玫瑰糠疹患者不同時期血清白細胞介素4、白細胞介素12和干擾素γ水平檢測

陳慧君，陳治國，繆希紅

（河北省承德市中心醫院，承德 067000）

玫瑰糠疹（pityriasis rosea,PR）是一種臨床上較為常見的皮膚病，每于春秋季節多發，各國皮膚病學研究中心報告PR的患病率為0.4%～4.8%[1-2]。因其具有玫瑰紅色圓形或橢圓形斑疹，搔抓后出現糠粃樣鱗屑而得名[3]。由于PR病程較長，一般4～8周，少數可以遷延半年以上，且病因不明確，給醫生及患者帶來極大困擾。本實驗觀察PR患者在急性期和恢復期血清中白細胞介素-4（interleukin-4,IL-4）、白細胞介素-12（interleukin-12,IL-12）和 γ-干擾素（interferon-γ,IFN-γ）表達水平的變化情況，以便更好的認識本病的發生發展規律與某些細胞因子的相關性，現將結果報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 30例PR患者均為我院皮膚科門診就診的患者。30例健康志愿者做為正常對照。根據PR的診斷標準[4]，除外二期梅毒、銀屑病、藥疹、體癬等疾病。選擇患病時間≤1周（時間以患者主訴時間為準），年齡及性別不限，未經過任何藥物治療的患者為受試對象。設定30例PR患者在病程≤1周時為急性期患者，并要求其定期復診，設定皮損消退≥70%為恢復期患者。30例PR患者中男13例（43.3%），女17例（56.7%），年齡18～54歲，平均23歲。30例健康志愿者中男14例（46.7%），女16例（53.3%）。年齡18～53歲，平均24歲。各組性別構成、年齡差異均無統計學意義（P>0.05）

1.2 標本采集 分別抽取急性期和恢復期PR患者靜脈血 3 mL放入抗凝管中，放置30 min后在離心機中離心3 000轉/min，10 min，采集到的血清標本放入-20℃冰箱中保存備用。同法將采集到的健康志愿者的血清標本放入-20℃冰箱中保存備用。

1.3 實驗方法 IL-4、IL-12和IFN-γ的檢測應用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）方法，試劑盒購自欣博盛生物科技有限公司。結果測定使用芬蘭雷勃公司MK3酶標儀，測定450 nm處吸光度（AD）值,以標準AD值繪制標準曲線。所有數據測定均由同一操作者使用相同設備完成，所有操作嚴格按照試劑盒的使用說明書進行。

1.4 統計學分析 采用SPSS11.5統計學軟件，計量資料以（±s)表示。各組間進行兩樣本均數比較的t檢驗。

2 結果

PR患者恢復期和急性期相比IL-4水平升高（P<0.05），恢復期與正常對照組相比IL-4表達水平接近（P>0.05）；PR患者恢復期和急性期相比IL-12水平下降（P<0.05），與正常對照組相比水平接近（P>0.05）；PR患者恢復期和急性期相比IFN-γ水平下降（P<0.05），與正常對照組相比水平接近（P>0.05），見表 1、2。

表1 PR患者急性期與恢復期血清IL-4、IL-12、IFN-γ 水平比較 （±s,ng/L）

表1 PR患者急性期與恢復期血清IL-4、IL-12、IFN-γ 水平比較 （±s,ng/L）

組別急性期恢復期例數30 30 t P IFN-γ 1.38±0.87 0.91±0.39 2.04<0.05 IL-4 5.57±4.80 9.16±5.72 2.46<0.05 IL-12 9.14±4.75 6.13±2.86 3.03<0.05

表2 PR患者恢復期與正常者血清IL-4、IL-12、IFN-γ水平比較 （±s,ng/L）

表2 PR患者恢復期與正常者血清IL-4、IL-12、IFN-γ水平比較 （±s,ng/L）

組別恢復期正常對照組例數30 30 t P IL-4 9.16±5.72 9.65±7.44 1.31>0.05 IL-12 6.13±2.86 5.34±3.91 0.85>0.05 IFN-r 0.91±0.39 0.89±0.68 0.68>0.05

3 討論

PR雖為自限性疾病，但是給患者及其家人的身心均造成明顯的不良影響。從1798年蘇格蘭皮膚病學家Willan首次報道環狀玫瑰疹，到1860年法國皮膚病學家Gilbert根據本病特點而將其命名為玫瑰糠疹[3]至今，150年間人們對其病因和發病機制的探索從未中斷過。近年來的一些研究顯示PR的發病主要涉及細胞免疫，與體液免疫關系不大。如皮損浸潤的細胞主要為輔助/誘導T淋巴細胞，表皮、真皮乳頭內朗格漢斯細胞（Langerhans cell,LC）明顯增多，角質形成細胞內出現人白細胞抗原-DR（human leucocyte antigen-DR,HLA-DR）的表達[5]。也有研究認為PR的發病與感染后機體的細胞免疫和（或）體液免疫的失衡有關。在機體免疫狀態改變時如妊娠或骨髓移植后PR多發也支持了這一假說[6]。

