巨細胞病毒活動性感染患兒NK細胞及GGT水平與HCMV DNA的相關性

張瑜 郭軻 劉道路

人巨細胞病毒(HCMV)主要在人體內傳播,大部分人群都存在HCMV感染,但多呈潛伏性感染,幾乎沒有臨床癥狀,也基本不會發生長期攜帶、反復感染的情況[1]。當合并免疫抑制疾病或免疫力下降時,自然殺傷(NK)細胞功能減弱,可能引發HCMV活動性感染[2]。HCMV可存在于血液、尿液、唾液腺、乳汁等中,嬰幼兒感染HCMV主要是通過母嬰傳播、哺乳等途徑[3]。HCMV活動性感染患兒可能會出現呼吸道感染、腹瀉、心肌損傷、皰疹性咽峽炎等癥狀,損害肝膽、中樞神經、呼吸系統等,而肝臟是其主要靶器官[4]。本研究旨在探討HCMV活動性感染患兒NK細胞及γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)水平與HCMV-核酸(DNA)的相關性。

資料與方法

一、納入標準

(一)巨細胞病毒活動性感染參照相關標準進行診斷[5];(二)均為1歲以下的嬰兒;(三)患兒家屬簽署知情同意書。

二、排除標準

(一)合并自身免疫性疾病;(二)其它病毒感染,如流感、肝炎、皰疹、風疹等病毒感染;(三)有遺傳代謝性疾病;(四)近期服用過影響肝功能的藥物。

三、一般資料

選取2021年6月—2022年6月濉溪縣醫院收治的150例HCMV活動性感染患兒納入研究對象,根據HCMV DNA水平將患兒分為低載量組(n=52)、中載量組(n=64)、高載量組(n=34),另外選取我院同期50名健康嬰兒作為對照組。在研究開始前上報至我院醫學倫理委員會,經開會討論后批準實施(2021-21號)。

四、方法

比較低載量、中載量、高載量HCMV活動性感染患兒及健康嬰兒的一般資料。入院后采集所有嬰兒空腹靜脈血,檢測天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽汁酸(TBA)、GGT,檢測儀器為盛世東唐DT480全自動生化分析儀,試劑盒由阿里生物技術泰州有限公司提供;采用廈泰生物Cytek Aurora流式細胞儀檢測NK細胞百分比;收集嬰兒新鮮尿液,采用實時熒光定量PCR技術檢測HCMV DNA載量。

五、統計學方法

結 果

一、4組一般資料比較

4組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 4組一般資料比較[n(%),±s]

二、4組肝功能指標及NK細胞比較

4組AST、ALT、ALP、TBA比較無明顯差異(P>0.05);GGT、NK隨HCMV DNA載量升高而上升(P<0.05)。見表2。

表2 4組肝功能指標及NK細胞比較(±s)

三、肝功能指標及NK細胞與HCMV DNA的相關性分析

經相關性分析,AST、ALT、ALP、TBA與HCMV DNA無明顯相關性(P>0.05);NK細胞、GGT與HCMV DNA呈正相關(P<0.05)。見表3。

表3 肝功能指標及NK細胞與HCMV DNA的相關性分析

討 論

HCMV具有親肝特性,HCMV感染可促使花生四烯酸分泌,經環氧合酶催化生成反應性氧物質,激活非活性狀態的核因子-κΒ,并促進其與免疫、炎癥相關的病毒、基因表達,導致炎癥反應發生,損害肝細胞[6]。病毒復制活躍程度可通過HCMV DNA載量這一指標體現,HCMV DNA異常升高是病毒活動期的體現[7]。本研究結果顯示,HCMV活動性感染患兒肝功能指標均有一定程度的升高,提示HCMV活動性感染患兒存在肝功能損傷,進一步探討肝功能指標與HCMV DNA的相關性發現,AST、ALT、ALP、TBA與HCMV DNA無明顯相關性,表明肝損傷程度與HCMV復制的活躍程度不相關,與李迪等[8]的研究結果較為一致。GGT反映的是患兒的膽汁淤積情況,較為靈敏,也可以用于HCMV活動性感染患兒預后的判斷[9]。GGT與HCMV DNA呈正相關,謝而付等[10]的研究也得出了相似的結果,這可能是因為HCMV侵犯網狀內皮系統后,肝細胞、膽管內皮細胞發生變性水腫,使膽道被阻塞,GGT無法經膽道排泄出體內,逆流進入血液中,從而使血液GGT水平上升。

HCMV的發病與免疫功能相關,機體免疫系統不成熟時,HCMV容易被激活,引起HCMV感染,嬰幼兒免疫力較低,體內NK細胞數較正常人明顯偏低,因此發生HCMV活動性感染的風險較高。NK細胞在細胞免疫和抗HCMV感染中具有重要作用,NK細胞可以檢測主要組織相容性復合物Ⅰ類的下調,對于細胞因子的表達也有促進作用,產生穿孔素、蛋白酶顆粒B等細胞毒性顆粒來清除產生感染的細胞,終止HCMV感染。HCMV感染反過來又可以影響NK細胞的功能,且有研究顯示[11],HCMV特有的免疫逃避機制對免疫應答有抑制作用,機體內的病毒不能被完全清除,形成HCMV潛伏感染。HCMV與Toll樣受體3有一定的關系,可能通過激活這一通路使炎癥反應加重,并引起免疫應答,這可能是HCMV影響免疫功能的一個新的方向[12]。本研究中,4組NK細胞水平存在顯著差異,且NK細胞與HCMV DNA呈正相關,與陳友華等[13]的研究結果有一定不同,該研究顯示,正常對照組、HCMV DNA陰性及陽性組NK細胞比較均無明顯差異,病毒載量與疾病嚴重程度相關,分析原因可能是與病例的選擇及分組方式有關。

綜上所述,HCMV活動性感染患兒存在肝損傷及免疫抑制,但HCMV復制活躍程度與肝損傷程度無關,與免疫功能有關。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。