N、P、K元素對蘋果斑點落葉病菌的影響

于占晶

（衡水學院生命科學系 河北衡水 053000）

蘋果在我國是最普遍栽培的果樹之一，屬薔薇科蘋果亞科蘋果屬植物，其果實有重要的營養價值和經濟價值[1]。蘋果斑點落葉病是目前我國各蘋果產區的主要病害之一[2]。由蘋果致病型（異名引起的蘋果斑點落葉病最早于1905 年在美國密歇根農業實驗站發現，1924 年在美國首次報道，并將該病原命名為蘋果斑點落葉病菌絲體的越冬是通過潛伏在落葉上進行的。第2 年春天，風把潛伏在落葉中的病菌孢子吹散，在空氣中大量傳播。等到蘋果樹開花后，病菌孢子開始對新梢進行初次侵染，一旦形成降雨后菌絲體會再次擴散，形成二次侵染，這個時候極易引起發病。北方許多果園病葉率非常高，有的果園病葉率竟達90%以上，平均每個葉片有十余個病斑。蘋果樹葉大面積脫落，果實的品質和產量受到很大影響，嚴重時常造成蘋果樹勢衰弱，影響來年長勢和花芽形成。因此，及時掌握蘋果斑點落葉病的綜合防治技術十分重要[4～6]。

隨著人民生活水平的提高，環保意識的增強，物理防治方法顯得尤為重要[7]。N、P、K 是促進植物生長的必不可缺的微量元素，與植物病害的發生和植物的健康成長有非常重要的聯系[8]。K 肥的合理施用也能夠對細菌、真菌和病毒引發的病害有一定的抑制作用。王波等研究發現，玉米紋枯病菌菌絲的疏密程度和生長快慢均受到不同C、N源的影響，其菌絲的疏密度也影響著菌核的數量和重量[9]。N、P、K 元素的含量與蘋果樹病害關系中，當感染蘋果褐斑病時，健康植株葉片上K 元素的含量要高于感染的植株葉片K 元素的含量。感染輪紋病時，染病的葉片K 元素含量往往低于健康葉片K 元素含量。同時蘋果斑點落葉病的病情加重往往與 K、Ca、P 元素缺乏有一定的聯系[10～11]。

1 材料與方法

表1 供試試劑名稱、劑型、廠家信息

1.2 供試培養基的制備 馬鈴薯葡萄糖瓊脂半量培養基：馬鈴薯去皮后稱量100 g，把切成小塊的馬鈴薯放入鍋中，加入1 000 mL 無菌水，煮沸30 min。用紗布濾除馬鈴薯殘渣，然后加入瓊脂17 g，葡萄糖10 g?；靹蚝蠓盅b，同時加入7 個不同濃度的N、P、K（表2）。分裝后在0.103 Mpa，121 ℃下高壓蒸汽滅菌20 min。

表2 N、P、K 含量及其對應化學試劑含量 /（g/L）

1.3 N、P、K對蘋果斑點落葉病菌影響測定 采用菌絲生長速率法測定7 種不同濃度的N、P、K 元素對病原菌的菌絲生長的作用，打開超凈工作臺紫外線殺菌30 min，將加入不同濃度 N、P、K 元素的半量 PDA 培養基加熱熔化后倒入直徑為9 cm 的培養皿中，每個處理設3 個重復，同時設置空白對照。待其凝固后，用直徑5 mm 的打孔器在活化好的病原菌菌落邊緣打取菌餅，倒置接種到培養基平板中央，倒置于25 ℃恒溫箱中黑暗培養，48 h開始用十字交叉法測量菌落直徑，每隔24 h觀察測量1 次并記錄數據直至菌落鋪滿培養皿。

菌絲生長抑制率/%=（對照菌落直徑-處理菌落直徑）/對照菌落直徑×100%

1.4 數據分析 用Microsoft Excel 2010 對實驗數據進行處理，SPSS 20.0 軟件進行方差分析，顯著水平均為 p≤0.05。

2 結果與分析

2.1 N元素對蘋果斑點落葉病菌的影響 用第7 d測量所得數據結合SPSS20.0 軟件進行分析，結果見表3。不同N 元素對蘋果斑點落葉病菌菌絲生長均表現出抑制作用，其中N 濃度為1.00 g/L 的抑制效果最佳，抑制率達到了21.28%。N 濃度為5.00 g/L 時抑制效果次之，抑制率達到了18.80%。15.00 g/L 抑制效果最差，僅為3.96%。N 濃度 1.00 g/L、5.00 g/L 與 CK 蘋果斑點落葉病菌菌絲直徑差異性顯著，與其他濃度差異不顯著。濃度為 23.00、20.00、15.00、10.00、2.00 g/L 時，菌落直徑差異性均不顯著。

表3 N 對蘋果斑點落葉病菌的影響

2.2 P元素對蘋果斑點落葉病菌的影響 用第7 d測量所得數據結合SPSS 20.0 軟件進行分析，結果可見表4。不同 P 元素對蘋果斑點落葉病菌落生長均表現出抑制作用，其中P濃度為3.30 g/L 的抑制效果最佳，抑制率達到了27.89%。P 濃度為1.00 g/L 時抑制效果次之，抑制率達到了17.77%。濃度為3.80 g/L 抑制效果最差，僅為5.37%。濃度4.60 g/L 和1.00 g/L時與CK差異性顯著，與其他不顯著。濃度4.20、3.80、3.30、2.80、2.00 g/L 與對照以及相互之間差異性均不顯著。

表4 P 對蘋果斑點落葉病菌的影響

2.3 K元素對蘋果斑點落葉病菌的影響 用第7 d測量所得數據結合SPSS 20.0 軟件進行分析，結果可見表5。不同濃度的K 元素對蘋果斑點落葉病菌落生長均表現出抑制作用，抑制效果均較差，其中K 濃度為10.00 g/L 的抑制效果最佳，抑制率僅為2.28%，濃度為20.00 g/L 抑制效果最差，抑制率僅為0.41%。濃度10.00、5.00、2.00 g/L 與 CK 差異性顯著，與其他濃度相比差異不顯著。濃度37.00、26.00、20.00、15.00 g/L差異性均不顯著。

表5 K 對蘋果斑點落葉病菌的影響

3 結論與討論

本研究表明，N元素濃度為1 g/L時，蘋果斑點落葉病菌生長最慢，抑制效果最好，抑制率為21.28%。15.00 g/L 抑制效果最差，僅為3.96%。P 元素濃度為3.30 g/L 的抑制效果最佳，抑制率達到了27.89%。3.80 g/L 抑制效果最差，僅為5.37%。K 元素濃度為10.00 g/L 的抑制效果最佳，抑制率僅為2.28%。從整體來看，N、P 元素的抑制作用較為明顯，K 元素的抑制作用最差。5 d 以后，所有濃度的N、P、K 元素對蘋果斑點落葉病病菌均出現抑制作用，但不同濃度抑制效果之間存在較大差異。為進一步研究是否可以通過適當增加N、K、P 元素含量，減輕蘋果斑點落葉病的發生打下基礎。