正交試驗法優選穿心蓮干浸膏的干燥工藝

歐淑芬 張俊華 吳祿祥

【摘要】目的：使用正交試驗法優選穿心蓮干浸膏的干燥工藝。方法：采用建立的高效液相色譜法測定穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的含量，以干浸膏水分、穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的含量總量為評價指標，通過正交試驗，考察干燥溫度、干燥時間、真空度對穿心蓮干浸膏干燥工藝的影響。結果：最佳的干燥工藝為干燥溫度為110℃，干燥時間為8h，真空度-0.08Mpa。結論：采用優選的干燥工藝得到的穿心蓮干浸膏的水分低，穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的含量總量高，工藝合理可行，適用于穿心蓮干浸膏的生產制備。

【關鍵詞】穿心蓮干浸膏，正交試驗，穿心蓮內酯，脫水穿心蓮內酯

【中圖分類號】R97 ? 【文獻標識碼】A ? 【文章編號】2026-5328（2021）09--03

穿心蓮為爵床科植物 Andrographis paniculata （ Burm.F.） Nees，原產于印度，在我國廣東、福建地區也廣泛栽培，是南方地區民間治療多種感染性疾病及蛇毒咬傷的常用草藥，同時也是穿心蓮片、消炎利膽片、復方苦木消炎片的主要原料。因此，穿心蓮的加工工藝研究對產品開發具有重大意義[1]。

穿心蓮干浸膏的干燥工藝是將穿心蓮提取物脫水后形成便于貯存和加工的干浸膏。但干燥工藝對其有效成分的影響尚未有研究，不利于干浸膏的質量保證，通過優選干燥工藝來保證干浸膏的質量，有利于完善穿心蓮干浸膏的生產工藝。

現代藥理學研究已證明穿心蓮內酯及脫水穿心蓮內酯為其重要藥效成分，同時二者也是評價穿心蓮藥材和制劑質量的重要指標之一[2]。但在以穿心蓮為主要原料的中成藥的生產工藝過程中，穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的變化情況卻未有詳細的報道[3]，所以本文對穿心蓮干浸膏的干燥工藝進行探討，利用正交試驗法優選出最佳的干燥工藝，為穿心蓮提取物的干燥工藝提供指導和參考，制出優質的穿心蓮干浸膏。

1 材料

1.1樣品

穿心蓮葉藥材（廣州白云山光華制藥股份有限公司提供），穿心蓮內酯對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110797-201609），脫水穿心蓮內酯對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110854-201710）

1.2試劑、耗材和儀器

FL-20型熱風循環烘箱（廣州雅達干燥設備廠），CSF-1B型超聲波發生器（上海超聲波儀器廠），EB-182A型（賽多利斯科學儀器（北京）有限公司），Waters e2695型高效液相色譜儀（美國Waters公司）。甲醇（默克）為色譜純，乙醇（廣州市化學試劑廠）為分析純，水為去離子水，中性氧化鋁（廣州市化學試劑廠）

2 方法

2.1穿心蓮稠膏制備工藝

將穿心蓮藥材進行挑揀，粉碎，然后用乙醇浸漬三次，第一次浸漬24h，第二次、第三次分別浸漬12h，浸出液濾過，合并浸液，回收乙醇并濃縮至稠膏狀，即得穿心蓮稠膏。

2.2穿心蓮干浸膏的水分測定

取供試品2～5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松供試品不超過10mm，精密稱定，打開瓶蓋在100～105℃干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重，至連續兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據減失的重量，計算供試品中含水量（水分不得超過5%）。

2.3 穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯含量測定方法的建立

2.3.1 ?溶液的制備

2.3.1.1 對照品的制備

取穿心蓮內酯對照品和脫水穿心蓮內酯對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含穿心蓮內酯40μg、脫水穿心蓮內酯75μg的溶液，即得。

