禽流感的診斷與防控措施

王艷，陶雙能，楊菲菲

武漢現代農業教育中心/武漢市農業學校，武漢 430043

禽流感在家禽、野禽和人均有發生，嚴重危害養禽業和人的生命健康安全。禽流感由A 型流感病毒引起，發病禽可表現出亞臨床癥狀、呼吸道癥狀、消化道癥狀、神經癥狀、產蛋量下降、急性出血性癥狀及隱性感染。在家禽中對雞和火雞危害最為嚴重。禽流感病毒自從被發現起，H5 亞型與H7亞型的毒株一直在世界范圍內的雞群中流行[1]。禽流感病毒可傳染給人，并造成死亡，據統計[2]，人感染高致病性禽流感H5N1 的死亡率接近50%；人感染H7N9約1 500例，死亡約600例；感染H5N6約80例，死亡約30 例。2022 年以來，禽流感又席卷了全球五大洲50余個國家，全球染疫或撲殺的禽類已超過2 億只，受疫情影響最嚴重的美國，撲殺了5 800多萬只禽類，損失約6.61 億美元。在柬埔寨發生了2例由H5N1引發的人類感染病例，其中1例死亡。

1 病原學

流感病毒屬于正黏病毒科，分為A、B、C 三型。A型流感病毒可感染人、禽和許多其他種屬的動物，B 型和C 型主要感染人。根據流感病毒的血凝素（HA）和神經氨酸酶（NA）抗原性差異，將A 型流感病毒分為不同的亞型，目前HA 發現16 個亞型，NA發現9個亞型，不同的HA和NA之間無交叉反應[3]。根據禽流感病毒毒力不同，分為強毒株（速發型）、中強毒株（中發型）和弱毒或無毒株（緩發型）[4]，引起高致病性禽流感的主要是H5 和H7 亞型。禽流感病毒重組和變異性強，且不同的H 抗原和N 抗原之間無交叉保護，給該病的防控增加了難度。大鼠、小鼠、兔、水貂、雪貂等都可感染，人也可感染[5]。禽流感病毒耐干燥、低溫，不耐熱，對紫外線耐受力差，對常用消毒藥敏感。在自然條件下，存在于病雞鼻腔分泌物和糞便中的禽流感病毒，由于受到有機物保護，抵抗力較強。

2 流行病學

禽流感呈世界性分布，家禽、野禽、鳥類都可感染。對禽流感病毒易感性最高的禽類是雞和火雞，其次是珠雞、野雞、孔雀，哺乳動物和人也可感染。隱性帶毒或發病的動物，野生水禽，遷徙的鳥類都可成為傳染源，病禽的分泌物、排泄物和尸體等污染飲水、飼料及用具，通過直接接觸和間接接觸感染。主要的感染途徑是消化道和呼吸道，也可通過損傷的皮膚和黏膜感染，吸血昆蟲和飼養人員也可傳播病毒；發病率和死亡率與毒株毒力強弱、禽類易感性、年齡、性別、飼養管理條件、環境等因素有關。禽流感在寒冷季節及天氣驟變時多發。

3 癥 狀

禽流感潛伏期從數小時到幾天不等，潛伏期長短與病毒毒力強弱、感染強度、家禽種類、傳播途徑有關。該病癥狀與感染禽的種類、性別、年齡、毒株毒力強弱、混合感染或繼發感染情況及環境因素有關。高致病性禽流感毒株感染的病禽往往表現為最急性型和急性型，最急性型病例看不到明顯癥狀而突然死亡，死亡率接近100%；急性型病例體溫升高，顏面部水腫，角質鱗片出血，咳嗽、噴嚏、呼吸困難、啰音、冠和肉髯發紺、腹瀉和神經紊亂等，蛋雞停止產蛋，有的病例甚至失明，病程一般2～3 d，致死率可達100%[6]。低致病性禽流感病毒感染的病禽，出現典型的呼吸道癥狀，如咳嗽、噴嚏、流淚、流涕和鼻竇炎，蛋雞產蛋量和蛋的品質下降，產軟殼蛋、砂殼蛋、畸形蛋，種蛋孵化率下降，大腸桿菌和博德特氏菌繼發感染時，臨床癥狀較嚴重[7]。部分蛋雞出現急性腎衰竭和內臟痛風，在沒有繼發細菌或病毒感染的情況下，發病率及死亡率會降低。

4 病理變化

病禽感染毒株毒力、病程長短、禽的種類不同，病理變化也不同。死于高致病性禽流感的家禽，腦、皮膚及內臟器官壞死，表現充血、出血、滲出和壞死變化，病雞顏面部水腫，冠和肉髯腫大，雞冠壞死和出血，心臟、肺、腦、脾出血，心臟、肝、腎、脾及肺有壞死。死于低致病性禽流感的家禽，主要表現為泌尿生殖系統受到侵害，輸卵管水腫，管腔內有黏性分泌物，卵巢退化、出血和卵子變形、破裂及卵黃性腹膜炎，氣管黏膜水腫，有數量不等的漿液性或干酪樣滲出物，氣囊炎，腺胃乳頭和腸黏膜出血。

5 診 斷

根據流行病學、臨床癥狀和病理變化可做初步診斷，禽流感的確診主要根據病毒的分離和鑒定，在我國，高致病性禽流感必須由指定實驗室開展分離和鑒定工作，診斷主要依據2020 年頒布實施的《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T 18936—2020）國家標準[2]。

