外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α對初治活動性肺結核老年患者化療療效的評估價值*

劉 會,高江彥,霍 琳,張曉光,張會曉,張 煥,付洪義,王顯雷,安賀娟,王 勇,劉 銳,陳素麗,李衛紅

河北省胸科醫院:1.感染性疾病科;2.腫瘤科;3.全質辦;4.醫務處;5.結核科,河北石家莊 050041

肺結核是較為常見的慢性傳染病,主要是由結核分枝桿菌侵襲機體所致,而我國是肺結核高負擔國家之一,該病可引起多種并發癥,嚴重威脅患者身心健康[1]。多數患者感染后無明顯臨床癥狀或處于潛伏期,但部分患者感染結核分枝桿菌后可發展為活動性肺結核,處于高齡的患者往往伴有身體器官功能衰退,若延誤治療時機,可影響預后[2-3]。故早期診斷肺結核是降低病死率、改善預后的關鍵。機體免疫系統在肺結核發生、發展中扮演著重要角色,免疫功能紊亂是誘發該病的重要機制[4],有研究報道,血清可溶性白細胞介素2受體(sIL-2R)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、CD4+淋巴細胞百分比/CD8+淋巴細胞百分比比值(下稱CD4+/CD8+)水平變化與肺結核疾病進展有關,而且與患者病情程度、預后關系密切[5-7],但關于其聯合檢測用于初治活動性肺結核老年患者化療療效的評估鮮有報道。故本研究擬探討CD4+/CD8+、sIL-2R、TNF-α對初治活動性肺結核老年患者化療療效的評估價值,旨在為臨床工作提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2019年12月至2022年12月本院收治102例初治活動性肺結核老年患者納入研究作為觀察組,其中女43例、男59例,年齡60～79歲、平均(69.71±3.11)歲,體重指數19.2～28.3 kg/m2、平均(22.69±1.89)kg/m2,45例有吸煙史,51例有飲酒史。納入標準:符合《中國結核病病理學診斷專家共識》診斷標準[8],痰涂片細菌培養結果呈陽性,經胸片發現陽性病灶;年齡≥60歲;為初治活動性肺結核患者;無肺結核治療史。排除標準:有其他呼吸系統疾病;有其他免疫性疾病;有惡性腫瘤;處于結核潛伏期;心、肝、腎有器質性病變;有其他傳染性疾病;近3個月內接受過激素和免疫調節劑治療;有活動性出血;有精神疾病或意識障礙。另選取年齡≥60歲的102例同期于本院體檢的健康者作為對照組,其中女47例、男55例,年齡61～76歲,平均(68.92±2.56)歲,體重指數18.9～27.5 kg/m2、平均(22.47±1.68)kg/m2,40例有吸煙史,49例有飲酒史。兩組一般資料比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。納入研究者均對本研究知情同意并簽署知情同意書。本研究經本院醫學倫理委員會批準。

1.2方法

1.2.1治療方法 采用2HRZE/4HR抗結核方案治療,異煙肼片(西南藥業股份有限公司,國藥準字H50020124,0.1 g)口服,0.3 g/d;乙胺丁醇膠囊(金陵藥業股份有限公司南京金陵制藥廠,國藥準字H32021640,0.25 g)口服,0.75 g/d;吡嗪酰胺片(成都錦華藥業有限責任公司,國藥準字H51020877,0.25 g)口服,0.75 g/d;利福平(成都通德藥業有限公司,國藥準字H51021244,0.15 g)0.45 g/d;持續治療6個月。

1.2.2療效評價及分組 治療1個月、治療6個月評估臨床療效[9],顯效:空洞愈合明顯,X線顯示病灶吸收明顯,痰液細菌培養轉陰;有效:X線檢查顯示病灶吸收良好,痰液細菌培養轉陰;無效:X線檢查顯示病灶無變化甚至擴大,痰液細菌培養為陽性。根據治療6個月的療效,將患者分為顯效組、有效組和無效組。

