獻血者不規則抗體篩查中全自動血型分析儀與微板法的作用分析

陳明 彭杰梅

1 宜春市中心血站 （江西 宜春 336000）

2 宜春市第二人民醫院 （江西 宜春 336000）

內容提要： 目的：研究全自動血型分析儀和微板法在為獻血者進行不規則抗體篩查中的效果。方法：以2022年1月～2023年1月60例獻血者的血液樣本為例，全部樣本均使用微板法（微板組）、全自動血型分析儀方法（全自動組）進行檢測，比較兩組篩查結果、判斷脂血標本血型情況及溶血標本血型情況以及不規則抗體類型。結果：全自動組所檢測出的抗-E共有2例、抗-P1共有3例、抗-I共有1例、抗Mur共有1例、冷自身抗體3例，微板法對凝集情況均未檢出。全自動組溶血標本血型判斷正確率高于微板組（P＜0.05）。全自動組脂血標本血型判斷正確率高于微板組（P＜0.05）。全自動組不規則抗體及O細胞凝集與IgM及IgG抗體檢出率高于微板組（P＜0.05）。結論：在為獻血者篩查鑒定不規則抗體當中，可以得出準確的結果。

現階段，對于無償獻血，屬于醫療當中重要的用血來源。因此，為了可以確保能夠為臨床安全用血，為獻血者篩查血液時，采用不規則抗體，可以將其血液內有關抗體確認下來[1]。不規則抗體指的主要是將抗-A/B以外的血型抗體排除，其類型主要有紅細胞自身、同種抗體。目前，對血型鑒定的時候，所用到的相關試劑，靈敏度已明顯升高[2,3]。由于因鑒定血型鑒定錯誤，所引起的速發性溶血反應已顯著降低，但是因為多次輸血與妊娠等多種因素，會產生遲發性的溶血反應，還會時不時地發生，不規則抗體使血型鑒定的難度增大，還會引起疑輸血不良反應。因此，對于獻血者，對其血液篩查不規則抗體可保障臨床安全用血[4,5]。在當前，針對獻血者的不規則抗體篩查，微板法以及全自動血型分析儀屬于十分常用的篩查手段，為了能夠找出合理的篩查方案，本次以60例獻血者的血液樣本為例，對相關內容重點分析。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

以2022年1月～2023年1月60例獻血者的血液樣本為例，入選的獻血者中男性30例，女性30例；年齡22～46歲，平均（34.49±4.51）歲。納入的獻血者均符合健康檢查，獻血者了解本次調查內容，符合獻血要求。

儀器與試劑：全自動血型分析儀（生產廠家：深圳市愛康生物科技有限公司；型號：Metis150-8s）檢測血型、全自動加樣器[（生產廠家：北京普利生儀器有限公司；型號：AMP2000-S型）、低速離心機（生產廠家：四川蜀科儀器有限公司；型號：LD-5M）、振蕩孵育器（生產廠家：上海珂淮儀器有限公司；型號：MTC-100）、酶標儀（生產廠家：深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司；型號：MR-96A）、人ABO血型反定型用紅細胞試劑盒（生產廠家：長春博迅生物技術有限責任公司；生產批號：211113）、血型鑒定及不規則抗體篩查質控品（生產廠家：深圳市愛康試劑有限公司；生產批號：211212）]。

1.2 方法

微板組采用微板法：結合于微孔板紅細胞凝集法的原理相，對微孔板選擇，96孔U型的，并使用STAR加樣儀，對樣本及試劑，進行處理；加樣本為50μL血漿，Oc試劑為50μL，在1700r/min速度之下離心，在離心3min后，放于孵育振蕩器（4分值）內：Accel設置為1，1200r/min速度下振蕩，之后放置2分值，選用酶標儀比色，并對結果進行相應的判讀。

全自動組予以全自動血型分析儀篩查。借助微孔板紅細胞凝集法，將入選者5mL的全血標本，以及10mL質控品，放到離心機內，在3000r/min轉動速度之下，離心12min，借助階梯型微孔板，合理分配樣本以及試劑，放于恒溫孵育器內，溫度在30°C下，孵育1h，借助數字圖像處理法，進行判定，完成首次篩查。若是首次結果是陽性，借助鹽水介質法等方式，明確抗體性質，在使用已確定的紅細胞抗原，覆蓋上譜細胞，應用抗球蛋白法，鑒定抗體的特異性。

1.3 觀察指標與判定標準

⑴篩查結果：統計不規則與IgM和IgG抗體以及O細胞凝集檢出情況，檢出率=檢出數/總數×100%。O細胞凝集判定標準：①全自動血型分析儀篩查：SPC＜10：凝集，=10：可疑，＞10代表是無凝集；P/C在30以內代表凝集，15～30，代表可疑，15以上，代表無凝集；LIA在300以內，代表凝集，100～300，代表可疑。100以上代表無凝集。把SPC當成判斷的參數，若是另外2個參數值，在可疑范圍內，需要判定參數值結果；而如果SPC值于可疑的范圍內，需要將其送到血型室做有關鑒定；②微板法：判定O細胞凝集標準：cutoff的參考值是0.6。⑵兩組判斷脂血標本血型情況比較：統計判斷正確與無法判讀和誤判數量。⑶兩組判斷溶血標本血型情況比較：統計判斷正確與無法判讀和誤判數量。⑷兩組不規則抗體類型：對2種篩查方法不規則抗體類型統計：冷自身抗體、抗Mur、抗-I、抗-P1、抗-Leb、抗-E及抗-M。

