兒童重癥肌無力相關抗體檢測及其臨床意義

王蕊艷，陳輝，黃志新，鐘建民

（江西省兒童醫院神經內科，南昌 330006）

重癥肌無力（Myasthenia Gravis，MG）為臨床上較為常見的機體免疫性疾病，其是由相關免疫抗體介導的肌肉神經突觸在傳遞過程中發生障礙導致的一類疾病[1]。臨床主要表現為晨輕暮重、休息后減輕、活動后加重，有些患者胸部CT檢查時發現有胸腺瘤或胸腺增生，血清檢查AchR抗體滴度有明顯升高，并對其肢體骨骼肌群、延髓及眼部產生嚴重影響[2-3]。兒童重癥肌無力相較于成人有眾多不同之處，成人平均發病率為8.0～20.0/10萬人[4]，在40歲之前，女性發病率高于男性，40～50歲男女發病率相當，50歲之后，男性發病率略高于女性；兒童發病率約0.3-2.8/10萬[5]，起病年齡較?。ㄐ律鷥杭纯砂l?。?，1～5歲居多，無顯著的性別差異，兒童合并胸腺瘤或胸腺增生少見，以眼肌型多見[6-7]。不同地域兒童其發病率也有較大差異，中國大陸的兒童期重癥肌無力的發病率及重癥比例不僅遠遠高于美國、歐洲和非洲等國家，也高于同為亞洲的日本和臺灣等其他國家和地區[8]。重癥肌無力發病機制與抗體有關[9]，如肌肉特異性酪氨酸激酶抗體(MuSK-Ab)、乙酰膽堿受體抗體(AChR-Ab)、蘭尼堿受體抗體(RyR-Ab)、連接素抗體(Titin-Ab)等。自身抗體在MG的發病機制中起了很重要的作用，其與MG的發病年齡、性別、地域差異、臨床分型、治療及預后相關，因此抗體檢測是診斷中的重要項目[10]?；诖?，本研究對重癥肌無力患兒的MuSKAb、AChR-Ab、RyR-Ab、Titin-Ab水平進行檢測，并探討上述抗體的臨床意義，報道如下。

1 臨床資料和方法

1.1 臨床資料 選取我院2018年1月~2021年7月期間就診的重癥肌無力患兒88例為研究對象。納入標準：診斷與患兒重癥肌無力診斷標準[11]相符，新斯的明和疲勞試驗都呈陽性；AChR-Ab試驗呈陽性；胸部MR或CT檢查發現有胸腺腫瘤或胸腺肥大者；單纖維肌電圖項目檢查時Jitter不小于55μs或肌電圖呈衰減效應（多次刺激），或阻滯；年齡低于18歲，性別不限；臨床資料完整者；知悉本研究內容，且簽定知情同意書。排除標準：合并嚴重肝、肺、腎、心等重要器官功能疾病者；其他原因導致的肌肉神經損傷者；年齡大于18歲；臨床資料不完整者。本研究通過我院倫理委員會審批。

1.2 方法 所選患者均于清晨空腹抽取4 mL外周血置于抗凝管中，經離心機離心后，取上清液后放置在-80℃備用。以酶聯免疫分析法對MuSK-Ab、AChR-Ab、RyR-Ab、Titin-Ab指標進行檢測，抗AchR抗體酶聯吸附檢測試劑盒由英國RYR公司提供、抗Titin抗體與抗Musk抗體酶聯吸附檢測試劑盒均由德國AESKU.GROUP公司提供、抗RYR抗體酶聯吸附檢測試劑盒由武漢基因美科技有限公司提供，檢測過程嚴格以說明書上步驟進行。結果判定標準：MuSK-Ab：樣本滴度值≥15 U/mL（陽性）；AChR-Ab：樣本滴度值≥0.45 nmol（陽性）；RyR-Ab：樣本OD值≥臨界值（陽性）；Titin-Ab：樣本OD值≥15 U/mL（陽性）。

1.3 分型標準 以Ossermen改良法分為：I型(眼肌型)病變僅在眼外肌受累；II型(全身型)表現為眼、肢體和面肌無力或全身無力合并咽喉肌無力（球麻痹）；III型(暴發型)患者突發全身無力，并發生肌無力現象；IV型(遲緩型)病程較為反復，發病時間在2年以上，是由I型或II型緩慢發展而來；V型（肌萎縮型）。

1.4 統計學方法 采用SPSS 24.0對檢測數據進行分析，計數資料以[n（%）]表示，組間比較以χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 臨床資料 本研究中重癥肌無力患兒88例，男34例（38.64%），女54例（61.36%），平均年齡為（5.61±1.35）歲，病程在2個月~6年，平均病程為（3.22±0.21）年，BMI為（22.34±1.52）kg/m2?；純汉喜l生甲亢5例（5.68%）

2.2 患兒發病年齡及臨床分型 88例患兒中年齡在5歲以下患兒43例（48.86%），年齡在5~10歲患兒有35例（39.77%），10~18歲患兒有10例（11.36%）。根據Osserman分型將88例患兒分為Ⅰ型81例（92.05%），Ⅱ~Ⅲ型7例（7.95%）。

