基于西藏龍膽的種植及其功效的研究綜述

魏秀娟，周 鳳，次仁措姆，邊巴吉拉

（西藏昌都市農業科學研究所，西藏 昌都 854000）

西藏龍膽科植物大約有80 屬，700 種，主要分布在溫帶，我國有22屬，大約425種，而在我國西藏現有14 屬，約158 種［1］。我國幾乎一半的龍膽植物均可在西藏搜索到。其中如西藏特產龍膽花，生長于海拔4 000 m以上的高原牧場，食之可達清肝，具有清熱解毒，治療目赤、頭痛、咽炎，以及祛斑美容等功效。由于西藏特殊的環境，包括溫度低，日照長，晝夜溫差大，使得其種植的方式也需有一定的改進，在2011 年初，西藏自治區高原生物研究所經過3 年人工栽培技術研究，首次成功培育出西藏龍膽種苗20 多萬株，栽培面積達0.67 hm2，也為后續西藏龍膽的栽培方式提供了技術支持。但是近年來，由于過度采挖和生境破壞，致使龍膽資源日益枯竭，國家也將此列為三級保護的藥材。

了解其生物學特性是保護其天然資源的重要前提，這也是種植龍膽的前提之一。龍膽為種子繁殖，但是關于龍膽種子萌發特性的研究非常少，目前只有1 篇文獻。而對于其功效的研究由來已久，《日華子本草》記載：“治客忤，疳氣，熱病狂語，瘡疥，明目，止煩?！痹凇侗窘洝分幸灿羞@樣的記述：“主骨間寒熱，驚瘸邪氣，續絕傷，定五臟，殺蠱毒?！弊鳛樗幉?，龍膽的功效很多，需求量也很大，因此研究其種植技術和藥用功效具有十分重要的實踐意義。

1 龍膽種植的技術研究

1.1 種子萌發特性研究

祿亞洲等［2］分別利用不同濃度的NaCl，PEG-6000，植物外源生長激素GA3 及6-BA 溶液處理，并發現NaCl，PEG-6000和6-BA溶液均抑制龍膽種子的萌發，而適宜濃度的GA3 處理和GA3 與6-BA浸種能顯著促進其萌發，得出了種植時用300 mg/L GA3 將西藏龍膽的種子浸種24 h 后再播種可提高萌發率的結論，此結論的得出為西藏龍膽的人工種植提供了非常重要的參考價值。

另外，祿亞洲等［3］在處理種子萌發之前已經就西藏龍膽種子如何進行消毒進行了研究，發現先用75%乙醇消毒15 s，后用2% NaClO 消毒15 min 的效果較好，發芽率最高。從其前期研究的結果來看，對于西藏龍膽種子的特性總體分析就是其對干旱脅迫及鹽脅迫較為敏感，隨著濃度增高種子活率下降。在人工進行種植時應該適時適當控制土壤鹽分和補充水分，這也對龍膽種植有較大的指導意義。

1.2 西藏龍膽共生系統研究

植物根際中存在大量的微生物，根系微生物通過植物根系分泌物，黏液及脫落的根細胞影響根系活力，而這些土壤微生物在土壤功能及植物健康中起到重要作用。2020年，高嵩等［4］就不同種植年限龍膽草根際土壤真菌群落進行了高通量測序，而早在2012年，段雙全等［5］已經在西藏龍膽根內進行了寄生附球霉屬真菌菌株特性的研究，發現分離得到的菌株屬半知菌亞門絲孢綱瘤座孢目附球霉屬，但還存在一定的差別。這些菌株的發現對于進一步研究西藏龍膽的生長環境有一定的參考意義。

1.3 西藏龍膽的種植研究

孫鳳環等［6］在2008 年發表的關于西藏龍膽的人工栽培方面的研究指出，龍膽喜濕，在5～10 ℃時即可在根部出芽，12～18 ℃時可開花結果，15～25 ℃地下根增粗增快。冬季-15 ℃以上根狀莖保持活率。在栽培地方面，種植龍膽需要平坦地塊，土壤以砂質為佳。另外，采種應在9 月下旬至10 月上旬，在播種前10～15 d，土壤及種子均需消毒，土壤利用1%代森鋅噴灑地表，用地膜覆蓋7 d，去除藥味即可，種子用1%高錳酸鉀溶液浸泡30 min，后期進行病蟲害的防治，如褐斑病為龍膽的常見病害。種植后經過3年進行采收。

在2010 年由蔣思平等［7］繼續研究的西藏龍膽人工種植的技術項目達到了較好的種植效果，西藏龍膽的發芽率達到了88%，此項目也在一定程度上調整了西藏農業結構，為農戶帶來收益，也在藏藥廠投入生產。

1.4 龍膽種子保存研究

龍膽的種子資源的再生在種植環節也較為重要，其中對其愈傷組織的誘導在對龍膽的保存及進一步研究次生代謝產物起到了關鍵的作用?？山梃b晉海軍等［8］對于紅花龍膽愈傷組織的誘導及其生理生化特性的研究，對其植物進行組培，篩選出了愈傷組織誘導最佳的培養基：MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.43 mg/L+KT 0.71 mg/L，誘導率達到了97.62%，并且提出了不同激素對于愈傷組織誘導率的影響從大到小順序為NAA，6-BA，KT，為龍膽的再生體系的研究提供了基礎資料。

