等離子體活化水噴淋及浸泡處理的生菜采后品質變化分析

鄧子安，吳清燕，江風,2，鄭丹丹,2，李江闊，牟文良，吳迪,2*，孫崇德，陳昆松

（1.浙江大學農業與生物技術學院，浙江杭州 310058）

（2.浙江大學中原研究院，河南鄭州 450000）

（3.國家農產品保鮮工程技術研究中心（天津），農業農村部農產品貯藏保鮮重點實驗室，天津市農產品采后生理與貯藏保鮮重點實驗室，天津 300384）

（4.山東奧維特生物科技有限公司，山東濟南 251400）

（5.山東營養源食品科技有限公司，山東濟南 251400）

生菜（Lactuca sativavar.ramosaHort.），又名萵仔菜，屬菊科萵苣屬，常切割后單獨或混合其他蔬菜進行即食，并因其柔嫩爽脆的口感，以及富含酚類化合物、維生素、無機鹽和天冬堿等營養物質，在國內外擁有巨大的銷售市場。但生菜存在含水量高、葉面積大、組織脆弱、易遭受機械傷等問題，在貯藏過程中容易遭受微生物侵染，造成品質劣變和腐敗損耗；同時生菜作為即食蔬菜，其表面的食源性病原微生物過多容易造成食源性疾病。因此，減少生菜采后貯藏期間表面的微生物數量對保證生菜優質供給和食品安全十分重要。

等離子體活化水（Plasma Activated Water，PAW）主要由低溫等離子體與水面接觸或直接引入水中獲得，被認為是一種綠色環保的果蔬殺菌技術。已有研究表明，PAW 處理可以有效減少番茄[1]、蘋果[2]、圣女果[3]、草莓[4]、菠蘿[5]等果蔬表面的微生物。然而上述研究主要采用浸泡方式進行PAW 處理，目前較少有研究關注PAW 噴淋處理對降低果蔬表面菌落總數和品質代謝等指標的影響，也缺少噴淋和浸泡兩種PAW 處理方式對于果蔬保鮮的對比分析研究。

PAW 殺菌處理過程中的氧化作用可能會引起果蔬代謝功能發生變化。代謝組學作為探究果蔬品質形成機理的重要研究手段，可通過定量或定性方式分析生物體內小分子代謝物的變化規律，揭示果蔬受到外源刺激前后的生理變化及品質形成機理[6]。除了對代謝物質進行分析，代謝組學技術還可揭示外源刺激引起的果蔬采后初生及次生代謝途徑[7]。

本研究以生菜為實驗材料，以貯藏期間表面菌落總數、失重率、顏色、葉綠素等為評價指標，研究PAW 噴淋和浸泡處理對生菜采后貯藏保鮮的影響；同時開展PAW 處理后生菜代謝組多變量分析和代謝途徑分析，探究兩種處理方式引起的生菜差異代謝物變化規律及其發生的主要代謝途徑。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

新鮮生菜：購于某市某超市，挑選大小一致、無病蟲害的生菜若干，于0.5 h 內運送至本實驗室。

PCA 培養基，浙江格陵設備科技有限公司；氯化鈉，浙江同力信息科技有限公司；PDA 培養基，浙江格陵設備科技有限公司；乙醇，國藥集團化學試劑公司。

1.2 儀器與設備

CTE-2000KW 低溫等離子試驗電源，南京蘇曼等離子科技有限公司；低溫等離子體活化水處理反應器，南京蘇曼等離子科技有限公司；色差儀，上海信聯創作電子有限公司；搖床，華立達公司；超凈工作臺，蘇凈集團蘇州安泰空氣技術有限公司。PAW 噴淋處理采用浙江大學自主研發的果蔬等離體子體活化水傳送式噴淋殺菌裝置[8]，主要包括支撐腿、放置架、工作臺、萬向輪、噴淋架和傳動裝置等部件。

1.3 方法

1.3.1 實驗設計

實驗共設置了5 個處理組，包括：PAW 噴淋處理組（PAW-S-15）、PAW 浸泡處理組（PAW-B-15）、清水噴淋處理組（W-S-15）、清水浸泡處理組（W-B-15）以及對照組（不進行PAW 或清水處理）。通過預實驗比較了PAW 噴淋和浸泡不同時間后生菜菌落總數，發現均為處理15 min 后的殺菌效果最好。因此，正式實驗中的PAW 噴淋和PAW 浸泡處理組的處理時間均設定為15 min，同時清水噴淋和清水浸泡處理組的處理時間也設定為15 min。為了能夠保證實驗中使用的PAW 的活性一致，本實驗中使用的PAW 都是實時制備并使用。