1.4 統計學分析

統計學軟件SPSS25.0處理數據，計數資料用%表示，行χ2檢驗，P＜0.05為數據差異顯著。

2.結果

2.1 比較兩組篩查結果

兩組不規則抗體等檢出率比較，相對于微板組，全自動組更高（P＜0.05），見表1。

表1.篩查結果比較[n(%)]

2.2 比較兩組判斷脂血標本血型情況

全自動組脂血標本血型判斷正確率高于微板組（P＜0.05），見表2。

表2.兩組判斷脂血標本血型情況比較[n(%)]

2.3 比較兩組判斷溶血標本血型情況

兩組溶血標本血型判斷正確率比較，全自動組高于微板組（P＜0.05），見表3。

表3.兩組溶血標本血型情況比較[n(%)]

2.4 兩組不規則抗體類型比較

全自動組所檢測出的抗-E、抗-P1、抗-I、抗Mur以及冷自身抗體各2例、3例、1例、1例、3例，微板法對凝集情況均未檢出，見表4。

表4.不規則抗體類型比較[n(%)]

3.討論

在健康的人群中，約有0.30%～2.00%的人群存在著不規則的抗體，而血型抗體是誘發溶血性輸血反應的主要因素[6,7]。所以，為了更好地保障臨床安全用血，應強化展開對于無償獻血者不規則抗體的篩查[8-10]。

臨床上為了取得更為準確與可靠的篩查結果，以及臨床科技的不斷進步，全自動血型分析儀法在臨床應用日益廣泛，且此種操作手段可以在鑒定血型期間，確保整個過程都可以自動化處理。并且，篩查血型準確性也十分高，且其抗干擾能力較強，進而針對鹽水內，不規則抗體，可以被準確的觀察到。對于全自動血型分析儀，在篩查不規則的抗體靈敏度期間，相比于微板法要更好，也更容易將鹽水介質凝集試驗的陽性抗體發現，繼而確保血液的安全性。該分析儀的試劑用量僅需要25μL，在試劑的成本方面，相比于微板法更優[11,12]。采用全自動血型檢測儀所檢測的標本血型，均設置質控監測（1個），可將假凝集情況觀察到，可以顯著提升檢測特異性，而且有著較好的重復性，試驗的過程更加自動化，標準化與規范化，并有著更為可靠的鑒定結果，全程都可以進行自動的記錄備份，以及長期保存原始數據，便于最終查詢結果等，300人份/h的檢測速度，也更加適用于血站處理大批量的標本。全自動組不規則抗體及O細胞凝集與IgM及IgG抗體檢出率高于微板組（P＜0.05）。此結果得出的因素為，我國血站在篩查不規則抗體以及獻血者的血型期間，主要采用U型的微孔板手工比色法，具體操作期間，每一環節都由人工操作，因此人為等因素易對最終檢驗結果造成影響。借助微板法對篩查獻血者不規則抗體進行初篩，雖然可以大批量篩查血液樣本，但在具體檢測期間，將鹽水當成反應介質，多數于室溫下將完成有關操作，因此可使得少量的稀與凝集弱的抗體，難以被檢測到。而采用全自動血型分析儀在整個實驗當中，均在自動化下完成，還可借助條碼對整個檢測過程進行控制，且可以借助自動成像系統對結果進行判斷，且可以將其保存下來，經自動化檢測能夠將由于人為失誤等因素，而可以避免出現結果偏差，有效地補充了微板法篩查的不足。本研究結果表明：全自動組所檢測出的抗-E、抗-P1、抗-I、抗Mur以及冷自身抗體各2例、3例、1例、1例、3例，微板法對凝集情況均未檢出。對于抗-M抗體屬于天然的一種抗體，也屬于對于干擾血型鑒定的抗體，2種方式檢出率都十分高，而且微板法所檢出的大多數抗體，均為有著冷抗體性質的同種抗體。所以，臨床價值相較而言是非常有限的。而在微板法漏檢的抗體種類當中能發現，抗-Leb以及抗-P1屬于冷抗體。于常溫下，不會將O細胞凝集，只有在特定條件下才可以激活補體。而對于微板法，一般于室溫條件下完成，而全自動血型分析儀孵育溫度在30°C左右。因此，采用微板法易使得該類抗體出現漏檢的情況。就算是采用全自動血型分析儀進行篩查，在檢出冷自身抗體方面，檢出率較微板法高，但于一般情況下，隨著溫度日益上升，冷凝集素凝集能力，會逐漸降低，并有假陰性幾率。本研究還得出：全自動組溶血標本血型、脂血標本血型的判斷正確率均明顯高于微板組（P＜0.05）。由此可以看出：采用全自動血型分析儀有著非常強的抗干擾，可以避免出現誤判等情況出現。

綜上所述，和無償獻血的特點及血站血型篩查的特點，在為無償獻血者對不規則抗體篩查中，全自動血型分析儀篩查應用價值較高，同時較比微板法更加具有優勢性，能夠將無償獻血者血液質量安全提升。