2.3.1.2 ?供試品溶液的制備

取本品適量，研細，取粉末60mg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，室溫浸泡1小時，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液5ml（剩余濾液備用），加在中性氧化鋁柱（200～300目，3g，內徑為1.5cm）上，用甲醇20ml洗脫，收集洗脫液，置25ml量瓶中，加甲醇置刻度，搖勻，即得。

2.3.2 ?分析條件

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相甲醇-水（60：40），穿心蓮內酯檢測波長為225nm，脫水穿心蓮內酯檢測波長為254nm。理論板數按脫水穿心蓮內酯峰計算應不低于6000。

測定法 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得。

本品按干燥品計算，含穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的總量不得少于11.0%。

2.4 正交法研究穿心蓮干浸膏烘干工藝

2.4.1干燥溫度的考察

稱取穿心蓮稠膏3份，各50g，分別在80℃、110℃、130℃的真空干燥箱（真空度為-0.04Mpa）進行干燥8小時，按本文2.2項的方法測定穿心蓮干浸膏的水分，按本文2.3項的方法測定穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的總量。

2.4.2干燥時間的考察

稱取穿心蓮稠膏3份，各50g，在110℃真空干燥箱（真空度為-0.04Mpa）中分別干燥4h、8h、12h，按本文2.2項的方法測定穿心蓮干浸膏的水分，按本文2.3項的方法穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的總量。

2.4.3真空度的考察

稱取穿心蓮稠膏3份，各50g，在110℃的真空干燥箱中分別在真空度0、-0.04Mpa、-0.08Mpa下干燥8h，按本文2.2項的方法測定穿心蓮干浸膏的水分，按本文2.3項的方法穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的總量。

2.4.4pH值的考察

稱取穿心蓮稠膏3份，各50g，于錐心瓶中，然后以1molL1的鹽酸或水調節穿心蓮稠膏的酸性至pH值分別為pH34，pH56，pH7，置于110℃真空干燥箱（真空度為-0.08Mpa）中烘8h。取出，按本文2.2項的方法測定穿心蓮干浸膏的水分，按本文2.3項的方法穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的總量。

3結果

3.1檢測方法的驗證

3.1.1線性關系的考察

分別精密吸取穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯對照品溶液，分別進樣10μl，測定。以峰面積值為縱坐標，質量濃度為橫坐標，進行線性回歸，得回歸方程分別為Y=121.8x-0.0503，r=1、Y=241.7x+0.011，r=1。結果表明兩種對照品溶液在濃度分別在0.0052～0.083mg/ml、0.0096～0.1541mg/ml范圍內與峰面積呈現良好的線性關系。

3.1.2精密度試驗

精密吸取穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯對照品溶液，重復進針6次，計算峰面積RSD值分別為0.15%、0.20%，表明精密度良好。

3.1.3穩定性考察

精密取同一份干浸膏，制備供試品溶液，于處理后0、2、4、6、8、12、24h分別進樣測定，計算峰面積RSD值分別為0.53%、0.22%，表明供試品溶液在24h內穩定性良好。

3.1.4重復性試驗

精密吸取同一批干浸膏，制備供試品溶液，平行6份，處理后進樣測定，所得供試品溶液中的穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯平均含量分別為0.85mg/g、1.41mg/g，RSD值分別為0.72%、0.45%，表明該方法重復性良好。

3.1.5加樣回收率試驗

精密吸取已知含量的干浸膏，平行9份，精密加入對照品溶液適量，制備供試品溶液，在上述色譜條件下進行測定，穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯含量結果平均回收率分別為99.26%、98.72%，RSD值分別為1.42%、1.26%，表明該方法準確度良好。

方法驗證數據表明，建立的穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯含量測定方法可行。

3.2 干燥條件的單因素實驗研究

3.2.1干燥溫度的考察

結果表明，80℃時干燥8h，水分仍大于5%，不能達到要求，且隨著溫度的升高，水分一直下降，但超過110℃后，水分下降的情況較緩慢。穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的總量則隨著溫度的升高先上升后下降。因此，干燥溫度為110℃的時候，既能保證水分達標又能保證有效成分的總量最多，結果見表1。

