血清肝纖維化指標及銅生化檢測對Wilson病攜帶者診斷意義

年 娜 陳 林 朱 凌 方明娟 許亞運 程 楠

Wilson?。╓ilson's disease，WD）是一種罕見的常染色體隱性遺傳性疾病，由于P型銅轉運ATP酶功能障礙引起銅代謝障礙。銅在組織臟器的異常沉積造成肝損害、神經/精神癥狀等，病情重者可危及生命。ATP7B基因攜帶者一般不應表現出WD的癥狀，但已有研究發現部分攜帶者的CP和血清Cu輕度降低及肝功能異常[1]，亦有研究發現了攜帶者頭顱影像學較正常對照組存在豆狀核及黑質異常[2]。本病的病理生理過程是大量的游離銅首先在肝臟沉積，肝臟是WD最早、最主要的受累器官，WD患者多數存在不同程度的肝臟損害。肝纖維化是慢性肝病的共同病理學基礎，長期、大量銅在肝臟的蓄積為WD肝纖維化的誘因。WD臨床表現各異，其確診的方法除基因檢測外，血清學指標、影像學表現、臨床癥狀及家族史亦具有同樣價值。本研究通過檢測并對比WD患者、WD攜帶者及健康人的血清肝纖維化及銅生化指標，進一步探討上述指標對WD患者和攜帶者的診斷意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性收集2022年6月-2023年6月在本醫院住院的73 例WD患者及85 例患者父母（攜帶者）及63 例健康人的臨床資料，其中WD組男40 例、女33 例，年齡4～47 歲；攜帶者組男38例，女47 例，年齡28～59 歲；健康人組男37 例，女26 例，年齡22～51 歲。三組研究對象在性別、年齡方面差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究為回顧性分析，已通過醫院倫理委員會審查。

1.2 納入及排除標準 ①納入標準：WD患者診斷參照2021年《中國肝豆狀核變性診治指南》[3]，并符合2001年萊比錫第8 屆國際WD會議提出的診斷標準（Leipzig計分系統）[4]的積分≥4 分。②排除標準：其他類型的病毒性肝炎、酒精性及非酒精性肝炎、藥物性肝損、自免肝、惡性腫瘤等。

1.3 指標檢測 ①肝纖維化：放射免疫法，由自動r-計數儀預先編制的程序給出有關參數、標準曲線及樣品濃度，直接測出樣品濃度。②銅生化：血清CP測定采用免疫透射比濁法；血清Cu采用火焰原子吸收光譜法；血清Sco采用鹽酸對苯二胺比色法，試劑自行配制。

1.4 統計學方法 運用SPSS 19.0 統計軟件分析數據，對于符合正態分布的計量資料以均數±標準差表示；對于計數資料采用相對數表示；非正態采用非參數檢驗秩和檢驗。P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 三組研究對象肝纖維化指標比較 經獨立樣本Kruskal-Wallis檢驗，三組研究對象比較，差異均有統計學意義（P＜0.001）；經多重比較分析發現，HA在健康人與WD患者、WD攜帶者組之間均有顯著差異性（P＜0.001），在WD患者與攜帶者之間無顯著差異性（P＞0.05）；LN、Ⅳ/C在三組之間均有顯著差異性（P＜0.001）。見表1。

表1 三組研究對象肝纖維化指標比較

2.2 三組研究對象銅生化指標比較 經獨立樣本Kruskal-Wallis檢驗，三組研究對象銅生化指標比較，差異均有統計學意義（P＜0.001）；經多重比較分析發現，血清Cu、CP在三組研究對象之間兩兩比較，差異均有統計學意義，血清Sco在WD患者與攜帶者組、健康人組之間差異均有統計學意義（P＜0.001），在WD攜帶者組與健康人組之間差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 三組研究對象銅生化指標比較

2.3 三組研究對象銅生化各項指標不同范圍比例的比較 WD攜帶者組中90%以上攜帶者200 mg/L＜CP＜300 mg/L，WD組中89%以上患者CP＜100 mg/L，健康人組58%以上健康人CP＞300 mg/L（其中92%以上健康人CP＞250 mg/L）；WD攜帶者組中58%以上攜帶者血清Cu＞11 umol/L，WD組中91%以上患者Cu＜5 umol/L，健康人組中98%健康人Cu＞11 umol/L；WD攜帶者組中88%以上攜帶者Sco＞0.3 U/L，WD組中100%患者Sco＜0.2 U/L（其中94%患者Sco＜0.1 U/L），健康人組中98%以上健康人Sco＞0.3 U/L。見表3。

