菊甘藍多糖片的制備工藝及含量測定方法研究

桑 野，關 皎，潘 旭，朱鶴云，馮 波 （吉林醫藥學院藥學院，吉林 吉林 132013）

糖尿病和高血脂是臨床十分常見的疾病，這些疾病會引發多種疾病癥狀與體征，從而對人體健康造成不同程度的損害[1]。隨著時代的發展和進步，人們的健康意識不斷增強，開始從治療疾病向預防疾病轉變，這一時代背景極大地促進了保健品行業的發展。植物多糖具有較多的生物功能，例如增強人體免疫力、降低血糖、促進造血、抗利尿、抗衰老、抗菌抗炎、抗腫瘤等[2-3]。研究表明，菊芋多糖具有降糖、抗氧化等作用[4-5]；絞股藍多糖具有抗炎、抗腫瘤、降血壓、降血脂、降血糖、抗衰老、抑制血栓形成等作用[6]；甘草為藥食兩用物品，其多糖具有抗氧化、降血糖等作用[7-8]。以上述植物多糖為基礎，制備了具有降糖、降脂作用的多糖片劑，具有方便運輸、儲藏、便于攜帶、服用方便等優點。本次研究擬制備一種具有降低血糖、血脂的菊甘藍多糖片，該片劑主要以菊芋、絞股藍、甘草多糖為主原料，其他輔料相復配，經研磨、過篩、制粒、壓片而成，并對其含量進行測定，以期為其工業化生產提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

菊芋粗多糖、絞股藍粗多糖、甘草粗多糖（實驗室自制）；硬脂酸鎂（北京澤平科技有限責任公司）；聚乙烯比咯烷酮[PVP（K30）]（武漢普洛夫生物科技有限公司）；羧甲基淀粉鈉（CMS-Na，江蘇奧福生物科技有限公司）；乙醇（濟南普萊華化工有限公司）；微晶纖維素（山東六佳藥用輔料股份有限公司）；葡萄糖（江蘇成謙生物科技有限公司）；濃硫酸（分析純，深圳市華亞新材料有限公司）；苯酚（分析純，山東旭晨化工科技有限公司）；蒸餾水（實驗室自制）。

電子天平（ME54，海圣科儀器設備有限公司），單沖式壓片機（TDP-5，上海天峰制藥設備有限公司），片劑四用測定儀（78X-2，天津市嘉鑫海機械設備有限公司），紫外分光光度計（UV-1800，上海昂拉儀器有限公司）。

1.2 處方篩選及優化

1.2.1 苯酚硫酸法處理

因所制片劑主要成分為多糖，而多數輔料為多糖類，為防止對主成分紫外分析產生影響，故對多種輔料進行苯酚-硫酸法處理，測定吸光度。吸光度值越小，對多糖紫外吸收影響越小，從而確定菊甘藍多糖片劑處方中輔料組成。

1.2.2 單因素試驗

通過單因素試驗篩選填充劑、崩解劑、黏合劑的用量，以片劑外觀、黏合度、崩解時限和硬度為評價指標，確定菊甘藍多糖片劑最優處方。

1.3 制備工藝確定

使用普通片劑的幾種常用制備方法，對苯酚硫酸法和單因素試驗篩選出的輔料種類和用量進行片劑的制備，根據輔料的性質、粉體或顆粒的流動性及片劑的成型性選擇最佳制備方法，并確定輔料和原料藥的添加順序。

1.4 片劑一般檢查

1.4.1 片重差異檢查

取3 批樣品，每批抽取20 片，精密測定總重量，計算平均片重。再分別精密測定各片重量，每片重量與平均片重比較不得超出±5%，要求超出差異限度的片劑不得超過2片，并不得有1片超出限度1倍。

1.4.2 硬度檢查

取3 批樣品，每批抽取10 片，用片劑四用測定儀測每片硬度，要求硬度在45~55 N之間。

1.4.3 崩解時限檢查

取3 批樣品，每批分別抽取6 片置吊籃玻璃管中，啟動片劑四用測定儀檢查崩解時間，各片均應在15 min內全部崩解。

1.5 含量測定

1.5.1 方法的建立

應用紫外分光光度計采用苯酚硫酸法進行菊甘藍多糖片的含量測定。檢測波長為490 nm。

1.5.2 溶液配制

對照品溶液制備：稱取葡萄糖對照品0.1005 g，加入到100 mL容量瓶中，以水為溶劑，稀釋并定容至刻度，搖勻，即得濃度為1.005 g/L 對照品儲備液；精密量取不同體積（0.0、0.8、1.6、2.4、3.2、4.0 mL）的上述對照品儲備液，加入到50 mL 容量瓶中，得到濃度分別為0、16.08、32.16、48.24、64.32、80.40 mg/L 對照品溶液。供試品溶液制備：取菊甘藍多糖片劑5片研磨成粉，取樣品1 g，加入適量的75%乙醇溶液進行溶解、搖勻、過濾。濾液轉移至50 mL容量瓶中，以水為溶劑稀釋至刻度，作為供試品溶液。

