長鏈非編碼RNA在膠質瘤中的研究進展

楊 帆綜述 張劍寧審校

膠質瘤是顱內常見的原發性腫瘤。2016 年，WHO 中樞神經系統腫瘤分類修訂中膠質瘤增加了分子病理特征，如IDH 突變、1p/19q 共缺失和H3K27M突變等，整合診斷為將來的分子靶向治療提供更多依據。研究發現膠質瘤長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）存在表達異常，而且，lncRNA 參與調節膠質瘤多種生物學行為，有望成為膠質瘤診療新的分子學標記物和治療靶點。本文就lncRNA在膠質瘤中的生物學調控作用、作為分子學標記物和潛在治療靶點等研究進展作一綜述。

1 lncRNA的概述

lncRNA 是一類長度200 nt～100 kb 的長轉錄本RNA，由RNA聚合酶Ⅱ轉錄，無開放讀碼框，不編碼蛋白質。根據其與編碼基因的位置分為5類：正義、反義、雙向、內含子和基因間lncRNA。lncRNA 在各種細胞生物學過程中發揮重要作用：在細胞核內，lncRNA通過影響啟動子區活性、介導染色質重構以及組蛋白修飾、干擾信使RNA（messenger RNA，mRNA）剪切調節基因轉錄；在細胞質中，lncRNA 影響mRNA穩定性、競爭內源性RNA、mRNA翻譯和蛋白活性調節蛋白表達。越來越多的研究報道lncRNA在多種疾病中發揮重要調節作用，異常表達的lncRNA在膠質瘤的發生與進展中至關重要。

2 lncRNA調節膠質瘤惡性生物學行為

惡性腫瘤發生與進展主要因為腫瘤細胞具有持續增殖、侵襲和轉移、抵抗凋亡和促進血管生成等能力。全基因組RNA 測序發現膠質瘤多種lncRNA 存在差異表達，高/低表達的lncRNA 可作為促癌/抑癌RNA,在膠質瘤發生與進展中發揮重要調節作用。Zhao 等報道lncRNA FOXD2-AS1 在膠質瘤中表達增高，而且表達量與腫瘤大小和病理級別呈正相關，抑制FOXD2-AS1 表達降低膠質瘤細胞增殖和克隆形成能力，而且，FOXD2-AS1 通過與EZH2 蛋白結合，影響P53蛋白招募，調節腫瘤細胞的增殖能力。

膠質瘤預后差，不僅僅因為異常的細胞增殖，還在于腫瘤向正常腦組織浸潤生長及對放化療抵抗。Huang等發現lncNCK1-AS1在膠質瘤中高表達，通過吸附miR-138-2-3p 促進含三聯基元24 表達，從而活化Wnt/β-catenin 信號通路，促進膠質瘤U251細胞增殖、轉移、侵襲，抑制細胞凋亡。O6-甲基鳥嘌呤-DNA-甲基轉移酶（O6-methylguanine-DNA methyltransferase，MGMT）表 達 影 響 替 莫 唑 胺（Temozolomide，TMZ）化療療效。lncFOXD2-AS1 在復發膠質瘤中表達增高，下調lncFOXD2-AS1 促進MGMT 啟動子甲基化，增加膠質瘤細胞對TMZ 化療敏感性。lncRNA-XIST 在膠質瘤組織和細胞系中表達增高，通過抑制miR-29c表達，調節MGMT和轉錄因子特異蛋白1表達，影響TMZ化療。

高級別膠質瘤微小血管豐富，血管新生在膠質瘤惡性進展中同樣至關重要。Jia 等發現lncRNA H19 在膠質瘤組織血管中表達升高，下調H19 表達抑制膠質瘤相關內皮細胞增殖、遷移和成管能力，H19 通過結合miR-29a 致Vasohibin-2 表達升高，促進腫瘤血管生成。lncRNA 在維持膠質瘤干細胞干性和分化、血-腫瘤屏障滲透性、免疫環境調節和腫瘤代謝等方面也發揮重要調節作用。

3 lncRNA作為膠質瘤診療的分子學標記物

目前，膠質瘤的整合診斷增加了分子學特征，分子學特征有助于膠質瘤的病理診斷、分類分層和指示臨床預后，將進一步應用于早期診斷和靶向治療，尤其在組織學病理缺乏典型膠質瘤分化特征結構時，分子學特征有助于提供更多關于診斷和指示預后的信息。Li等通過分析美國癌癥基因組數據庫中所有膠質母細胞瘤（glioblastoma multiforme，GBM）樣本RNA測序、甲基化、拷貝數差異、突變等因素與病人預后的關系，發現5個lncRNA 表達差異明顯與生存期和臨床預后相關，并通過分析中國膠質瘤基因組數據庫信息加以驗證，其中linc00152在膠質瘤中發揮重要作用，因此，lncRNA 可作為指示GBM 生存期和預后的生物學標記物。Guardia等發現前體神經元和間充質膠質瘤干細胞lncRNA表達不同，有助于膠質瘤亞型分層和解釋臨床病人不同的預后。另外，膠質瘤lncRNA H19表達水平可提示腫瘤對放療的敏感性，并通過調節免疫細胞浸潤影響病人預后。膠質瘤lncRNA PEG10表達明顯增高，與腫瘤病理級別、病人生活質量評分和生存期相關，而且PEG10 表達量越高病人復發風險越高。Min 等發現miR210HG 在膠質瘤組織中表達明顯增高，而且，膠質瘤病人血清miR210HG表達顯著增高。

4 lncRNA在膠質瘤治療中的潛在應用

lncRNA 通過不同方式調節多條信號轉導通路影響膠質瘤惡性進展。EZH2和miR-21在膠質瘤中作為促癌基因發揮重要作用，而MEG3 為膠質瘤的抑癌基因，抑制ZEH2 和過表達MEG3 明顯抑制U251細胞增殖、侵襲和遷移能力，而且miR-21也可與MEG3結合影響其生物學調控功能，提示MEG3可作為膠質瘤治療的新靶點。Liu等發現通過反義寡核苷酸鏈靶向下調lncGRS-1表達，可有效增強膠質瘤細胞放療敏感性，抑制腫瘤生長。高表達lncRNA MIR155HG的膠質瘤，預后更差，MIR155HG可影響腫瘤區域免疫細胞和免疫分子浸潤，尤其是程序性細胞死亡蛋白1和其配體、細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4 表達，提示MIR15HG 有望作為調節免疫治療療效的新靶點。

綜上所述，lncRNA參與調節膠質瘤的惡性生物學行為，特異性lncRNA有望作為膠質瘤診斷、分類、治療和指導預后的新的分子學標志物應用于臨床。