CD4+T細胞（Th）根據其合成和分泌細胞因子的不同可分為Th1和Th2細胞亞群。Th1細胞分泌IL-2、IL-12、IFN-γ等Th1類細胞因子，能增強殺傷細胞的細胞毒性作用，與細胞免疫有關；Th2 細胞則產生 IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-13等Th2類細胞因子，促進抗體的產生，與體液免疫有關。IL-12是參與免疫應答的重要細胞因子，其獨特且重要的生物學活性是調節Th1和Th2細胞間的平衡，誘導Th1細胞分泌IL-2和IFN-γ，使Th0向Th1方向發展。IFN-γ作用于抗原遞呈細胞，具有促進炎癥細胞浸潤和表皮細胞增殖的作用，同時還可促使角質形成細胞表達細胞黏附分子，協同促進炎癥細胞浸潤和表皮細胞增生。IFN-γ和IL-4是Th1和Th2細胞的代表性細胞因子，免疫學上常常通過檢測IFN-γ和IL-4來了解Th1和Th2細胞的功能狀態。

本研究通過檢測PR患者急性期和恢復期血清中IL-4、IL-12、IFN-γ的水平并進行比較發現PR患者在急性期體內存在細胞免疫與體液免疫的失衡，在恢復期機體的免疫失衡狀態得到恢復，同時說明IL-4、IL-12、IFN-γ參與了PR的發病，并在疾病發生發展過程中扮演著重要角色，起到了重要的作用。

Aiba等[7-9]對PR患者的皮損標本進行了組織病理和免疫組化研究，發現PR患者皮損真皮中浸潤的淋巴細胞主要為記憶性T細胞，證實細胞免疫在PR發病中可能起主要作用，而體液免疫不起主要作用。Sugiura等[10]觀察到在恢復期PR患者的皮損中，CD4+/CD8+浸潤細胞的比例顯著降低，并提出與恢復期PR患者的免疫抑制功能提高有關。孫曉杰等[11]運用免疫組化方法檢測PR患者急性期和恢復期外周血T細胞亞群的變化，發現PR患者外周血CD8+細胞比例明顯高于恢復期，CD4+/CD8+比值明顯降低，CD4+細胞比例急性期與恢復期無明顯變化。認為PR患者急性期機體存在免疫失衡，免疫細胞間的比例發生了變化。且Aiba等[9]運用流式細胞術（flow cytometry method,FCM）分析PR患者皮損中淋巴細胞時發現32%～88%是Leu-La+（CD5+）細胞，70%～90%是Leu-2a+（CD8+）細胞，10%～14%是Leu-3a+（CD4+），70%～90%是HLA-DR+細胞，也得到了與前面一致的結論。

據以上研究結論可推測PR患者在急性期機體出現免疫失衡，CD4+T淋巴細胞在朗格漢斯細胞等抗原遞呈細胞的作用下而活化，活化的CD4+T細胞可產生多種細胞因子，IL-12表達于活化的T淋巴細胞表面，促進Th0細胞分化為Th1細胞，并促進IFN-γ、TNF-α和IL-2的合成，而抑制Th2細胞合成IL-4、IL-10等。IL-12分泌增加并促使IFN-γ合成增加，IL-4分泌受到抑制。從而導致T淋巴細胞功能異常。IFN-γ是強有力的巨噬細胞活化因子，活化的巨噬細胞具有殺傷微生物和清除抗原的功能，促進細胞毒性淋巴細胞（cytotoxic lymphocyte,CTL）成熟和活化，而IFN-γ的水平也在免疫反應中勢力逐漸削弱，隨著疾病的發展PR逐漸進入恢復期，IL-12和IFN-γ水平下降，對Th2細胞的抑制減弱，IL-4分泌逐漸增多，患者免疫平衡狀態逐漸得到恢復，炎癥反應減輕，皮損消退，疾病也漸漸好轉。

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［2］Chuh AA,Lee A,Molinari N.Case clustering in pityriasis rosea:a multicenter epidemiologic study in primary care settings in HongKong[J].Arch Dermatol,2003,139:489-493.

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［9］Aiba S,Tagami H.In vitro propagation of tissue-infiltrating lymphoid cells from lesional skin by culture in IL-2 containing medium[J].Acta Derm Venereol,1986,66:391-397.

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［11］孫曉杰，郭英軍，劉文力，等.玫瑰糠疹患者T細胞亞群檢測及意義探討[J].中國中西醫結合皮膚性病學雜志，2003，2（2）：87-88.