加味六君子湯發酵劑對肉雞生長及免疫功能的影響

王中杰,王寶杰,肖發沂,鄭立森,蘇 丹

(山東畜牧獸醫職業學院,山東濰坊 261061)

中藥發酵作為炮制的重要工藝,是現代微生物技術和傳統中藥的有機融合,在現代養殖生產中發揮重要的疫病防治作用。研究和實踐表明,五倍子、山楂、厚樸等中藥發酵后添加于斷奶仔豬日糧中,機體內的溶菌酶活性和免疫球蛋白會顯著增加,仔豬的腹瀉率下降,生長性能提高;青蒿葉渣進行固體發酵后,粗蛋白及雙氫青蒿素含量大幅度提升,添加在蛋雞的飼料中,蛋殼的光澤度改善,糞便細膩,提高了飼料利用率和經濟效[1-2]。

六君子湯具有健脾補氣、燥濕化痰的功效,在現代肉雞養殖中發揮了調節腸道菌群、促進機體生長的功能。但六君子湯發酵劑的研究較少,為更好地提高其療效,本課題組對六君子湯進行了加味研究并制成發酵劑,添加于肉雞飼料中,測定料肉比、日增重、免疫器官指數、新城疫(ND)抗體效價和血清免疫球蛋白( IgG、IgA、IgM)等指標變化,旨在探討其對白羽肉雞生長性能和免疫機能的作用,為該制劑的進一步研究及應用提供思路和參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 中草藥 試驗所用中草藥有黨參、炒白術、茯苓、陳皮、法半夏、柴胡、芍藥、炙甘草,均購自濰坊市同仁堂藥店,按照君臣佐使原則配伍中草藥組方,參照張桂枝發酵復方中草藥混菌發酵劑的步驟及方法制備[3]。

1.1.2 試驗用動物 健康良好、體重相近白羽肉雞400只,購自濟南斯帕法斯家禽有限公司。將試驗雞隨機分為4組,每組設5個重復,每個重復20只,試驗期間各組采食、飲水等飼養管理條件相同,符合國家實驗動物飼養及管理條例。

1.1.3 主要試劑 雞新城疫活疫苗(La Sota株),北京信得威特科技有限公司產品;新城疫標準濃縮抗原及標準陽性血清,中國獸醫藥品監察所提供;IgG、IgA、IgM ELISA檢測試劑盒,長春匯力生物技術有限公司產品。

1.1.4 主要儀器 高速離心機、96孔V型反應板、微量移液器、酶標儀、生化培養箱、超凈工作臺、高壓蒸汽滅菌鍋、恒溫培養箱等。

1.2 方法

1.2.1 動物分組及給藥 空白對照組(A)飼喂基礎日糧,中草藥對照組(B)添加1.2%未發酵加味六君子湯方劑,試驗1組(C)和試驗2組(D)分別在飼料中添加0.6%和1.2%加味六君子湯發酵劑。肉雞6日齡添加試驗中草藥、發酵,連續使用7 d。免疫程序:各組雞分別在7日齡、21日齡免疫接種新城疫活疫苗(LaSota株)。

1.2.2 指標檢測 按照以下方法分別測定平均日增重、階段料肉比、免疫器官指數、免疫球蛋白濃度和抗體效價。

平均日增重=周增重量/7;階段料肉比=飼料消耗量/肉雞增重量

免疫器官指數=免疫器官重量(g)/試驗階段體重(kg)

免疫球蛋白濃度的測定分別按照試劑盒說明書操作步驟完成,新城疫抗體效價的測定采用微量紅細胞凝集抑制試驗。

1.2.3 樣品采集 試驗雞在8、15、22、29、36日齡時,空腹稱重,統計喂料量、體重等數據,采血后頸靜脈放血致死,收集脾臟、胸腺和法氏囊免疫器官,置-70℃超低溫冰箱保存待用。

1.2.4 統計分析 平均值±標準差表示試驗結果,用SPSS26.0統計軟件的One-Way ANOVA單因素方差分析試驗數據, Dun-can's 進行顯著性檢驗,P<0.05表示差異顯著。

