保溫30 min后，置于0 ℃冰箱中，中止反應，2 000 r/min（離心半徑為10 cm）離心10 min，取其上清液測定光密度（OD），以OD值作為血清溶血素指標。

2.3.2 小鼠碳粒廓清試驗 取ICR小鼠60只，雄性，體質量18～22 g，根據體質量隨機分為模型組、左旋咪唑組（22.75 mg/kg）、乳核散結片組（0.56 g/kg)、乳痛軟堅片高劑量組（3.76 g/kg）、乳痛軟堅片中劑量組（1.88 g/kg）、乳痛軟堅片低劑量組（0.94 g/kg），每組10只。左旋咪唑組、乳核散結片組、乳痛軟堅片高劑量組、乳痛軟堅片中劑量組、乳痛軟堅片低劑量組小鼠分別灌胃相應藥物，模型組小鼠灌胃等體積純凈水，灌胃體積均為20 mL/kg，1次/d，連續7d。末次給藥1 h后，小鼠尾靜脈注射20%印度墨汁（0.1 mL/10 g)，分別于注入墨汁2 min和10 min后經眼眶靜脈采血20 μL，加入2 mL 0.1%Na2CO3溶液中。于分光光度計波長600 nm處測OD值。按照公式計算各組廓清指數（K）和吞噬指數（α）。K=（lgOD2-lgOD10）/（t2-t1）=lg（OD2/OD10）/8。α=體質量/（肝質量+脾質量）×K1/3。

2.4 統計學方法 采用SPSS 27.0軟件處理數據，計量資料以“均數±標準差”（±s）表示，計量資料符合正態分布且方差齊。計量資料比較采用單因素方差分析（One way ANOVA），兩兩比較采用LSD-t檢驗。不符合正態分布的重復測量數據，采用廣義估計方程分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

3 結 果

3.1 小鼠扭體實驗 乳痛軟堅片高劑量組小鼠扭體潛伏期長于模型組，扭體次數少于模型組，差異均有統計學意義（P＜0.01或P＜0.05）；乳痛軟堅片中劑量組扭體次數少于模型組，差異有統計學意義（P＜0.05）。乳痛軟堅片高、中、低劑量組小鼠扭體潛伏期、扭體次數與羅通定組比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。乳痛軟堅片高、中劑量組小鼠扭體潛伏期長于乳核散結片組，扭體次數少于乳核散結片組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。乳痛軟堅片能顯著減少小鼠扭體次數，具有一定的鎮痛作用。（見表1）

表1 各組小鼠扭體潛伏期、扭體次數比較 （±s）

注：與模型組比較，aP＜0.05，bP＜0.01；與乳核散結片組比較，dP＜0.05。

組別 n 給藥劑量 潛伏期/s 扭體次數/次模型組 10 212.42±83.59 36.41±14.81羅通定組 10 46.80 mg/kg 340.53±101.71b 17.53±6.49b乳核散結片組 10 0.56 g/kg 215.91±66.23 35.43±12.18乳痛軟堅片高劑量組 10 3.76 g/kg 321.93±125.64ad 18.22±6.02bd乳痛軟堅片中劑量組 10 1.88 g/kg 302.44±102.31d 22.51±8.27ad乳痛軟堅片低劑量組 10 0.94 g/kg 278.63±89.13 25.24±8.53 F 3.13 6.99 P 0.014 0.000

3.2 小鼠熱板法實驗 乳痛軟堅片組高劑量組小鼠給藥后2、3 h痛域值均高于模型組，差異均有統計學意義（P＜0.05）；乳痛軟堅片中劑量組小鼠給藥后1 h痛域值高于模型組，差異有統計學意義（P＜0.05）。乳痛軟堅片高、中、低劑量組小鼠給藥后1h痛閾值低于羅通定組，差異有統計學意義（P＜0.01）；乳痛軟堅片高、中、低劑量組小鼠給藥后2、3 h痛閾值與羅通定組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。乳痛軟堅片高、中、低劑量組小鼠給藥后1、2 h痛閾值與乳核散結片組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；乳痛軟堅片高、中劑量組小鼠給藥后3 h痛閾值與乳核散結片組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；乳痛軟堅片低劑量組小鼠給藥后3 h痛閾值低于乳核散結片組，差異有統計學意義（P＜0.05）。廣義估計方程結果顯示，組間比較Waldχ2=14.383，P=0.013，表明不同組別之間痛閾值差異有統計學意義（P＜0.05）；時間比較，Waldχ2=5.432，P=0.066，表明不同時間點之間痛閾值比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；組別因素與時間因素存在交互效應（P＜0.05），表明各組痛閾值變化幅度不一致。（見表2～3）

