98例輸血前檢查疑難標本的原因分析及解決對策

楊槐波

（通遼市中心血站 內蒙通遼 028000）

98例輸血前檢查疑難標本的原因分析及解決對策

楊槐波

（通遼市中心血站 內蒙通遼 028000）

輸血前需要進行常規的血型血清學檢查，而在常規檢查中經常會發現各種影響正常定型的因素。本站2013年10月—2015年10月接收了98例醫院血庫在ABO定型和不規則抗體篩選中出現疑難問題的患者標本，本站血型室通過血型血清學試驗查找出產生疑難問題的原因并采取了相應的解決方法，保證了患者正確定型和安全輸血。

ABO正反定型 吸收放散 型物質 亞型

1 材料

1.1 樣本來源

2013年10月—2015年10月通遼市各醫院血庫輸血前檢查疑難血樣98例。

1.2 試劑

抗-A標準血清、抗-B標準血清、ABO標準細胞、抗-AB試劑、抗-A1試劑、抗-H試劑、抗-Lea試劑、抗-Leb試劑、三組篩選細胞和十組譜細胞（上海血液生物醫藥有限責任公司）。

2 方法

2.1 ABO正反定型

正定型：抗-A標準血清和抗-B標準血清與被檢細胞分別加入標記好的試管；反定型：Ac、Bc、Oc與被檢血清分別加入標記好的試管并做自身對照,分別在4℃、室溫和37℃放置5-10分鐘,3400r/min離心判讀結果,根據正反定型的結果,分析判斷產生不符合的原因并根據具體情況,加做抗-A1、抗-AB、抗-H和A1c、A2c。

2.2 對于減弱的和可疑的抗原可進行吸收放散試驗和唾液型物質檢測

按文獻［1］操作。

2.3 Lewis血型

用抗-Lea試劑和抗-Leb試劑判斷分泌性和非分泌性,檢測結果為Le（a+b-）為非分泌型；Le（a-b+）為分泌型。

2.4 抗體篩查與鑒定

出現Oc有凝集反應、自身對照陰性的標本血清應考慮有ABO系統以外的不規則抗體,應與三組篩選細胞試驗,試驗結果陽性的再加做十組譜細胞,以陰性排除法確定抗體的特異性。

2.5 ABO亞型的判斷方法

按文獻［1］標準進行相關的血型血清學試驗判斷不同的亞型及其分類。

2.6 DTT處理紅細胞

可以用DTT處理有自身凝集的紅細胞。

2.7 鹽水替代法排除緡錢狀凝集

3 結果

（1）經過對2013年10月—2015年10月98例輸血前檢查中出現疑難問題的患者標本進行血型血清學試驗,其產生的原因分析見表1。

（2）對各種影響ABO血型定型的原因,我們采用了相應的血型血清學解決方法：

3.1自身冷抗體

出現自身冷抗體干擾的標本,可將血清和紅細胞分別在37℃預溫5-10分鐘,再3400r/min離心判讀結果。對于冷凝集素效價較高,紅細胞已經凝集的標本,可在56℃10分鐘放散細胞至直抗陰性,用此細胞進行正定型。用直抗陰性細胞4℃吸收血清30-60分鐘,用此血清進行反定型。此外還可采用DTT處理后的紅細胞進行定型。［2］

3.2 抗體減弱

抗體減弱可由下列四種原因引起：年齡（新生兒或老年人）、丙球蛋白過低血癥、丙球蛋白缺乏血癥及嵌合現象。根據抗體減弱或缺失的不同原因,可通過適當加大抗體量,延長抗原抗體反應時間,降低抗原抗體反應溫度等方法解決。

3.3 ABO亞型

出現排除疾病影響的抗原減弱時,應考慮亞型的可能性。常用的ABO亞型定型試劑有抗-A1、抗-AB、抗-H、A1c、A2c?？?A1用于判斷是否存在A1抗原,抗-AB用于檢測弱的A抗原和B抗原,特別適用于Ax、Bx亞型的檢測,抗-H是因為大部分亞型細胞上有較多的H抗原,與抗-H反應較強。A1c、A2c用于判斷A亞型的抗-A1抗體。另外還可以通過吸收放散試驗、唾液型物質檢測輔助亞型的判斷。［3］

34 同種抗體

通過與O細胞、三組篩選細胞和十組譜細胞反應確定同種抗體的存在及特異性。需要注意的是在少數情況下會出現血清與反定A細胞或B細胞反應而與O細胞不反應,這是因為反定細胞上有相應的抗原而O細胞上卻沒有。［4］

3.5 血漿異常

血漿蛋白濃度異常,球蛋白濃度升高（如多發性骨髓瘤）、原發性巨球蛋白血癥、血漿增容劑等會引起緡錢樣凝集,如果聚集生成具有錢串樣特征的團塊,就容易識別,但這種聚集常常是形狀不規則而且很像通常的凝集?？刹捎孟蛟嚬苤械渭?-3滴生理鹽水或鹽水替代法排除緡錢樣假凝集。

3.6 抗原減弱

稀有的A或B等位基因存在時或白血病及其它惡性疾病時可能會引起抗原減弱,用抗-A、抗-A1、抗-AB、抗-H重復試驗并在室溫及4℃放置30分鐘,對陰性結果用顯微鏡檢查,還可通過吸收放散試驗、唾液型物質檢測；調查患者以前的血型等方法。

3.7 近期輸血

對于近期輸血的患者應通過毛細管離心方法,獲得的患者的自身紅細胞,用此細胞進行定型。

表1 98例正反定型不符的原因

4 討論

ABO血型系統是與輸血相關的最重要的血型系統,ABO血型的鑒定會受許多因素的干擾,造成正反定型不符,ABO血型正確定型直接關系到患者的生命安全,所以應以認真的態度、嚴謹的方法進行試驗。一定要保證患者臨床輸血及時、安全和有效。

［1］李勇，楊貴貞主編.人類紅細胞血型學實用理論與實驗技術［M］.北京：中國科學出版社，1999，37-43；267-268；272-274；289-290；298-299.

［2］張魯平，李繼明，劉雯馨.自身免疫溶血性貧血引起血型及配血困難2例［J］.臨床血液學雜志（輸血與檢驗版），2007，4（2）：95-96.

［3］向東，劉曦，郭忠慧，等.上海地區中國人群中ABO亞型的研究.中國輸血雜志，2006，19（1）25-26.

［4］徐智杰，周小玉.天然抗M抗體致ABO血型鑒定正反定型不符1例［J］.臨床血液學雜志（輸血與檢驗版），2007，4（3）：142-143.

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A

1674-2060（2016）03-0113-01