1.3.2 PAW制備與生菜處理

在室溫下采用低溫等離子體活化水處理反應器制備PAW，水處理量為30 L/h，制備時間為1.5 h，電流強度為6 A。CTE-2000KW 低溫等離子試驗電源的輸出電壓為25 kV，功率為1 500 W。制備所得的等離子體活化水的各項指標如圖1 所示，較純水而言，其pH 值顯著降低，電導率、氧化還原電位、過氧化氫含量以及亞硝酸含量都顯著升高，表明等離子體活化水中富含H2O2、NO2-、O3等活性物質，有利于殺滅微生物。

圖1 制備所得的等離子體活化水的pH 值、電導率、氧化還原電位、過氧化氫含量以及亞硝酸含量Fig.1 pH value, conductivity, redox potential, hydrogen peroxide content, and nitrous acid content of the prepared plasma-activated water

浸泡處理時，將整顆生菜沒入PAW 或清水中處理15 min，不進行攪拌處理。噴淋處理時，將整顆生菜置于果蔬等離體子體活化水傳送式噴淋殺菌裝置中，從上往下噴淋PAW 或清水15 min；處理完的生菜瀝干水分自然晾干。生菜處理時所用的等離子體活化水都為即時制備。

1.3.3 CFU計數法

將PAW 處理完畢的生菜切成4 cm×4 cm 的形狀，?。?±1）g 置于63 mL、質量分數為0.85%的氯化鈉溶液中，配成質量比為1:10（g/mL）的生菜與氯化鈉溶液，置于搖床上充分搖晃。取100 μL 原液，分別用無菌蒸餾水稀釋10、100、1 000 倍，共3 個梯度。吸取各稀釋液100 μL，于無菌PCA培養基上涂布均勻，等待培養基上無水滴后置于37 ℃恒溫培養箱內，培養48 h 后進行平板菌落計數，計算菌落總數。

1.3.4 品質測定

對各處理組的生菜樣品在貯藏（4 ℃，90%RH）0、5、10、15 d[9,10]后的品質進行測定。

失重率測定：采用課題組已建的稱量法進行測定[11]。按照以下公式計算：

式中：

D——失重率，%；

m前——儲藏前質量，g；

m后——儲藏后質量，g。

顏色測定：用色差儀進行測定。每株生菜測定3 片葉子相同位置處，每組3 個重復，每個重復3株生菜，記錄L*、a*、b*值。

葉綠素測定[12]：稱量0.1 g 冷凍材料，用4 mL體積分數80%丙酮冰浴下浸提30 min，4 000 r/min 離心10 min，取上清液，重復1 次，定容10 mL 刻度試管。最后用分光光度計，分別在波長644、662 nm處檢測吸光值。然后按照以下公式進行計算：

式中：

Ca——葉綠素a 含量，mg/g Fw；

Cb——葉綠素b 含量，mg/g Fw。

最后再用質量濃度計算生菜的葉綠素含量。

1.3.5 代謝組分析

在貯藏第5 天獲取對照組、PAW 噴淋處理組和PAW 浸泡處理組等的生菜冷凍材料（粉末）各100 mg，并在4 ℃下用0.6 mL，質量分數為70%的甲醇水溶液萃取過夜，然后將樣品以10 000×g離心10 min，提取液被吸收，用微孔膜（0.22 μm poresize）過濾樣品，最后進行超高效液相色譜串聯質譜（Ultra Performance Liquid Chromatography/Tandem Mass Spectrometry，UPLC-MS/MS）分析。

1.3.6 代謝組定性

除去同位素信號后，根據二級譜信息再自建邁維代謝數據庫（Metware Daetabase，MWDB）的基礎上進行物質定性，含K+、Na+、NH4+以及更大分子量物質的重復信號。

1.3.7 主成分分析

主成分分析（Principal Component Analysis，PCA）通過R 軟件（www.r-project.org/）的prcomp 函數進行計算。計算前設置參數scale=True，對代謝物含量數據進行歸一化處理。