表2 各組小鼠痛域值比較 （±s）

表2 各組小鼠痛域值比較 （±s）

注：與模型組比較，aP＜0.05，bP＜0.01；與羅通定組比較，cP＜0.01，與乳核散結片組比較，dP＜0.05。

組別 n 給藥劑量 1 h 2 h 3 h Waldχ2 P模型組 10 9.71±5.92 7.82±5.19 5.83±2.27 4.441 0.109羅通定組 10 46.80 mg/kg 16.96±7.86b 7.65±2.62a 7.59±2.63 14.170 0.001乳核散結片組 10 0.56 g/kg 9.58±6.82 10.79±6.97 10.59±6.31 1.997 0.369乳痛軟堅片高劑量組 10 3.76 g/kg 7.46±3.19bc 10.35±5.90a 13.00±6.90a 6.130 0.047乳痛軟堅片中劑量組 10 1.88 g/kg 10.04±3.50ac 6.38±1.80a 14.82±11.34a 14.587 0.001乳痛軟堅片低劑量組 10 0.94 g/kg 6.42±3.07ac 6.38±1.79 6.16±1.75d 0.364 0.834 Waldχ2 22.009 7.388 20.637 P 0.001 0.193 0.001

表3 小鼠痛域值廣義估計方程模型效應檢驗結果

3.3 大鼠肉芽腫實驗 乳痛軟堅片組高、中、低劑量組大鼠肉芽質量均低于模型組，差異均有統計學意義（P＜0.01或P＜0.05）；乳痛軟堅片組高、中、低劑量組大鼠肉芽質量與醋酸潑尼松組、乳核散結片組比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。乳痛軟堅片能抑制肉芽生長。（見表4）

表4 各組大鼠肉芽質量比較 （±s）

表4 各組大鼠肉芽質量比較 （±s）

注：與模型組比較，aP＜0.05，bP＜0.01。

組別 n 給藥劑量 肉芽質量/（mg/100 g）模型組 10 59.54±9.41醋酸潑尼松組 10 5.40 mg/kg 44.83±11.31b乳核散結片組 10 0.39 g/kg 51.52±15.01乳痛軟堅片高劑量組 10 2.60 g/kg 48.02±8.13b乳痛軟堅片中劑量組 10 1.30 g/kg 50.59±5.52a乳痛軟堅片低劑量組 10 0.65 g/kg 49.62±10.04a F 2.28 P 0.059

3.4 大鼠足腫脹實驗 乳痛軟堅片高劑量組大鼠在致炎后1、3、4 h足跖腫脹度均低于模型組，差異有統計學意義（P＜0.05）；乳痛軟堅片中劑量組大鼠在致炎后3、4 h足跖腫脹度均低于模型組，差異有統計學意義（P＜0.05）。乳痛軟堅片高、中劑量組大鼠在致炎后1、2、3、4、5、6 h足跖腫脹度與阿司匹林組比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；乳痛軟堅片低劑量組大鼠在致炎后1、2、4 h足跖腫脹度高于阿司匹林組，差異有統計學意義（P＜0.05）；乳痛軟堅片低劑量組大鼠在致炎后3、4、5、6 h足跖腫脹度與阿司匹林組比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。乳痛軟堅片高劑量組大鼠在致炎后1 h足跖腫脹度低于乳核散結片組，差異有統計學意義（P＜0.05）；乳痛軟堅片中、低劑量組大鼠在致炎后1 h足跖腫脹度與乳核散結片組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；乳痛軟堅片高、中、低劑量組大鼠在致炎后2 h足跖腫脹度與乳核散結片組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；乳痛軟堅片高、中劑量組大鼠在致炎后3 h足跖腫脹度低于乳核散結片組，差異有統計學意義（P＜0.05）；乳痛軟堅片低劑量組大鼠在致炎后3 h足跖腫脹度與乳核散結片組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；乳痛軟堅片高、中、低劑量組大鼠在致炎后4、5、6 h足跖腫脹度與乳核散結片組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。廣義估計方程結果顯示，組間比較Waldχ2=52.079，P=0.000，表明不同組別之間足腫脹度差異有統計學意義（P＜0.05）；時間比較，Waldχ2=59.600，P=0.000，表明不同時間點之間足腫脹度差異有統計學意義（P＜0.05）；組別因素與時間因素存在交互效應（P＞0.05），表明不同組別大鼠足腫脹度變化幅度不一致。（見表5～6）

