文心蘭組培苗繁育技術規程

羅遠華,葉秀仙,鐘淮欽,黃敏玲*

(1.福建省農業科學院作物研究所,福建 福州 350013;2.福建省農業科學院花卉研究中心,福建 福州 350013;3.福建省特色花卉工程技術研究中心,福建 福州 350013)

文心蘭(Oncidiumhybridum)又名金蝶蘭、舞女蘭或瘤瓣蘭等,是指蘭科文心蘭屬植物,主要分布于美國、墨西哥、巴拉圭、秘魯、巴西、牙買加、阿根廷等中南美洲的熱帶和亞熱帶地區[1]。文心蘭植株輕巧、花色豐富、花姿優美、部分品種具香味,適應性廣、花期長、觀賞與經濟價值高,在切花、盆花及景觀等方面應用廣泛,與蝴蝶蘭、石斛、大花蕙蘭并列為四大洋蘭,是世界重要的商品花卉。

近年來,文心蘭在福建、廣東、海南、云南、貴州等地得到快速發展,栽培面積不斷增加。但文心蘭優質種苗的生產嚴重滯后,采用傳統的分株方式繁殖種苗時不僅繁殖系數低[2],成本高,且種苗參差不齊,產品質量不穩定等問題普遍存在;組培繁育技術雖相對完善[3-5],但由于市場化品種的不斷更新,種苗工廠化、標準化生產程度較低,種苗供應不足等嚴重影響了文心蘭產業規模的提升。目前,還未見有關文心蘭組培苗繁育技術的國家標準和行業標準,為了規范文心蘭組培苗繁育技術,確保種苗質量,提高生產效率,在查閱相關文獻的基礎上,對多年來不同類型品種的組培繁育技術研究[6-8]進行了總結,提出了文心蘭組培苗繁育技術規程,并應用于生產,對提高優質種苗自給率,提升文心蘭產業競爭力等具有重要的現實意義。

1 組培苗繁育

1.1 母株選擇

符合需求;植株生長健壯、無病蟲害、無表型病毒特征、具有品種典型性狀。切取外植體前植株提前7～10 d停止澆水。

1.2 外植體選取

植株進入盛花期時,宜選用5～10 cm長的幼嫩花梗,或葉片未展開的嫩芽作為外植體。

1.3 外植體消毒

幼嫩花梗取材后,在超凈工作臺上先用75%(V/V)酒精浸濕的脫脂棉擦拭表面后置入無菌水中清洗1～2次,取出后剝除幼嫩花梗的苞片,然后置入0.1% HgCl2水溶液中振蕩消毒6～10 min,取出用無菌水沖洗4～5次,最后用無菌吸水紙吸干表面水分備用;嫩芽取材后,先用手術刀剝除外部較大的鞘葉,自來水沖洗30～60 min,接著在超凈工作臺上用75%的酒精振蕩浸泡20～30 s,用無菌水沖洗1～2次后,置入加了1～2滴吐溫-80的0.1% HgCl2水溶液中振蕩消毒6～10 min,無菌水沖洗3～4次,用手術刀再次剝除剩余的鞘葉后,再次置入加了1～2滴吐溫-80的0.1% HgCl2水溶液中振蕩消毒3～5 min,無菌水沖洗4～5次后,用無菌吸水紙吸干表面水分后備用。

1.4 誘導培養

在超凈工作臺上,將已消毒的外植體置于接種盤上,用鑷子和接種刀將幼嫩花梗切割成帶1～2個節的花梗切段;或包括生長點在內的0.3～0.5 cm長的嫩芽莖尖頂端組織,平放接種于事先準備好的誘導培養基中1/2MS+6-BA(2.0～4.0)mg/L+NAA(0.2～0.4)mg/L+蔗糖25 g/L+瓊脂(6.5～7.0)g/L,pH值5.6～5.8。培養溫度22～26 ℃,光照強度500～1000 lx,光照時間10～12 h/d。

1.5 增殖培養

誘導培養50～60 d后,成活外植體可誘導出單芽、叢芽或類原球莖,將誘導出的材料從外植體上切割下來進行繼代增殖培養。單芽或叢芽進行叢芽增殖培養,類原球莖進行類原球莖增殖培養。

切除單芽或叢芽基部無分生能力的組織及已展開的葉片后,豎向接種在增殖培養基中1/2MS+花寶1號1.5 g/L+6-BA(2.0～4.0)mg/L+椰汁100 ml/L+蔗糖(25～30)g/L+瓊脂(6.5～7.0)g/L,pH值5.6～5.8進行叢生芽增殖培養;選取健壯的類原球莖接種在增殖培養基中:1/2MS+花寶1號1.5 g/L+6-BA(2.0～4.0)mg/L+NAA(0.2～0.4)mg/L+椰汁150 ml/L+蔗糖(25～30)g/L+瓊脂(6.5～7.0)g/L,pH值5.6～5.8進行增殖培養。培養溫度22～26 ℃,光照強度1500～2000 lx,光照時間12～14 h/d。40～50 d繼代1次,叢芽繼代次數不宜超過12次,類原球莖不宜超過10次。隨著繼代增殖次數的增加,可根據長勢將6-BA濃度降低至1.0～3.0 mg/L,NAA濃度降低至0.1～0.3 mg/L。