2 西藏龍膽的功效研究

2.1 龍膽功能性研究

由于野生龍膽種子資源的稀缺，關于種植龍膽的研究為后期進一步研究及繁育西藏龍膽提供了便利。在西藏，龍膽又名秦膠、左扭、右擰等，西藏龍膽屬于藏藥中邦見類藥材，具有清濕熱、瀉肝膽火等等功效，可用于治療感冒發燒、肺炎及肝損傷，但是龍膽還有潛在的功效需要研究。首先，對于龍膽藥材進行不同等級的劃分，方法是收集不同產地的龍膽藥材樣品，對其外觀進行分類，分類項分別是藥材長度、須根數、直徑和色度。結果發現，龍膽藥材外觀性狀與龍膽內在成分呈正相關性，長度越長，須根越多，直徑越大及顏色越淺，其內在成分如馬錢苷酸就越多，因此將龍膽藥材分為兩個等級，對建立其等級標準具有科學指導意義［9］。

就其本身的功能而言，藏藥龍膽的功效主要是集中于氣管炎咳嗽等方面，這也是已知的研究最多的功效之一。甘肅藏藥十五味龍膽丸對于慢性支氣管炎有著關鍵的治療作用［10］，在臨床效果上的研究也十分重要，利用對照組（常規治療）和研究組（藏藥十五位龍膽龍膽+常規治療）進行分別給藥，結果發現在咳嗽及住院時間上，研究組明顯優于對照組且不良反應無統計學意義［11］。其對治療變異性哮喘也有一定的臨床改善效果［12］。另外藏藥中十味龍膽顆粒治療急性氣管-支氣管炎也有優良的效果，可以改善肺功能，促使癥狀快速消失。在臨床上選取了急性氣管炎-支氣管炎患者作為研究對象［13］，分為對照組及研究組，結果發現研究組較對照組咳嗽，肺部癥狀改善時間更短，又揭示了其臨床上的重要應用。

對于龍膽功效的探究，還有很多不同的方向。索朗等［14］在西藏龍膽和帕里龍膽這兩種龍膽科植物治療肝損傷的功效之間進行了比較。他們利用樣品1（SL-1，帕里龍膽根部提取浸膏）及樣品2（SL-2，西藏龍膽地上部分提取浸膏）針對小鼠及大鼠給藥后，發現兩種龍膽對CCl4致急性肝損傷小鼠具有一定的肝損傷保護作用，而對于CCl4亞急性肝損傷大鼠沒有明顯的保護作用，兩者也表現出相似的功效。這一發現對于臨床藥用替代藥具有借鑒作用，方便繼續進行其功效的研究。

2.2 龍膽的有效成分研究

分析龍膽的功能，進行進一步探究，找出其中一些功效成分的含量。在一些研究中，發現各種龍膽植物中的有效成分各不相同。2015 年，楊芳等［15］用HPLC 法（色譜）對藏藥大花龍膽中的龍膽苦柑、異紅草苷、芒果苷及齊墩果酸的含量進行了測定；而2017 年，趙露等［16］又在龍膽草有效成分研究的時候分別測定了龍膽草樣品中龍膽苦柑、獐牙菜柑、獐牙菜苦柑、熊果酸和齊墩果酸5 種有效成分的含量，將其表型性狀與有效成分之間的相關性進行了分析，發現龍膽草莖色及葉色等性狀與其有效成分存在一定的相關性，這也為龍膽植物株選或特征類型篩選提供了參考。這些測定活性成分也成為龍膽功效研究的參考成分［17］。

對龍膽功效成分的研究結果對篩選評估質量良好的龍膽也有一定的借鑒作用。在龍膽中分別測定有效成分的含量，利用化合物的含量多少來整體評價龍膽藥材的優劣［18］。

2.3 西藏龍膽功效的實際應用研究

對于龍膽功效真正的應用，研究其天然抗氧化活性成分有望對呼吸道感染有輔助治療的作用，也為臨床治療提供了思路。呼吸道感染中巨噬細胞激活與細胞中的活性氧信號相關，包括病毒感染。天然植物活性化合物利用傳統的化學成分提取，分離及結構鑒定的方法費時耗力，而張國英等［19］利用色譜在線分析方法對藏藥大花龍膽的抗氧化活性成分進行快速鑒定篩選，發現大花龍膽柑B 的空間構象與烏奴龍膽A 和E 的差距較大，揭示了這些差異可能導致抗氧化活性的差異。

最近3 年流行的新型冠狀病毒肺炎一直牽動著全國人民的心，而由于其變異快的特性，針對性藥物的研究往往跟不上變異的速度。對于這個局面，學界在研究中藥內是否具有能夠緩解新冠癥狀的成分，成都中醫藥大學的趙芡等［20］探尋了藏藥三味龍膽花片對新冠肺炎的作用，分別檢查了其中的白花龍膽和甘草及蜂蜜干膏的化學成分，通過數據庫查詢了化學成分的對應靶點，構建了化合物及靶點網絡，結果發現藏藥三味龍膽可通過多成分，多靶點及通路的協同作用對抗新型冠狀病毒肺炎起到作用。

3 討論

目前對于龍膽的研究越來越多，通過其培育方式的優化及進一步進行功效成分的分析愈發重要。種植龍膽的技術也已經進行較為深入的研究，對于龍膽進一步功效的探索起到了關鍵作用。對其功效的研究結果在臨床上的重要性日益增加，對于治療一些疾病也具有借鑒意義。龍膽的種類較為豐富，雖然對于西藏龍膽的研究較少，但這一分支已經成為了藏藥中不可或缺的一部分。龍膽種植在增加當地農戶收入的同時，其“渾身是寶”的特點也會使其更多地應用到醫學治療中，造福于患者。