1.5.3 標準曲線與線性范圍

吸取不同體積（0、16.08、32.16、48.24、64.32、80.40 mg/L）的對照品溶液各1 mL，轉移至10 mL 容量瓶中（苯酚硫酸法處理），測定吸光度A（檢測波長：490 nm），繪制標準曲線（橫坐標為對照品濃度，縱坐標為吸光度），計算回歸方程。

1.5.4 精密度實驗

吸取濃度為32.16 mg/L 的對照品溶液1 mL，測定6次吸光度，計算RSD值，RSD值應小于2%。

1.5.5 穩定性試驗

取供試品溶液，室溫下放置不同時間（0、2、4、8、12、24 h）后測吸光度，計算吸光度的RSD 值應小于2%。

1.5.6 回收率試驗

分別量取供試品溶液9 份，每份0.5 mL，置于9個容量瓶中。分別加入低、中、高濃度（16.08、48.24、80.40 mg/L）的對照品溶液各0.5 mL，每個濃度各3份，測定吸光度，計算回收率及RSD 值，RSD 值應小于2%。

1.5.7 含量測定

按“1.5.2”方法制備三批樣品溶液，苯酚硫酸法處理，測定吸光度，帶入回歸方程計算多糖含量。

2 結果

2.1 處方篩選及優化

2.1.1 輔料種類篩選

對淀粉、糊精、微晶纖維素、PVP（K30）、蔗糖、硬脂酸鎂等多種輔料進行苯酚-硫酸法處理，紫外吸收情況見表1。結果顯示，微晶纖維素、PVP（K30）、硬脂酸鎂紫外吸光度值較小，對多糖紫外吸收影響較小，可以用作輔料。因此確定菊甘藍多糖片劑處方中輔料組成，填充劑為微晶纖維素，黏合劑選擇PVP（K30），硬脂酸鎂為潤滑劑，考慮成本因素，崩解劑選擇CMS-Na。

表1 輔料苯酚-硫酸法測定結果Tab.1 Determination results of auxiliary material phenolsulfuric acid method

2.1.2 填充劑用量篩選

以外觀、硬度、崩解時限為考察指標，選擇最佳微晶纖維素用量。結果顯示，微晶纖維素用量逐漸增多時，外觀變整潔，且硬度及崩解時間相應減小。當微晶纖維素用量為4 g 時，外觀及硬度符合片劑要求，但崩解時間仍大于15 min，所以下一步對崩解劑CMS-Na的用量進行考察。

2.1.3 崩解劑用量篩選

以硬度和崩解時限為指標對片劑進行評價，選擇最佳CMS-Na 用量。因微晶纖維素也具有崩解作用，所以CMS-Na 用量不需太多。結果顯示，隨著CMS-Na 用量增加，片劑崩解時間減少，硬度減小。當用量為1 g時，崩解時間<15 min，硬度適中。

2.1.4 黏合劑用量篩選

以黏合效果、崩解時限和硬度為指標對片劑進行評價，從而選出最佳的PVP（K30）濃度。該片劑主料為多糖，本身黏合性較好，故黏合劑PVP（K30）需求不大。結果顯示，當PVP（K30）用量逐漸增加，片劑黏度增大，崩解時間及硬度也逐漸增大。當PVP（K30）濃度為1.5%時，黏度適中，且崩解時限和硬度符合要求。

2.1.5 處方確定

根據單因素試驗結果，確定最優處方：以20 g計，菊芋粗多糖10 g，甘草粗多糖3 g，絞股藍粗多糖2 g，微晶纖維素4 g，CMS-Na1g，聚乙烯吡咯烷酮濃度為1.5%，硬脂酸鎂0.2%。