5.1 臨床診斷

根據流行病學、臨床癥狀及病理剖檢結果可做初步診斷。

5.2 實驗室診斷

1）病毒分離、鑒定。禽流感病毒存在于病死禽的所有組織、分泌物和排泄物中。采集病料后，按照生物安全要求進行包裝，防止病原泄露。將采集的病料進行處理（混合，研磨、離心，取上清液，加入雙抗），將處理后的上清液接種于SPF 雞胚或流感病毒陰性雞胚，在37 ℃的條件下孵化3～7 d，收集48～96 h 的胚液，測定血凝活性。若檢測樣本血凝活性為陰性，用尿囊液盲傳2～5代，若血凝活性仍為陰性，則判定為禽流感病毒陰性；若血凝活性為陽性，則要用新城疫病毒抗血清進行血凝抑制試驗，排除新城疫病毒感染的可能性。如果新城疫病毒抗血清血凝抑制試驗為陰性，下一步用血清學方法檢測特異性抗原，最后用血凝素抗血清和神經氨酸酶抗血清進行血凝抑制試驗，來判定禽流感病毒H亞型和N亞型。

2）血清學檢測。血清學診斷方法較多，可用的有血凝試驗、血凝抑制試驗、瓊脂凝膠擴散試驗、病毒中和試驗、乳膠凝集試驗、免疫膠體金試驗、酶聯免疫吸附試驗和免疫組化試驗等。

3）病毒核酸檢測。目前，常用的有RT–PCR（反轉錄–聚合酶鏈反應）、熒光RT–PCR 技術[2]，結合電泳技術進行診斷。該方法的特點是快速，靈敏度高，特異性強，準確性高。

5.3 鑒別診斷

禽流感要與新城疫、傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎、傳染性鼻炎及慢性呼吸道疾病進行鑒別診斷，特別是某些疾病的混合感染或繼發感染，常給診斷帶來困難，且容易發生誤診。

6 防 控

6.1 科學合理規劃養殖場

養殖場的選址、布局設計必須以科學合理飼養、降低疫病發病率為基礎。因此，在建造養殖場時，必須充分考慮當地的交通情況、地形地勢、氣候、水源，與居民區、畜禽屠宰場的距離等，科學合理規劃，既能節約生產成本，提高生產效益，又能為禽營造良好的生長環境，提升疫情防控效果。

6.2 外防輸入

嚴防高致病性禽流感病毒從外傳入，引進來自無禽流感養禽場的禽類及其產品。對進口或者從外地引進的禽類及其產品加強檢疫，運輸途中防止禽類接觸到禽流感病毒，到達目的地后進行隔離，待隔離期滿后，才可進入圈舍飼養。

6.3 加強飼養管理

對未有該病發生的養禽場和地區，加強飼養管理。減少應激，注意飼料中營養物質的配比，提高家禽自身的抵抗力。注意養禽場內工作人員和飼養用具的流動，做好消毒，防止禽流感病毒交叉傳播。做好禽舍的通風，定期清掃、消毒，控制好禽舍的溫度、濕度、光照，為禽提供良好的生活環境。

6.4 建立健全疫情防控制度

基層獸醫主管部門對轄區內的養禽場加強監管，嚴格消毒制度和免疫接種程序，養殖畜禽做好登記，定期監測抗體。養禽場內防止野禽進入，尤其在野禽遷徙季節，加強對場內禽的抗體監測，防止禽流感暴發。一旦發現禽流感疫情，應立即上報上級獸醫主管部門，劃定疫點、疫區，采取隔離封鎖、撲殺銷毀、環境消毒、強制免疫、限制人員和車輛流動等措施，防止病原擴散。

6.5 免疫接種

疫苗免疫接種是目前防控禽流感最有效的方法。核酸疫苗主要是DNA 疫苗，優點是注射劑量低，免疫保護力持久，且制備簡單，易批量生產、成本低、儲運方便，免疫效果不受機體免疫機能和母源抗體的影響，缺點是免疫效率和表達效率低，而且核酸疫苗可能會攜帶抗生素基因，存在生物安全隱患[8]；重組活載體疫苗，可使用痘病毒、新城疫病毒、火雞皰疹病毒、禽腺病毒作為載體制備疫苗，此類疫苗具有滅活疫苗的優勢，使用方便，又可以做到“一針多防”，但是載體的免疫與目的抗原的免疫會發生競爭[9]；亞單位疫苗，生物安全性高，其制備過程中使用的佐劑雖然能顯著增強疫苗的免疫原性，但是此類疫苗不能刺激機體產生較強的免疫應答反應，誘導免疫保護期短，且制作成本高，應用不廣泛；基因工程重組滅活苗，2006 年以后在我國使用較為廣泛，相比于傳統滅活苗，此類疫苗在安全性、生產難易程度、免疫效果上都有明顯提升；減毒活疫苗，穩定性好，免疫原性高，接種方法簡單，一次免疫即可刺激機體產生良好的免疫保護力，但是要警惕其“毒力返祖”現象，使用不當，可能引起禽發??；滅活疫苗在安全性、穩定性、儲存運輸、生產周期，以及針對流行毒株的保護效率等方面都具有優勢，但是需要接種2次以上才能產生高水平抗體，免疫保護期短，并且不能中和變異產生的新病毒；病毒顆粒樣疫苗，是納米疫苗的一種[10]，又被稱為“假病毒”，已研制出利用昆蟲桿狀病毒表達系統表達抗毒基因的禽流感疫苗，此類疫苗不含核酸，安全性高，穩定性好，可有效避免其他病毒的感染，同時還能較好地刺激機體產生抗體，適合大批量生產；表位疫苗可以誘發機體產生細胞免疫反應和體液免疫反應，提高不同亞型禽流感病毒之間的交叉保護力。