表3 三組研究對象血清銅生化不同范圍比例的比較

3 討 論

WD是因ATP7B基因突變導致的銅膽道排出障礙以致其異常沉積于各個組織臟器并引起相關器官功能異常的遺傳性疾病，最常見的受累臟器為大腦、肝臟、腎臟等，亦可多個臟器同時受累。臨床就診患者中，多表現為慢性活動性肝炎、肝硬化和更罕見的暴發性肝衰竭，或表現出不同的神經精神表現，如震顫、帕金森病、肌張力障礙、精神異常等。研究顯示[5]，WD起病形式多樣，臨床表現各異，大多數患者存在肝纖維化、銅代謝指標異常；WD攜帶者臨床雖未見明顯肝臟或神經系統癥狀，但由于攜帶致病基因，也可能會引起輕微的銅代謝紊亂及生化指標異常。

在本研究對肝纖維化指標的檢測中，HA在WD組與攜帶者組研究對象之間無明顯差異性，而LN及IV/C在兩組間相互比較時均有顯著差異性。IV/C為基底膜膠原，是診斷早期肝纖維化的重要指標，可以反映肝硬化情況。LN則是肝纖維化增生及判斷預后的指標，與肝損害呈正相關。既往研究顯示，WD無癥狀的同胞與正常人的肝纖維指標三項指標均有顯著差異性[6]。WD為遺傳性疾病，患者自出生即存在銅代謝異常，遂肝臟因銅沉積長期持續性受損。肝纖維化指標多反映肝臟慢性損害，其中HA是反映有無肝硬化及肝臟損害嚴重程度的指標，晚期肝硬化時此指標明顯增高。而本組WD患者多數為非首次就診患者，既往接受了驅銅治療，遂肝損害并非十分危重，因此可能造成HA在WD患者組與攜帶者組研究對象間無明顯差異性。本研究顯示，攜帶者肝纖維化水平異常，但不完全與既往研究一致[5]，后期可擴大樣本量，進一步細化病程及病情分組，進一步研究。

在本研究對銅生化指標的檢測中，血清Cu、CP在三組間兩兩比較時均有顯著差異性，血清Sco在攜帶者組與正常人組之間無顯著差異性。目前，臨床上對WD診斷最常用的方法為血清CP的檢測。而Sco的測定是對血清CP酶活性的檢測，是CP檢測的有效補充方法。本研究的Sco在攜帶者組與正常組研究對象中無明顯差異性，本研究入組時攜帶者納入的為患者父母，因基因檢測未能全面普及，遂未能納入攜帶致病基因的患者同胞，考慮可能相關，但具體原因并不明確，尚待研究。

WD攜帶者存在細胞內銅升高[7]。本研究中WD患者組絕大多數患者銅生化三項指標均明顯下降，攜帶者銅生化指標中血清Cu和CP及多在臨界值上下，而正常人血清Cu和CP則明顯升高。因此，攜帶者可能存在銅生化異常，其中血清Cu和CP指標下降或升高均不明顯，但高于WD患者水平，即部分攜帶者指標值界于患者與正常人之間。WD是目前少數可治性遺傳性疾病，及早的發現和正規的治療對病情的控制顯著有效。大多數WD患者的臨床癥狀出現在兒童和青年期，但亦有部分40歲以上發病的晚發性WD臨床癥狀不典型。因此，對于年齡較大的存在肝損害的患者也需要進行WD鑒別以防出現漏診誤診[8]。另外，研究顯示[9]，WD不僅發生在兄弟姐妹和后代中，也有0.5%的概率發生在上一代中，遂WD的父母亦建議完善銅代謝、尿銅甚至基因檢測等檢查。

綜上所述，WD患者血清銅生化水平多為顯著降低，且常合并肝纖維化指標異常。WD攜帶者血清肝纖維及銅生化水平處于患者與正常健康人之間，其中，大多數WD攜帶者血清Cu和CP指標與臨界值接近。對于WD同胞及父母，無論是否存在臨床癥狀，建議常規行WD相關篩查。