1.2.3sIL-2R、TNF-α、CD4+/CD8+的檢測 收集觀察組治療前、治療1個月、治療6個月及對照組體檢當天空腹靜脈血,以3 000 r/min離心5 min,使用雙抗體夾心法檢測sIL-2R、TNF-α水平,sIL-2R試劑盒(YS02240P)、TNF-α試劑盒(YS-T10122)購自上海雅吉生物科技有限公司。用抗凝管取靜脈血,使用美國BD公司FACCalibure型流式細胞儀檢測CD4+、CD8+淋巴細胞百分比并計算CD4+/CD8+,CD4抗體(ab133616)、CD8抗體(ab217344)購自英國Abcam公司。

1.3觀察指標 (1)比較兩組sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平。(2)分析觀察組sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α間的相關性。(3)比較觀察組治療前、治療1個月、治療6個月時不同療效患者sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平。(4)分析sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平與療效的相關性。(5)分析治療1個月、6個月時,外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α單項及聯合檢測對老年患者化療療效評估的價值。

2 結 果

2.1觀察組治療前與對照組sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平比較 觀察組治療前外周血sIL-2R、TNF-α水平高于對照組,CD4+/CD8+低于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 觀察組治療前與對照組sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平比較

2.2sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α間的相關性 初治活動性肺結核老年患者外周血sIL-2R、TNF-α與CD4+/CD8+均呈負相關(r=-0.806、-0.723,P<0.05),sIL-2R與TNF-α呈正相關(r=0.701,P<0.05)。見圖1。

圖1 sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α間的相關性分析

2.3不同療效患者sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平比較 不同療效患者治療前外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平比較,差異無統計學意義(P>0.05)。相較于治療前,治療1個月、治療6個月顯效、有效組外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平均明顯改善(P<0.05),無效組外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平無明顯變化(P>0.05)。治療1個月、6個月時,顯效、有效組外周血sIL-2R、TNF-α水平均低于無效患者,CD4+/CD8+均高于無效患者,差異均有統計學意義(P<0.05);顯效組外周血sIL-2R、TNF-α水平低于有效組,CD4+/CD8+高于有效組(P<0.05)。見表2。

表2 不同療效患者sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平

2.4sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平與療效的相關性 Spearman相關性分析 治療1個月和6個月時,初治活動性肺結核老年患者外周血sIL-2R、TNF-α水平均與療效呈負相關(P<0.05),而CD4+/CD8+與療效呈正相關(P<0.05),見圖2。

2.5sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α對初治活動性肺結核老年患者化療療效的評估價值 選取治療1個月、6個月外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α作為ROC曲線源數據,將顯效與有效患者作為陽性,無效患者作為陰性,繪制治療1個月、6個月時外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α評估療效的ROC曲線,治療6個月時外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α用于評估療效的曲線下面積(AUC)均高于治療1個月(P<0.05)。進一步分析顯示,治療1個月、6個月時外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α聯合用于評估療效的AUC分別為0.880、0.932,明顯大于各時間點單項指標用于評估的AUC(P<0.05),而且治療6個月時外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α聯合評估的AUC高于治療1個月時(P<0.05),見圖3、表4。

注:左圖為治療1個月時的指標用于評估;右圖為治療6個月時的指標用于評估。

表4 sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α對初治活動性肺結核老年患者化療療效的評估價值

3 討 論

結核病的免疫反應較為復雜,在結核病發生、發展過程中發揮著重要作用[10]。結核分枝桿菌感染機體后可產生有菌免疫應答,首先經巨噬細胞吞噬,而巨噬細胞、單核細胞可聚集在病灶周圍,以增強免疫細胞功能殺滅結核分枝桿菌,但同時激活的淋巴細胞易發生變態反應,刺激細胞釋放多種細胞因子,導致炎癥反應加劇,加重疾病進展[11-13]?？梢?免疫激活、炎癥反應在機體抵抗結核分枝桿菌感染過程中至關重要,故檢測有關細胞因子水平有助于了解患者病情和評估療效[14]。

