白芷配方顆粒的提取工藝研究

張立新 孫永娟

摘 要：本實驗以歐前胡素為指標對白芷配方顆粒提取工藝進行研究。白芷配方顆粒最佳提取工藝為加入10倍量70%乙醇，回流提取60分鐘，連續提取3次。本工藝穩定、可行、收率高。

關鍵詞：白芷配方顆粒；提??；工藝

白芷始載于東漢《神農本草經》，名白，芳香，列為中品。白芷性溫，味辛，氣芳香，微苦，具有祛風濕、活血排膿、生肌止痛的功效?！度杖A子本草》記載：“治目赤胬肉，及補胎漏滑落，破宿血，補新血，乳癰、發背、瘰疬、腸風、痔瘺，排膿，瘡痍、疥癬，止痛生肌，去面皯疵瘢?！卑总瞥Ｓ糜陬^痛、腸風痔漏、牙痛、鼻淵、癰疽瘡瘍、皮膚瘙癢等。白芷含有異歐前胡素（isoimperatorin）、歐前胡素（imperatorin）、當歸素、壬烯醇、白當歸醚、佛手柑內酯（bergapten）、十一炭烯-4、欖香烯、十六烷酸、珊瑚菜素（phellopterin）、氧化前胡素（oxypeucedanin）等成分。白芷具有解熱、解痙、降壓、興奮運動和呼吸中樞、抗癌、鎮痛、平喘、抗輻射、抗菌、抑制脂肪細胞合成、光敏性等方面的藥理作用[1-5]。本實驗以歐前胡素為指標對白芷配方顆粒提取工藝進行研究。

1 儀器與試藥

KQ250DE超聲波清洗器超聲波檢測儀器（煙臺鑫康商貿有限公司）；LC-310液相色譜系統（江蘇天瑞儀器股份有限公司）；WP-UP-1820“沃特浦”普通型實驗室超純水器（四川沃特爾水處理設備有限公司）；PHS-550智能型臺式酸度計（杭州陸恒生物科技有限公司）；SP-1900雙光束紫外可見分光光度計（上海光譜儀器有限公司）；分析天平（上海滬粵明科學儀器有限公司）。歐前胡素對照品（中國藥品生物制品檢定所提供）。乙腈（東莞市喬科化學有限公司）；甲醇（東莞市喬科化學有限公司）；乙醇（天津市康科德科技有限公司）。

2 方法與結果

2.1 單因素考察

2.1.1 提取次數

分別取藥材，粉碎為20目，精密稱定，至于圓底燒瓶內，分別提取四次，第一次加10倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取90分鐘，過濾，減壓濃縮；第二次加10倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取90分鐘，連續提取兩次，過濾，合并濾液，減壓濃縮；第三次加10倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取90分鐘，連續提取三次，過濾，合并濾液，減壓濃縮。第四次加10倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取90分鐘，連續提取四次，過濾，合并濾液，減壓濃縮。采用高效液相測定濃縮膏中歐前胡素含量并計算歐前胡素收率。

2.1.2 藥材粉碎目數

分別取藥材，分別粉碎為10目、20目、40目，精密稱定，至于圓底燒瓶內，分別加10倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取90分鐘，連續煎煮三次，過濾，合并濾液，減壓濃縮。采用高效液相測定濃縮膏中歐前胡素含量并計算歐前胡素收率。

2.1.3 加醇倍數

分別取藥材，粉碎為20目，精密稱定，至于圓底燒瓶內，分別提取四次，第一次加14倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取90分鐘，連續三次，第二次加12倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取90分鐘，連續三次，第三次加10倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取90分鐘，連續三次，第四次加8倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取90分鐘，連續三次，分別過濾，合并濾液，減壓濃縮。采用高效液相測定濃縮膏中歐前胡素含量并計算歐前胡素收率。

2.1.4 提取時間

分別取藥材，粉碎為20目，精密稱定，至于圓底燒瓶內，分別提取三次，第一次加10倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取60分鐘，連續三次，第二次加10倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取90分鐘，連續三次，第三次加10倍70%乙醇，浸泡2小時，回流提取120分鐘，連續三次，分別過濾，合并濾液，減壓濃縮。采用高效液相測定濃縮膏中歐前胡素含量并計算歐前胡素收率。

2.2 正交試驗設計

實驗結果表明，粉碎目數對歐前胡素收率影響不大，提取次數、加醇倍數和提取時間對歐前胡素收率影響較大。連續提取3次和連續提取4次無明顯差異。選擇提取次數、加醇倍數和提取時間作為考察因素，采用正交試驗法對影響提取效率的其它工藝條件進行優選。采用3個考察水平，用L9（34）正交表進行試驗，因素水平表見表1。

3 含量測定

3.1 色譜條件：依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[5]。色譜柱為安捷倫Cl8規格為（4.6mm×250mm，5μm）；流動相以甲醇：水（55：45）；檢測波長為300nm；流速1.0mL·min-1；柱溫：35℃。理論板數按歐前胡素峰計算應不得低于3000。

3.2 供試品溶液的制備

取提取膏適量，精密量取，置5mL量瓶中，加50%乙醇適量，超聲處理十分鐘，放置至室溫，加50%乙醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得。

3.3 對照品溶液的制備

分別精密稱取歐前胡素對照品2.5mg，置250mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

3.4 標準曲線的制備

將濃度為5μg/ml，10μg/ml，15μg/ml，20μg/ml，25μg/ml，30μg/ml，35μg/ml的對照品溶液分別吸取20μL注入HPLC，以進樣量（μg）為橫坐標，峰面積積分值A為縱坐標，繪制標準曲線。試驗表明，歐前胡素對照品在5～35μg/ml范圍內線性關系良好。

3.5 回收率試驗

取已知含量的同一批供試品各6份，分別精密添加一定量的歐前胡素對照品，測定含量，計算回收率。平均回收率為97.3%，RSD為0.82%。

4 實驗結果

按照L9（34）正交設計表條件進行試驗，得到最佳提取工藝為加入10倍量70%乙醇，回流提取60分鐘，連續提取3次。本工藝穩定、可行、收率高。

參考文獻

[1]王夢月，賈敏如，馬逾英，孫嘉敏，唐聲武，蔣桂華，熊英.白芷總香豆素的藥理作用研究[J].時珍國醫國藥，2005（10）.

[2]尉小慧，張樹軍，夏廣新，付收，王偉，沈敬山，嵇汝運.蛇床子和白芷中香豆素類化合物抑制磷酸二酯酶5活性的研究[J].中國藥學雜志，2006（02）.

[3]王德才，李珂，徐曉燕，蘇雪慧.杭白芷香豆素組分解熱鎮痛抗炎作用的實驗研究[J].中國中醫藥信息雜志，2005（11）.

[4]王海莉，王春梅，李賀，崔新穎.白芷香豆素的鎮痛作用部位及其機制[J].中國老年學雜志，2009（15）.

[5]劉忠和，李佳，吳基良.杭白芷香豆素對巴比妥類藥物催眠作用的影響及其機制研究[J].武漢大學學報（醫學版），2006（01）.