三七總皂甙對糖尿病早期大鼠腎臟轉化生長因子β1及ET的影響

王衛娜

（南陽醫學高等?？茖W校 河南南陽 473000）

三七總皂甙對糖尿病早期大鼠腎臟轉化生長因子β1及ET的影響

王衛娜

（南陽醫學高等?？茖W校 河南南陽 473000）

目的：探討三七總皂苷對糖尿病大鼠腎組織形態學及相關因子的影響。方法：將SD雄性大鼠隨機分為：對照組、糖尿病模型組、三七總皂甙治療組。三七總皂甙治療組分別給與低、中、高劑量灌胃，對照組、和模型組灌等體積的生理鹽水，利用放免法測定血NO、TGF-β1、ET含量。結果：結論：能夠一定程度的改善DN模型大鼠腎臟病理變化，抑制腎臟TGF-β表達和舒張血管是其部分作用機制。

糖尿病腎病 腎臟 三七總皂甙

糖尿病腎?。―iabeticn ephropathy, DN）已經成為導致慢性腎功能衰竭的最常見原因之一,發病機制可能與腎臟組織細胞中的自由基或氧化應激水平異常相關［1］,目前對糖尿病腎病的治療仍然缺乏有效的手段,因此探討糖尿病腎病的治療,提高患者的生存質量,延長壽命,意義重大。三七總皂苷是三七的主要活性成分,有化瘀止血、活血定痛、補虛強壯的功效。本實驗擬通過觀察三七總皂苷對糖尿病大鼠腎臟TGF-β1、ET的表達,以探討三七總皂苷防治DN的可能作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選擇3月齡SD大鼠,清潔級,雄性,35只,體重150-200g,鄭州大學實驗動物中心提供。大鼠飼養于清潔級動物室,室溫21-25℃。

1.2 試劑

鏈脲佐菌素（STZ）美國Sigma公司；血栓通膠囊,龍江珍寶島制藥有限公司產品,規格：每粒含三七總皂苷100mg；尿蛋白測定試劑盒、血糖測定試劑盒購至南京建成生物工程公司。

2.1 分組、模型制作與給藥方法

按數字隨機表法,將大鼠分為正常組、模型組、三七總皂甙治療組。以傳統方法制備糖尿病大鼠模型,三七總皂甙治療組以三七總皂甙100 mg/kg/d腹腔注射；正常組、模型組給予等量生理鹽水。

1.3 觀察指標及測定

大鼠取血檢測血尿指標： 用氧化酶法測定血糖（BS）；血尿肌酐采用自動生化儀測定,取腎測定腎臟指數,腎臟組織經多聚甲醛固定,以HE染色,經腎小球圖像統計軟件分析腎小球系膜基質（ECM）增生程度。酶聯免疫法測定TGF-β1；放免法測定一氧化氮（NO）、內皮素（ET）的含量血尿肌酐采用自動生化儀測定

1.4 統計學處理

采用SPSS18.0軟件進行統計分析,計量資料用均數±標準差（±s）表示,多組間比較采用方差分析,兩兩組間比較采用LSD-t檢驗。

表1 三七總皂苷對糖尿病模型組大鼠ET水平、NOS活性等的影響

表2 三七總皂苷對DN大鼠TGF-β及尿量的影響

圖1 各組大鼠腎小球病例形態學變化（蘇木精-伊紅染色，×400）

2 結果

2.1 三七總皂苷治療對實驗大鼠腎臟形態學的影響

如圖所示,光鏡下,正常組大鼠腎臟基底膜無明顯增厚,系膜細胞及內皮細胞無增多,糖尿病大鼠系膜區基質增生明顯,腎小球體積增大成分葉狀,腎小球系膜基質與腎小球面積的比值增高。三七總皂苷治療后腎小球體積減小,病理改變減輕。

2.三七總皂苷對糖尿病模型組大鼠和NO水平、NOS活性的影響

與正常組比較,糖尿病模型組大鼠NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數顯著增大（P＜0.05）,ET水平顯著降低（P＜0.05）；與模型組比較,治療組NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數顯著降低（P＜0.05）,ET水平顯著增大（P＜0.05）見表1。（±s）

2.2 三七總皂苷治療對實驗大鼠尿量及血清TGF-β 1的影響

與正常組比較,糖尿病模型組大鼠NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數顯著增大（P＜0.05）,ET水平顯著降低（P＜0.05）；與模型組比較,治療組NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數顯著降低（P＜0.05）,ET水平顯著增大（P＜0.05）見表1。（±s）

討論

糖尿病腎病作為糖尿病的嚴重微血管并發癥之一,早期的腎臟損害主要表現為腎臟肥大,既往許多研究已揭示高糖、TGF-β等與糖尿病腎臟肥大形成可能有關［1］。腎小球高濾過和高功能是糖尿病早期的病理生理狀態［2］,作為作用最強的血管舒張與收縮因子,NO和ET是今年被發現,隨著糖尿病進展糖基化終末產物、氧自由基及多元醇通路的代謝產物增加,NOS的合成增加活性升高,NO產生增多［3］。NO影響腎臟濾過效率及腎皮質血流量,是具有舒血管作用的活性因子。糖尿病時NO增多,促進炎癥產生與發展、對腎細胞產生毒性作用［4］?？梢?NO作為血管活性物質參與了腎小球高灌注高濾過的發生發展和腎細胞的損傷。

研究表明,三七總皂苷可以抑制TGF-β的表達,減輕DN大鼠的腎臟肥大指數,在一定程度上改善DN模型大鼠腎臟病理變化,具有保護腎臟的作用。

［1］錢軍；黃平絞股藍皂甙對早期糖尿病腎病大鼠腎臟TGF-β1蛋白含量影響的研究［期刊論文］-中國中醫藥科技2007（04）

［2］Elmarakby A A，Sullivan J C.Relationship between oxidative stress and inflammatory cytokines in diabetic nephropathy.［J］Cardiovascular Ther，2012，30（1）：49.

［3］ 賈育新，楊中高.醒胰降糖靈對試驗性糖尿病大鼠NO與ET-1的影響［J］.中國實驗方劑學雜志，2010，16（9）：166.

［4］ 張翊玲，張旭華.被動吸煙對大鼠肺組織、肺泡灌洗液、血清中NO及NOS的影響［J］.廣東醫學，201l，32（3）：296.

R587

A

1674-2060（2016）03-0006-01

南陽市科技局科技攻關項目 2012GG069，2014GG040。南陽醫學高等?？茖W校自然科學項目 12NYYZ2004。