2.3 患兒外周血相關抗體檢查結果 88例患兒所檢測抗體結果：MuSK-Ab滴度最低值＜0.01 U/mL，最高值11.23 U/mL，均為陰性（＜15 U/mL）；AChRAb樣本滴度值最低值＜0.01 nmol，最高值＞20.00 nmol，其中≥0.45 nmol定為陽性；RyR-Ab樣本OD值≥臨界值（陽性）；Titin-Ab低度最低值＜0.01 U/mL，最高值18.51 U/mL，其中≥15 U/mL定為（陽性），觀察任一抗體陽性的患兒63例（71.59%），其中單純AChR-Ab陽性病例數為57例（64.77%）、RyR-Ab陽性29例（32.95%）、Titin-Ab陽性9例（10.23%），88例患兒中MuSK-Ab指標均為陰性，Ⅰ型分型患兒的AChR-Ab、RyR-Ab、Titin-Ab指標呈陽性的人數明顯高于Ⅱ~Ⅲ型患兒，但Ⅰ型分型患兒在AChR-Ab、RyR-Ab、Titin-Ab指標的陽性率明顯低于Ⅱ~Ⅲ型患兒，對比差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 患兒外周血相關免疫指標檢查結果

2.4 患兒外周血抗體合并陽性情況 88例患兒中AChR-Ab+RyR-Ab+Titin-Ab 3種免疫抗體均為陽性患兒6例（6.82%）、AChR-Ab+RyR-Ab 2種免疫抗體為陽性患兒12例（13.64%）、RyR-Ab+Titin-Ab 2種免疫抗體為陽性患兒1例（1.14%）、AChRAb+Titin-Ab 2種免疫抗體為陽性患兒1例（1.14%）?；純汉喜?種免疫抗體陽性率與合并3種免疫抗體陽性率比較，差異無統計學意義（P＞0.05），而患兒合并AChR-Ab+RyR-Ab的陽性率明顯高于單一RyR-Ab+Titin-Ab和AChR-Ab+Titin-Ab，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 患兒外周血免疫抗體合并陽性情況

3 討論

重癥肌無力主要累及患者的肌肉神經接頭突觸后膜，造成肌肉神經介質傳遞發生異常，其臨床癥狀多為易疲勞，可累及眼外肌、延髓肌群及全身骨骼肌，病情嚴重者會出現肌無力危象，對患者的生命健康造成嚴重威脅[12-13]。此病病因及發病機制較為復雜，發病機制可能由遺傳及環境多種因素相互作用導致的[14]。有研究證實[15-16]，此病的主要發病機制為患者機體內分泌的AChR-Ab，其在特殊情況下和乙酰膽堿受體互相結合，進而阻斷了神經-肌肉接頭處信號傳導而引發重癥肌無力的發生。

據文獻報道[17]，18周歲以上人群患病率為8~20/10萬[5]，女性患者年齡在40歲前，其發病率高于男性，而40~50歲期間，男女患病比例相當，但在50歲以后，男性患病率明顯高于女性，但兒童肌無力發病情況與成人略有不同。本研究結果顯示，88例患兒中男性34例（38.64%），女54例（61.36%），女性高于男性，發病年齡在5歲以下患兒43例（48.86%），5~10歲患兒有35例（39.77%），10~18歲患兒有10例（11.36%），說明重癥肌無力患兒集中在10歲以下兒童，尤其5歲以下兒童發病率最高，與肖君等[18]研究結果一致，我國兒童重癥肌無力的發病年齡較低，將近半數比例為5歲以下。也有研究證實[19]日本重癥肌無力患兒的發病年齡在5歲前也是發病高峰期，但發病率遠低于我國。

本研究結果顯示，根據Osserman分型將88例患兒分為Ⅰ型81例（92.05%），Ⅱ~Ⅲ型7例（7.95%），抗體陽性的患兒63例（71.59%），88例患兒中MuSK-Ab指標均為陰性，Ⅰ型分型患兒的AChR-Ab、RyR-Ab、Titin-Ab指標呈陽性的人數明顯高于Ⅱ~Ⅲ型患兒，但Ⅰ型分型患兒在AChRAb、RyR-Ab、Titin-Ab指標的陽性率明顯低于Ⅱ~Ⅲ型患兒（P＜0.05），與既往研究[20]結果相符，患者的病情越嚴重，抗體陽性率越高。本研究結果顯示，患兒合并2種免疫指標陽性率與合并3種免疫指標陽性率比較，差異無統計學意義（P＞0.05），說明患兒合并發生2種免疫指標陽性率與患兒合并發生3種免疫指標陽性率差異性不大，而患兒合并AChR-Ab+RyR-Ab的陽性率明顯高于單一RyR-Ab+Titin-Ab和AChR-Ab+Titin-Ab（P<0.05），是否具有臨床意義需要進一步研究。

綜上所述，血清抗體檢測是診斷MG的主要方式，聯合檢測可降低因單項檢測出現的漏診和誤診；同時可作為判斷患者病情嚴重程度的指標，為臨床進一步開展針對性治療提供重要依據。