2 結果

2.1 對白羽肉雞平均日增重的影響

15、22、29日齡時各組肉雞平均日增重差異不顯著(P>0.05),36日齡時試驗1組、試驗2組及中草藥對照組差異不顯著(P>0.05),但與空白對照組相比校差異顯著(P<0.05)(表1)。

表1 加味六君子湯發酵劑對肉雞平均日增重的影響

2.2 對白羽肉雞料肉比的影響

各試驗組雞25、22日齡時差異均不顯著(P>0.05),29、36日齡時C組與D組相比差異不顯著(P>0.05),但與B組和A組相比差異顯著(P<0.05)(表2)。

表2 加味六君子湯發酵劑對肉雞料肉比的影響

2.3 對白羽肉雞免疫器官指數的影響

4個組肉雞15日齡時免疫器官指數差異不顯著(P>0.05),22日齡時B～D組肉雞的胸腺指數均明顯增高,與A組相比差異顯著(P<0.05),29、36日齡時C組肉雞的全部免疫器官指數均高于A組和B組,且差異顯著(P<0.05), 29 日齡時,與D組相比較,C組免疫器官指數差異不顯著(P>0.05),36日齡時C組法氏囊指數顯著高于D組(P<0.05)(表3)。

表3 加味六君子湯發酵劑對肉雞免疫器官指數的影響

2.4 對白羽肉雞新城疫抗體效價的影響

4個組肉雞在15日齡、22日齡時新城疫抗體效價差異不明顯(P>0.05);29日齡、36日齡時B～D組的新城疫抗體效價明顯高于A組(P<0.05),C組、D組的新城疫抗體效價明顯高于B組(P<0.05),但C組和D組之間無明顯差異(P>0.05)(表4)。

表4 加味六君子湯發酵劑對肉雞新城疫抗體效價的影響

2.5 對白羽肉雞血清免疫球蛋白的影響

4個組肉雞IgG、IgA、IgM指標在15日齡時無明顯差異(P>0.05);IgG濃度在22日齡時明顯升高,與B組和A組相比較,差異顯著(P>0.05); B～D組IgA濃度在22日齡時明顯高于A組(P<0.05); B～D組IgG和IgA濃度在29日齡時顯著高于A組(P<0.05);與A組和B組相比較,C組IgM濃度29日齡時顯著升高,差異明顯(P<0.05);與A組相比較,B～D組IgG濃度36日齡時顯著升高,差異明顯(P<0.05),且C組、D組與B組相比差異顯著(P<0.05); C組的IgA 濃度明顯高于A組和B組(P<0.05)(表5)。

表5 加味六君子湯發酵劑對白羽肉雞血清免疫球蛋白的影響

3 討論

本試驗以肉雞脾臟、胸腺和法氏囊指數作為衡量機體免疫機能的重要指標,其數值增加說明肉雞免疫器官發育良好,免疫機能強[4-6]。試驗結果顯示,在白羽肉雞飼料中添加一定比例的加味六君子湯發酵劑,試驗雞的免疫器官指數比中草藥對照組顯著提高,說明加味六君子湯發酵后可健脾胃、養氣血、化濕濁,提高肉雞免疫器官細胞分裂增殖,提升肉雞的生產及免疫力。

本試驗1組的新城疫抗體效價29、36日齡時明顯高于中草藥對照組和空白對照組,抗體作為介導體液免疫的重要分子,其效價提高說明該方劑發酵后可提升肉雞的體液免疫能力,防止傳染病的暴發和流行,這與文獻[7]研究結果相吻合。在白羽肉雞飼料中添加一定比例的加味六君子湯發酵劑,機體的IgG、IgA和IgM的濃度顯著提高,體液免疫功能顯著增強。這與該方劑增強脾胃運化機能有關,進而合成機體免疫球蛋白的能力增加,促進機體體液免疫功能增強[7]。介導體液免疫的主要抗體是免疫球蛋白,具有抗菌、抗外毒素或抗病毒的免疫功能,其含量升高可以增強機體的抵抗能力[8-9]。本研究中加味六君子湯經過發酵后促進機體生長發育、增強機體免疫機能等作用明顯提高,生產實踐中在肉雞日糧中以添加0.6%量為宜,可以提高肉雞養殖效益。