1.3.8 聚類分析

代謝物原始數據數據歸一化處理后，通過R 軟件的Pheatmap 功能包繪制熱圖，對代謝物在不同樣本間的積累模式進行層級聚類分析（Hierarchical Cluster Analysis，HCA）。

1.3.9 正交偏最小二乘判別分析

將代謝物原始數據數據進行log2 轉換并進行中心化處理后，利用R 軟件的MetaboAnalystR 包的OPLSR.Anal 函數進行正交偏最小二乘判別分析（Orthogonal Partial Least Squares-Discriminant Analysis，OPLS-DA）計算，用于尋找差異代謝物。

1.3.10 差異代謝物篩選

在OPLS-DA 分析的基礎上，基于獲得的變量重要性投影（Variable Importance in Projection，VIP）對差異代謝物進行初步篩選，然后結合單變量分析的P-value 或差異倍數值（Fold Change，FC）開展二次篩選。篩選標準如下：（1）初步篩選：選取實驗組和對照組中FC ≥2 和FC ≤0.5的代謝物；（2）二次篩選：進一步選取VIP ≥1的代謝物。

1.3.11 差異代謝物京都基因與基因組百科全書分類和代謝物富集分析

根據差異代謝物結果完成京都基因與基因組百科全書分類（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）和代謝物富集分析。首先進行差異代謝物注釋以及基于KEGG 通路類型的分類，然后基于差異代謝物進行KEGG 通路富集，其中富集因子（Rich Factor）越大表示富集程度越高。

1.3.12 數據分析

使用SPSS v19.0 統計軟件對菌落總數、失重率、顏色、葉綠素等試驗數據進行單因素方差分析，并進行Duncan 檢驗。使用Origin v.9.0 軟件進行繪圖。所有試驗設3 組平行。

2 結果與討論

2.1 貯藏期間微生物分析

菌落總數是反應生菜腐敗變質發生概率的核心評價指標之一[13]。PAW 滅殺微生物的機制主要是通過等離子氣體在水中生成H2O2、NO2-、O3等活性物質，以及增加液體的氧化還原電位和電導率、降低pH 值等方式，使細胞產生氧化應激，從而破壞細菌的細胞膜結構，例如氧化細胞壁脂質雙層中的不飽和脂肪酸、裂解肽鍵和氧化氨基酸側鏈，以造成菌體DNA、蛋白質的氧化損傷，最終實現對樣品表面微生物的物理滅活[14]。已有研究表明，PAW 對包括真菌、細菌、孢子、病毒以及細菌生物膜在內的多種微生物均具有良好的抗菌活性[15]。本研究采用CFU 法測定了PAW 及清水處理后第0、5、10、15 天時生菜表面的菌落總數，結果如圖2所示。PAW 浸泡處理后（第0 天）的菌落總數最低，為3.08 lg CFU/g；其次是PAW噴淋處理后（第0天）的菌落總數為4.36 lg CFU/g；而對照組（第0 天）的菌落總數為5.90 lg CFU/g ；PAW 浸泡和噴淋處理和對照組相比均能顯著降低生菜表面菌落總數（分別下降2.82 和1.54 lg CFU/g，P＜0.05），下降趨勢與已有研究結果相似[4]。在整個貯藏期間，PAW 噴淋和浸泡處理的菌落總數均始終低于對照組，而清水浸泡和噴淋處理與對照組相比無顯著差異（P＞0.05）。兩種PAW 處理的殺菌效果存在差異的原因是兩者處理時PAW 中的活性物質與生菜表面微生物的作用方式不同，導致對微生物細胞膜造成不同程度的破壞，最終表現出不同的滅活效果。

圖2 貯藏期間生菜的菌落總數變化Fig.2 Changes in microbial loads on lettuce during storage

2.2 失重率分析

失重率可以反映生菜水分的散失狀況[16]。如圖3 所示，所有處理組的失重率均隨貯藏時間增加而上升。對于浸泡處理，PAW 浸泡處理組的失重率上升速率較清水浸泡處理組快，在第15 天時已高出15%，這可能是因為PAW 浸泡較清水浸泡處理更容易造成生菜細胞結構的破壞，水分更容易從內部遷移至創口而被蒸發[17]；而對比PAW 噴淋處理組和清水噴淋處理組，兩者的失重率在貯藏期間均無顯著差異（P＞0.05），這說明PAW 噴淋處理對生菜細胞的破壞較小。此外，PAW 浸泡處理的失重率比噴淋處理的失重率大，這可能是由于前者與生菜的接觸更充分，對細胞結構的破壞程度也更大；而清水浸泡的失重率比清水噴灑的失重率小，推測主要是因為清水不會對細胞造成破壞，且在浸泡過程中生菜與水分充分接觸，使水分子能夠在細胞中更好地保存。