表5 各組大鼠足腫脹度比較 （±s，mL）

表5 各組大鼠足腫脹度比較 （±s，mL）

注：與模型組比較，aP＜0.05，bP＜0.01；與阿司匹林組比較，cP＜0.05；與乳核散結片組比較，dP＜0.05。

組別 n 給藥劑量/(g/kg) 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h Waldχ2 P模型組 10 0.222±0.122 0.244±0.085 0.342±0.140 0.417±0.119 0.346±0.177 0.306±0.204 21.589 0.001阿司匹林組 10 0.27 0.095±0.075a 0.157±0.125 0.251±0.125 0.218±0.148b 0.172±0.141a 0.164±0.156 15.917 0.007乳核散結片 10 0.39 0.208±0.140 0.252±0.146 0.345±0.127 0.360±0.149a 0.317±0.179 0.298±0.218 9.348 0.096乳痛軟堅片高劑量組 10 2.60 0.099±0.110a d 0.178±0.100 0.216±0.121a d 0.257±0.127a 0.239±0.166 0.232±0.161 13.024 0.023乳痛軟堅片中劑量組 10 1.30 0.135±0.068 0.216±0.120 0.214±0.121a d 0.286±0.119a 0.231±0.210 0.227±0.232 16.296 0.006乳痛軟堅片低劑量組 10 0.65 0.196±0.141c 0.281±0.202c 0.329±0.210 0.380±0.263c 0.337±0.236 0.291±0.246 6.829 0.234 Waldχ2 15.549 7.199 12.523 17.517 9.578 5.175 P 0.008 0.206 0.028 0.004 0.088 0.395

表6 大鼠足腫脹度廣義估計方程模型效應檢驗結果

3.5 小鼠血清溶血素實驗 乳痛軟堅片高劑量組小鼠血清溶血素高于模型組，差異有統計學意義（P＜0.01）；乳痛軟堅片中、低劑量組小鼠血清溶血素與模型組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。乳痛軟堅片高、中、低劑量組小鼠溶血素與左旋咪唑組、乳核散結片組比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。（見表7）

表7 各組小鼠血清溶血素比較 （±s）

表7 各組小鼠血清溶血素比較 （±s）

注：與模型組比較，aP＜0.05，bP＜0.01。

組別 n 給藥劑量 溶血素/（光密度OD）模型組 10 0.764±0.342左旋咪唑組 10 22.75 mg/kg 1.234±0.350b乳核散結片組 10 0.56 g/kg 1.137±0.430a乳痛軟堅片高劑量組 10 3.76 g/kg 1.155±0.205b乳痛軟堅片中劑量組 10 1.88 g/kg 1.165±0.406乳痛軟堅片低劑量組 10 0.94 g/kg 0.940±0.327 F 2.57 P 0.037

3.6 碳粒廓清實驗 乳痛軟堅片高、中、低劑量組小鼠廓清指數、吞噬指數均高于模型組，差異均有統計學意義（P＜0.01或P＜0.05）。乳痛軟堅片高、中、低劑量組小鼠廓清指數、吞噬指數均低于左旋咪唑組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。乳痛軟堅片高、低劑量組小鼠廓清指數與乳核散結片組比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；乳痛軟堅片中劑量組小鼠廓清指數高于乳核散結片組，差異有統計學意義（P＜0.05）；乳痛軟堅片高、中、低劑量組小鼠吞噬指數與乳核散結片組比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。（見表8）

表8 各組小鼠廓清指數、吞噬指數比較 （±s）

表8 各組小鼠廓清指數、吞噬指數比較 （±s）

注：與模型組比較，aP＜0.05，bP＜0.01；與左旋咪唑組比較，cP＜0.05；與乳核散結片組比較，dP＜0.05。

組別 n 給藥劑量 廓清指數/（×10-2）吞噬指數模型組 10 1.90±0.84 3.14±1.00左旋咪唑組 10 22.75 mg/kg 5.43±1.22b 5.15±0.99b乳核散結片組 10 0.56 g/kg 2.73±0.52a 3.91±0.72a乳痛軟堅片高劑量組 10 3.76 g/kg 3.27±0.90b c 4.08±0.78a c乳痛軟堅片中劑量組 10 1.88 g/kg 3.06±0.79b c d 4.20±0.61a c乳痛軟堅片低劑量組 10 0.94 g/kg 2.74±0.86b c 4.13±0.93a c F 18.419 5.72 P 0.000 0.000