2.2 制備工藝

制備方法選擇濕法制粒壓片法。將原料藥菊芋、甘草、絞股藍粗多糖及所有輔料分別研磨，加入微晶纖維素，過100目篩充分混勻，得到無結塊粉末。加入1.5% PVP（K30）溶液（溶劑為80%乙醇），制備軟材，制粒（18 目篩），50 ℃烘箱中干燥后整粒（10 目篩），最后加硬脂酸鎂，充分混合。將所得粉末用單沖壓片機壓片，即得菊甘藍多糖片。

2.3 片劑一般檢查

2.3.1 片重差異檢查

樣品片重檢查結果如表2 所示。3 批樣品（每批20片）總片重分別為8.02、8.09、8.04 g，平均片重分別為0.401、0.405、0.402g，因此3 批樣品每片的重量應分別在0.381~0.421 g、0.385~0.425 g、0.382~0.422 g范圍內，3批樣品均符合要求。

表2 片劑一般檢查結果Tab.2 General inspection results of tablets

2.3.2 硬度檢查

供試品硬度檢查結果如表2 所示，3 批樣品硬度均在45~55 N之間，平均硬度為51 N，符合要求。

2.3.3 崩解時限檢查

崩解時限結果見表2。結果顯示，3 批樣品均在15 min內崩解完畢，符合規定。

2.4 含量測定

2.4.1 標準曲線與線性范圍

根據對照品溶液吸光度A（檢測波長：490 nm），繪制標準曲線（橫坐標為對照品濃度，縱坐標為吸光度），計算得到回歸方程（A=0.009 7C+0.096 1；R=0.999 7）。由此可知，該方法在16.08~80.40 mg/L范圍內線性關系良好。

2.4.2 精密度實驗

根據精密度測定結果，RSD 為0.53%，符合相關要求，儀器精密度良好。

2.4.3 穩定性試驗

結果顯示，RSD為1.62%，樣品在24 h內穩定。

2.4.4 回收率試驗

結果顯示，菊甘藍多糖片的平均回收率為99.89%，RSD為1.03%，樣品回收率符合要求。

2.4.5 含量測定

含量測定結果如表3 所示，3 批樣品中，多糖含量平均值為0.215 g/片，RSD為0.22%。

表3 菊甘藍多糖片中多糖含量Tab.3 Polysaccharide content in chrysanthemum cabbage polysaccharide tablets

3 討論

多糖片主成分為多糖，黏性較大，且遇水黏合性更強，對崩解時間影響較大。此外，本著綠色健康的原則，應盡量添加較少的輔料。片劑制備中，填充劑直接選用主成分菊芋多糖，片劑崩解時間超過2 h，可能是由于多糖占處方比例過大，黏性太強。通過考察多種填充劑，微晶纖維素對多糖含量測定影響最小，考慮成本因素，崩解劑最終選擇CMS-Na。由于主成分本身黏性大，黏合劑PVP（K30）濃度也不需太高，以免發生黏沖、硬度過大等問題。通過對以上輔料進行單因素試驗考察，獲得最佳處方：每20 g 含有菊芋粗多糖10g，甘草粗多糖3 g，絞股藍粗多糖2 g，微晶纖維素4 g，CMS-Na 1g，加入1.5%聚乙烯吡咯烷酮適量，濕法制粒，得干顆粒后，加約總量0.2%硬脂酸鎂，壓片，即得。

濕法制粒壓片制備工藝得到的片劑具有外觀美觀、流動性好、耐磨性較強、壓縮成形性好等特點，是一種優良的片劑制備工藝。但濕法制粒壓片法過程較為復雜，需要使用較多的水和有機溶劑，并嚴格把控制粒條件和干燥溫度等參數。本試驗為保證片劑流動性，且減小輔料對多糖含量測定的影響，故黏合劑溶劑選擇80%乙醇，干燥溫度為50 ℃。

為了對菊甘藍多糖片劑的質量進行評價，根據中華人民共和國藥典（2020 版）對其一般性能進行檢查。經檢查制備的片劑的硬度、片重差異和崩解時限均符合標準。進一步建立了苯酚硫酸法處理采用紫外分光光度計進行含量測定方法，在使用硫酸苯酚法測定多糖時，由于反應的時間以及溫度會對溶液的顯色反應有一定的影響，從而導致誤差[11]。所以在實際測定過程中，應盡量保證反應時間與要求時間相符。最終得到多糖含量平均值為0.215 g/片。

綜上所述，通過本次試驗，篩選得出菊甘藍多糖片最佳處方與制備工藝，制成片劑含量均勻、性狀穩定、表面光滑圓整，為菊甘藍多糖片工業化生產提供數據，并為質量控制標準提供了可靠依據。