圖3 貯藏期間生菜的失重率變化Fig.3 Changes in weight loss rate of lettuce during storage

2.3 顏色分析

顏色是重要的外觀品質指標[18]。由圖4 可知，兩類PAW 處理后生菜的L*值在貯藏期間大多數情況下顯著高于清水處理組和對照組，推測是由于PAW 水中的多種活性物質能夠鈍化生菜的多酚氧化酶[19]，但本研究中的L*值在不同處理組之間的數值差距不大。李海藍等[17]也發現PAW 處理后可顯著提高鮮切青椒的亮度（P＜0.05）。對于a*和b*數值，貯藏后期（10 和15 d）的不同處理組之間不存在明顯差異；而對于PAW 處理后（0 d）和貯藏前期（5 d）的生菜，PAW 浸泡處理組與CK 組的a*和b*數值相似，兩個清水處理組和PAW 噴淋處理組的a*和b*數值則低于PAW 浸泡處理組與CK 組，但不同處理組之間的數值差距不大，馬曉艷等[20]的研究結果也顯示PAW 處理后黃花菜的a*值與對照組相比數值差距不大。上述結果表明，PAW 處理不會對生菜色澤產生明顯影響，可以維持較好的外觀品質。

圖4 貯藏期間生菜的顏色變化Fig.4 Changes in color of lettuce during storage

2.4 葉綠素分析

葉綠素是生菜的主要呈色物質，是評判生菜品質的關鍵指標之一[21]。為了研究PAW 處理對生菜葉綠素的影響，我們采用了分光光度計法對其進行了測定。圖5 表明，清水浸泡處理能夠較好維持貯藏期間生菜的葉綠素含量，而其他處理組的葉綠素含量均隨貯藏時間增加而下降，其中PAW 浸泡處理組的葉綠素含量在貯藏末期顯著降低（P＜0.05），這可能是由于PAW 浸泡處理時生菜與大量活性氧和活性氮的接觸面積增加，在一定程度上促進了色素氧化，加快了葉綠素降解[22]。與不同處理組在貯藏后期的顏色不存在明顯差異不同，不同處理組在貯藏后期的葉綠素含量存在一定的差異，這可能是由于葉綠素變化主要是因為葉綠素a 含量改變所引起的，從而不一定會影響樣本顏色[23,24]。

圖5 貯藏期間生菜的葉綠素含量變化Fig.5 Changes in chlorophyll content of lettuce during storage

2.5 代謝組分析

2.5.1 樣本質控分析

對不同混樣質控樣本（Quality Control，QC）質譜檢測分析的總離子流圖（Total Ions Current，TIC）進行疊加后的結果如圖6 所示。代謝物檢測總離子流曲線具有高度重疊性，即峰強度和保留時間一致，表明在不同時間檢測同一樣品時，質譜的信號穩定，測定數據具有可靠性和重復性。

圖6 QC 樣本質譜檢測TIC 重疊圖Fig.6 Overlapping total ion current (TIC) chromatographs of QC samples

2.5.2 代謝物的多變量分析

對代謝組數據進行PCA 計算，結果如圖7 所示。PC1 和PC2 貢獻率分別為25.64%和19.05%。PAW 噴淋處理組、PAW 浸泡處理組和質量控制（QC）之間的樣本可以分開，表明兩個PAW 處理組具有不同的代謝物特征。同時，PAW-S-15 組、PAW-B-15 組和QC 的組內樣本聚在一起，表明實驗結果具有較好的重復性和可靠性。

圖7 PCA 得分圖Fig.7 PCA score plot of PC1 versus PC2

對每種代謝物峰面積進行l g 轉換，并進行HCA 計算，分別研究對照組與PAW 噴淋處理組和PAW 浸泡處理組的差異代謝物。圖8 顯示，對照組中含量較高的代謝物主要集中在圖的中部和上部，而PAW 噴淋處理組和PAW 浸泡處理組中含量較高的代謝物分別集中在中下部和中上部。PCA 和HCA 結果表明3 個處理組的代謝產物譜之間存在差異。