4 討 論

目前，乳腺增生治療主要以口服激素類藥物或碘制劑為主。此外，手術也可治療乳腺增生。但上述治療存在不良反應、依賴性、易復發、損傷大等問題，給患者造成較大的困擾。中醫藥療法以活血化瘀、疏肝理氣、調和沖任為主要治法，可以標本兼治，且療效確切。中藥治療乳腺增生以中藥內服為主，該類方劑大多數以柴胡、當歸等藥物為主要組成，如柴胡舒肝散、柴青消痛顆粒等[11]。除此之外，中藥穴位貼敷、針灸、推拿、膏藥外貼等中醫外治法也可運用于乳腺增生治療，具有較好的治療效果[12-13]。

乳痛軟堅片基本組成藥物為柴胡、陳皮、川楝子、延胡索、當歸、白芍、莪術、川貝母、黨參、甘草等。方中柴胡解表退熱，疏肝解郁；陳皮理氣健脾，燥濕化痰；川楝子行氣止痛；延胡索活血，行氣，止痛；當歸補血調經，活血止痛；白芍養血斂陰，柔肝止痛，平抑肝陽；莪術破血行氣，消積止痛；川貝母清熱化痰，散結消癰；黨參補脾肺之氣，補血生津；甘草補脾益氣，緩急止痛，清熱解毒，調和藥性。全方配伍，共奏疏肝解郁、化痰散結、活血止痛之功。延胡索主要有效成分延胡索乙素具有明顯止痛作用。川楝子醇提物具有明顯的抗炎鎮痛作用[14]。莪術的主要單體成分為姜黃素、莪術醇、β-欖香烯等，其中姜黃素具有抗炎、抗腫瘤作用，莪術醇、β-欖香烯具有抗腫瘤活性[15]。川貝母中的生物堿類成分具有良好的抗炎作用[16]。其作用機制是通過抑制炎癥反應信號通路中MAPKs的磷酸化活性從而使炎癥介質水平下降，并且使核轉錄因子NF-κB轉錄強度降低[17-18]。川貝母中的貝母素甲能阻斷Nav1.7靶點以及其他鈉離子通道以達到鎮痛效果[19-20]。柴胡主要活性成分為揮發油類、柴胡皂苷類、黃酮類、香豆素類等，具有調節免疫、抗炎、退熱、保肝、抗腫瘤等多種作用[21]。當歸中富含苯酞類、有機酸、酯類、多糖等多種化學成分，具有抗炎、鎮痛、調節免疫、抗腫瘤、治療心血管疾病、神經保護和抗氧化等作用[22-23]。白芍主要成分白芍總苷可通過多種途徑抑制自身免疫反應并雙向調節免疫功能，維持機體免疫耐受[24-25]。陳皮中的黃酮類、揮發油類等成分均具有抑菌消炎的作用[26]。黨參中的黨參多糖（CPP）可以增強環磷酰胺所導致免疫功能低下大鼠的免疫功能[27]。甘草總黃酮能下調一氧化氮合酶（iNOS）、環氧化酶2（COX-2）表達，降低細胞外調節蛋白激酶（ERK）的磷酸化水平，調控RK/MAPK和PPAR-γ從而達到抗炎的功效[28]。甘草多糖具有增強免疫的作用，能促使T淋巴細胞的激活，從而增強免疫活性[29]。

本研究中鎮痛實驗顯示乳痛軟堅片可減少小鼠的扭體次數，延長潛伏期和增加小鼠痛閾值，表明乳痛軟堅片具有明顯的鎮痛作用?？寡讋游飳嶒烇@示，乳痛軟堅片能顯著抑制大鼠肉芽腫的生長，降低大鼠足腫脹度，具有抗炎及抑制炎癥組織增生的作用。調節免疫藥理實驗顯示，乳痛軟堅片能升高小鼠血清溶血素水平、廓清指數和吞噬指數，表現出良好調節免疫作用。

綜上所述，乳痛軟堅片具有鎮痛、抗炎和調節免疫的作用，可為其臨床防治乳腺增生提供實驗依據。