1.6 分化培養

選取健壯的類原球莖接種在分化培養基中:1/2MS+花寶1號1.0 g/L+6-BA(0.5～1.0)mg/L+蔗糖(25～30)g/L+瓊脂7.0 g/L,pH值5.6～5.8。培養溫度22～26 ℃,光照強度1500～2000 lx,光照時間14～16 h/d。分化培養50～60 d后類原球莖陸續發育成芽苗,分化不完全的類原球莖可再次進行分化培養。

1.7 生根培養

將葉片展開的叢芽苗或類原球莖分化出的芽苗(株高≥3.0 cm)切割成單苗,按植株大小、壯弱分級后,接種于生根培養基中1/2MS+花寶1號1.0 g/L+NAA(0.1～0.3)mg/L+香蕉泥50 g/L+蔗糖(20～25)g/L+活性炭1.0 g/L+瓊脂7.0 g/L,pH值5.6～5.8。培養溫度為22～26 ℃,光照強度2000～2500 lx,光照時間14～16 h/d。根據品種株型與培養容器規格確定適宜的接種數量,培養40～60 d后可獲得具有根、莖、葉的完整植株。

1.8 煉苗

當生根苗株高≥5.0 cm、葉片≥3片、具2～3條根時,可移出培養室進行煉苗。煉苗室無陽光直射,散射光光照強度5000～6000 lx,溫度20～28 ℃,空氣相對濕度60%～80%,環境清潔。將培養瓶一字排開放置于苗床或煉苗架上,煉苗15～20 d。

1.9 試管苗質量

品種純正;生長健壯,葉片舒展,葉色濃綠,根系粗壯;無污染;變異率≤5%。參考相關標準[9],文心蘭試管苗分級及標準參見表1。

表1 文心蘭試管苗分級及其標準

2 組培苗移栽

2.1 環境條件

移栽大棚要求光照均勻,空氣流通,水源清潔;溫度20～28 ℃,空氣相對濕度 60%～80%,光照強度5000～10000 lx。

2.2 洗苗與消毒

將組培苗從培養容器中小心取出,用清水將粘附在根系上的培養基清洗干凈,并按植株大小進行分級,整個過程應盡可能減少對植株的機械損傷。將分級好的組培苗放置在塑料筐內,置入800～1000倍多菌靈或百菌清水溶液中消毒3～5 min,取出后放置在移栽大棚育苗床上晾15～20 min后可移栽。

2.3 基質

水苔作為移栽基質,種植前先將水苔放入清水中浸泡24 h,撈出后用清水清洗1～2遍后充分擠出水分,用力擠壓水苔至不出水即可。

2.4 移栽

用適量抖松的水苔包裹住組培苗的根部置入口徑5 cm且底部帶孔的白色育苗杯中,要求水苔的用量要適中,組培苗生長點的位置要露出水苔面,水苔面要低于杯沿0.5～1.0 cm,移栽過程應盡可能減少對植株的機械損傷。移栽后放入專用育苗托盤中,整齊擺放在育苗床上。

2.5 栽培管理

2.5.1 水分管理。移栽后適當控水,保持水苔濕潤狀態。水苔將要干透時及時澆水,一般早上澆水,澆水時要澆透,使整個水苔濕潤。

2.5.2 施肥管理。移栽2～3 d后即可噴施葉面肥,下午噴施,葉面濕潤不滴水為宜,植株勿帶水過夜。移栽30 d內,每3～4 d噴施2000倍水溶性平衡肥(N∶P∶K=20∶20∶20)1次;移栽30 d后每4～5 d噴施1次,濃度提高至1500倍;移栽90 d后每6～7 d噴施1次,濃度提高至1000倍,此階段可在杯中補施緩釋肥(N∶P∶K=14∶14∶14)1次,每杯約0.5～1.0 g。

2.5.3 主要病蟲害防治。預防為主,防治結合[2、10-11]。每15 d噴灑1次800～1000倍多菌靈、百菌清或甲基托布津等廣譜性殺菌劑預防病害的發生,發現病株時要及時隔離;根據蟲害的季節性發生,要提前預防;各種農藥要交替使用。文心蘭小苗主要病蟲害防治參見表2。

表2 文心蘭小苗主要病蟲害防治

2.6 移栽苗質量

不同品種的組培苗移栽180～270 d后可達移栽苗標準,要求生長健壯,葉片舒展,葉色濃綠,根系發達;變異率≤5%。參考相關標準[9],文心蘭移栽苗分級及標準參見表3。

表3 文心蘭移栽苗分級及其標準