圖8 HCA 分析Fig.8 Hierarchical clustering analysis

2.5.3 代謝物OPLS-DA結果

通過OPLS-DA 模型對各處理組中樣品的代謝物含量進行了比較。圖9 分別顯示了對照組與PAW 浸泡處理組間的差異（R2X=0.61，R2Y=0.99，Q2=0.71），對照組與PAW-S-15 組間的差異（R2X=0.51，R2Y=0.99，Q2=0.80）， 以及PAW 浸泡處理組與PAW 噴淋處理組間的差異（R2X=0.57，R2Y=0.99，Q2=0.85）。所有比較組的Q2都高于0.7，說明所構建的模型合適且穩定。

圖9 OPLS-DA 模型Q2 值Fig.9 Q2 value of OPLS-DA model

2.5.4 差異代謝物篩選

為了分析PAW 浸泡和噴淋處理對生菜代謝的影響，選擇PAW 噴淋和浸泡處理后貯藏第5 天的生菜進行廣泛靶向目標代謝組學分析，結果如圖10 所示。在PAW 噴淋和浸泡處理組中分別檢測到713 種和702 種代謝產物。選取實驗組和對照組中FC≥2 和FC≤0.5 的代謝物，并進一步選取VIP≥1 的代謝物，發現PAW 噴淋處理組與對照組相比共有34 種差異代謝物，包括黃酮、脂質、酚酸類等，其中17 種代謝物上調，17 種代謝物下調；PAW 浸泡處理組與對照組相比共有45 種差異代謝物，包括核苷酸及其衍生物、黃酮、脂質等，其中35 種代謝物上調，10 種代謝物下調。兩種處理方式對生菜代謝產生不同效果可能是因為不同的處理方式會引起生菜出現不同程度的氧化應激，最終激活出不同次生代謝產物的合成。

圖10 生菜差異代謝火山圖Fig.10 Differential metabolism volcano map of lettuce

進一步根據VIP ≥1 且差異倍數變化≥2.0（↑↑上調）或差異倍數變化≥1.5（↑增加）以及VIP≥1 且差異倍數變化≤0.5（↓↓下調）或差異倍數變化≤0.7（↓降低）的原則對上調和下調的代謝物進行篩選，結果如表1 所示。

表1 兩種PAW處理后生菜共有的差異代謝物主要變化趨勢Table 1 Major trends of the shared differential metabolites in lettuce after two PAW treatments

在上調趨勢中，共有2 種上調形式。第1 種是PAW 噴淋和浸泡處理組較對照組均上調，包括脂質的游離脂肪酸、甘油酯和屬于黃酮的黃酮醇，說明不論是用噴淋還是浸泡處理，這些代謝物含量均會上調。第2 種是代謝物含量的上調形式與PAW處理方式有關，即PAW 噴淋處理組的代謝物含量高于對照組，而PAW 浸泡處理組的代謝物含量又高于PAW 噴淋處理組，如屬于脂質的棕櫚酸、石榴酸（9Z,11E,13Z-十八碳三烯酸）、9,10,11-三羥基-12-十八碳烯酸等，屬于生物堿的油酰單乙醇胺、咖啡酰膽堿-5-O-葡萄糖苷、咖啡酰膽堿-4-O-葡萄糖苷*，屬于酚酸類的2,6-二叔丁基苯酚、反式-5-O-對香豆酰莽草酸，有機酸里的磷酸烯醇式丙酮酸以及一些其它類酚類物質。

在下調趨勢中，共有2 種下調形式。第1 種是PAW 噴淋和浸泡處理組較對照組均下調，包括屬于脂質的十七烷酸、黃酮里的槲皮素-3-O-半乳糖苷（金絲桃苷）、其它類的4′-O-葡萄糖基-5-O-甲基阿米醇。第2 種是PAW 噴淋處理組的代謝物含量低于對照組，而PAW 浸泡處理組較PAW 噴淋處理組進一步下調，包括黃酮里的芹菜素-7-O-（6′′-乙酰）葡萄糖苷和山奈酚-3-O-葡萄糖醛酸苷-7-O-葡萄糖苷，以及屬于有機酸的（-）-茉莉酰-l-異亮氨酸。