3.2.2干燥時間的考察

結果表明，隨著干燥時間的延長，穿心蓮干浸膏的水分一直下降，干燥4h前，水分下降十分迅速，延長至8h，水分也下降較明顯，但繼續延長到12h，水分下降幅度較低。各干燥時間點穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯總量均達到要求，但隨著干燥時間延長稍有所下降，超過8h后下降的幅度較大，結果見表2。

3.2.3真空度的考察

結果表明，隨著真空度的不斷增加，水分逐漸減少，穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的總量逐漸增加，在真空度為-0.08Mpa下，穿心蓮干浸膏的水分以及穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的總量均最好，結果見表3。

3.2.4 pH值的考察

結果表明， pH值對穿心蓮干浸膏的水分以及穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的總量的影響不大，結果見表4。

因此，選擇干燥溫度、干燥時間、真空度作為正交試驗的考察指標。

3.3 干燥條件的多因素實驗研究

為了考察多因素、多水平對穿心蓮干浸膏的干燥工藝的綜合影響，依照單因素的考察結果，采用正交試驗的方法，對影響干燥效果的主要因素干燥時間、干燥溫度、真空度進行考察，以確定各因素最佳水平。

干燥時間、干燥溫度、真空度均設計3個水平，采用L9（33）正交表進行試驗，因素與水平考察表見表5，正交表見表6。

試驗得到的穿心蓮干浸膏按本文2.2項的方法測定穿心蓮干浸膏的水分，按本文2.3項的方法穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的總量，正交試驗結果見表6。

數據表明，對水分來說，極差最大的是A因素，其次是B因素，最小是C因素，最優組合為A3B3C3，對穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯總量來說，極差最大的是C因素，其次是A因素，最小是B因素，最優組合為A1B2C3;考慮到A1下水分達不到要求，較難干燥，而A3穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯總量又比較低，而且由方差分析表（水分）、（含量）可知，對于水分來說，因素A在 0.05水平上差別極顯著，而因素B、C差別不顯著;對于含量來說，因素A、C在0.01水平上差別極顯著，因素B差別不顯著，綜合上述分析知，最優組合為A2B2C3，即最佳干燥工藝為：干燥溫度為110℃，干燥時間為8h，真空度-0.08Mpa。

3.4 驗證試驗

根據正交試驗優選的最佳干燥條件，制備3份穿心蓮干浸膏，以穿心蓮干浸膏水分含量和穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯總量為考察指標，進行三批干燥工藝條件驗證，結果見表7。結果表明，穿心蓮干浸膏的水分、穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯總量均穩定。

4結論與討論

4.1 穿心蓮干浸膏干燥的試驗結果表明，影響干浸膏含水量最大的因素是干燥溫度，影響穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯總量最大的因素是真空度。本文經正交試驗優選得到干燥最佳工藝條件為：干燥溫度為110℃，干燥時間為8h，真空度-0.08Mpa。在此條件下，穿心蓮干浸膏的穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯總量最大，且水分含量在5%以下。

4.2通過三批驗證試驗證明，穿心蓮干浸膏的水分及穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯總量均穩定，表明干燥工藝可行。

4.3本試驗采用雙波長高效液相色譜法同時測定穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的含量。分析速度快、準確度高、重復性和精密度良好，為以穿心蓮為主要原料的中成藥的工藝優化及質量評價提供了數據支持。

參考文獻：

[1]顏玉貞， 謝培山.穿心蓮質量控制的再評價[J].中藥新藥與臨床藥理， 1998， 9（ 4） ： 204.

[2]陳麗霞，曲戈霞，邱 峰.穿心蓮二萜內酯類化學成分的研究[J].中國中藥雜志，2006，31（ 19） ： 1594

[3]楊東升，陳松光，歐陽惠芳，等 .穿心蓮流膏中穿心蓮內酯類成分在烘干過程中的變化[ J ].中成藥，2003，25（ 11） ： 869.