本研究結果顯示,細胞因子之間存在相互影響,在肺結核免疫學發病機制中具有重要作用。T淋巴細胞和巨噬細胞被結核分枝桿菌激活后,活化的T淋巴細胞和巨噬細胞可釋放TNF-α、多種白細胞介素,而這些因子聚集后又可激活其他炎癥細胞,造成細胞因子相互作用級聯反應,可協同促進疾病進展[15]。白細胞介素-2(IL-2)由T淋巴細胞分泌。在多種細胞表面有可與IL-2結合的IL-2R,主要有sIL-2R、膜結合型IL-2R(mIL-2R)兩種受體,而sIL-2R是由免疫活性細胞膜上的mIL-2R脫落進入液體形成,可與mIL-2R并結合IL-2,以延長IL-2在血液中的半衰期,進而參與T淋巴細胞免疫應答過程[16-17]。但也有研究認為,sIL-2R還可與T淋巴細胞周圍IL-2結合,造成其生理活性喪失,可加速細胞凋亡、抑制機體免疫反應,導致輔助性T細胞(Th)1/Th2平衡失調,造成機體防御感染能力降低[18]。TNF-α主要由活化單核巨噬細胞分泌,也可由T淋巴細胞分泌,能促進巨噬細胞活化和炎癥細胞聚集,低水平TNF-α可調節機體免疫反應以達到抗感染效果,高水平TNF-α可刺激其他細胞因子分泌,誘導體內炎癥反應[19]。有研究顯示,活動性肺結核患者支氣管肺泡灌洗液中sIL-2R、TNF-α水平增高且與患者活動度、空洞形成密切相關[20]。本研究結果發現,觀察組sIL-2R、TNF-α水平高于對照組且患者sIL-2R與TNF-α水平呈正相關,這與劉曦等[20]的研究結果相似,提示高水平sIL-2R、TNF-α可參與初治活動性肺結核老年患者疾病進展。分析原因:結核分枝桿菌侵襲機體后,導致肺組織損傷,可激活T淋巴細胞和巨噬細胞,促進sIL-2R、TNF-α分泌進入患者血液中,加重疾病發展。CD4+T淋巴細胞百分比通?？梢宰鳛榉从硻C體免疫力的指標,一般情況下,其數值越大表示免疫力越好,當機體免疫系統被破壞后,CD4+T淋巴細胞百分比會降低。CD8+與CD4+T淋巴細胞具有協同作用,可誘導細胞凋亡或殺傷結核分枝桿菌[21]。本研究結果顯示,觀察組CD4+/CD8+低于對照組,sIL-2R、TNF-α與CD4+/CD8+呈負相關。由于老年患者免疫功能低下,結核分枝桿菌入侵機體后可進一步降低患者免疫功能,導致CD4+/CD8+降低,機體對病原菌殺傷能力減弱,導致炎癥反應過度激活,誘導肺組織損傷加重。

2HRZE/4HR是治療肺結核一線化療方案,該方案可有效殺滅結核分枝桿菌,破壞病原菌細胞壁,以達到抗菌目的[22],該方案治療肺結核療效明顯,可減輕患者病情[23-24]。本研究中的患者治療1個月、治療6個月后,顯效患者sIL-2R、TNF-α水平低于有效患者,后者低于無效患者;顯效患者CD4+/CD8+高于有效患者,后者高于無效患者。相關性分析顯示,sIL-2R、TNF-α、CD4+/CD8+與患者療效密切相關,說明老年患者經治療后可消滅部分病原菌,抑制炎癥反應過度激活釋放sIL-2R、TNF-α,提升機體免疫功能,提高CD4+/CD8+,有助于提高臨床療效。ROC曲線分析顯示,治療1個月、6個月時sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α聯合評估的AUC明顯較各時間點單項指標大,而且治療6個月時各指標聯合評估的AUC大于治療1個月時,表明sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α聯合評估老年患者化療療效具有一定價值。

綜上所述,初治活動性肺結核老年患者sIL-2R、TNF-α呈高水平,CD4+/CD8+較低,這3項指標與療效密切相關,以上指標聯合檢測用于評估患者化療療效具有一定參考價值。