綜上，PAW 處理后的差異代謝物主要為黃酮、脂質、生物堿、酚酸、有機酸等，其中生物堿具有良好的生理活性，有益于人體健康[25]；而黃酮是影響果蔬色澤、風味、營養價值的重要物質[26]，說明PAW 處理對生菜的營養價值和風味品質有一定的影響。這可能是由于在殺菌處理過程中，PAW 的氧化作用使生菜的代謝功能發生了改變[26-28]。

由差異代謝物檢測結果可知，PAW 噴淋處理組與對照組相比只引起了槲皮素-3-O-半乳糖苷（金絲桃苷），一種黃酮類物質含量的下降，而PAW 浸泡處理組與對照組相比卻造成了表兒茶素、芹菜素-7,4′-二甲醚、槲皮素-3-O-半乳糖苷（金絲桃苷）、芹菜素-7-O-（6′′-乙酰）葡萄糖苷以及山奈酚-3-O-葡萄糖醛酸苷-7-O-葡萄糖苷共五種黃酮類物質含量的下降，其中表兒茶素和芹菜素-7-O-（6′′-乙酰）葡萄糖苷分別降低了98.03%和99.83%，說明PAW噴淋處理組的生菜與對照組相比保留了含量更多的黃酮類物質，因此能夠發揮更強有力的抗氧化作用[19]。這可能是由于PAW 噴淋處理更有利于導致生菜中酚類物質（如黃酮類物質）的合成，從而提高了處理后生菜的綜合抗氧化能力[29]。

由表1 可知，PAW 噴淋和浸泡處理組與對照組相比都提高了9-羥基-13-氧代-10-十八碳烯酸和單酰甘油酯（18:4）兩種脂質含量。除此之外，差異代謝物檢測結果還顯示，PAW 浸泡處理組與對照組相比引起了包括石榴酸（9Z,11E,13Z-十八碳三烯酸）、11-十八碳烯酸、9,10,11-三羥基-12-十八碳烯酸等在內的其他7 種脂質含量的上升，說明PAW浸泡處理組的生菜與對照組相比膜脂代謝活躍，生菜的細胞膜在一定程度上喪失了完整性[30]。

2.5.5 差異代謝物KEGG分類和差異代謝物富集分析

分別將PAW 噴淋和浸泡處理組中的34 和45 種差異代謝物映射到KEGG 數據庫，查看途徑信息，結果如圖11 所示。大多數代謝產物都映射為“代謝”途徑。進一步開展KEGG 途徑富集分析，分別研究PAW 噴淋和浸泡處理組與對照組之間的代謝途徑的差異，發現酪氨酸代謝和谷胱甘肽代謝的代謝物在PAW 噴淋處理后有顯著差異（P＜0.05），而嘧啶代謝和嘌呤代謝的代謝物在PAW 浸泡處理后有顯著差異（P＜0.05）。

圖11 差異代謝物KEGG 分類和富集分析Fig.11 KEGG classification and enrichment analysis of differential metabolites

3 結論

本文研究了PAW 噴淋和浸泡兩種處理方式對生菜采后貯藏期間微生物、生理品質及代謝的影響。其中兩種PAW 處理方法都能顯著降低生菜表面菌落總數（分別下降2.82 和1.54 lg CFU/g，P＜0.05），但在貯藏后期，PAW 浸泡處理后生菜的失重率較清水處理組高出15%，葉綠素含量顯著降低，而PAW噴淋處理對生菜失重率和葉綠素含量沒有造成明顯影響。代謝組分析結果表明，PAW 噴淋處理組的生菜與對照組相比保留了含量更多的黃酮類物質，有助于生菜維持更好的營養價值，而PAW 浸泡處理組的生菜與對照組相比膜脂代謝活躍，會在一定程度上影響生菜細胞膜的完整性。因此，相比于PAW浸泡，PAW 噴淋處理更有利于生菜采后保鮮。PAW噴淋和浸泡處理后生菜微生物和代謝存在差異的原因主要是兩者在液體接觸樣品表面的面積、力度和時間以及處理后液體揮發等方面均存在差異。本實驗結果可為生菜采后保質減損與提質增效提供技術支撐。后續工作中將進一步研究整個貯藏期間生菜的代謝物變化情況，并與其相關品質進行關聯分析；同時也將研究PAW 處理后對生菜表面微生物群落和代謝的影響，以進一步解析其抑菌機制。