HPV-DNA 分型檢測聯合TCT檢查用于宮頸癌篩查的臨床價值研究

饒海琴 黃婷

1 高安市婦幼保健院檢驗科 （江西 高安 330800）

2 高安市婦幼保健院婦科 （江西 高安 330800）

內容提要： 目的：探討人乳頭瘤病毒（HPV）-DNA分型檢測聯合宮頸薄層液基細胞學（TCT）檢查用于宮頸癌篩查的臨床價值。方法：選擇2021年6月～2022年12月本院收治的宮頸病變患者256例，所有入選者均行HPV-DNA分型、TCT。以陰道鏡活檢為金標準，分析HPV-DNA分型檢測、TCT檢查單項與聯合診斷宮頸癌的價值，并計算一致性。結果：256例宮頸病變患者，經陰道鏡檢查發現156例陽性，檢出率為60.94%。TCT、HPV-DNA聯合診斷的靈敏度96.15%、特異度95.00%、準確度95.70%、陽性預測值96.77%、陰性預測值94.06%均高于TCT、HPV-DNA，差異有統計學意義（P＜0.05）。TCT、HPV-DNA聯合診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結果的一致性優于TCT與HPV-DNA。結論：宮頸癌篩查中使用HPV-DNA分型檢測聯合TCT檢查可提高診斷準確率，為臨床診療提供更多參考信息。

宮頸癌在臨床較為常見，在女性惡性腫瘤中其發生率居首位，且呈現出年輕化趨勢，對女性健康及生命安全造成較大威脅[1]。宮頸癌有一個較長的癌前病變過程即子宮頸上皮內瘤變（Cervical intraepithelial neoplasia，CIN），從發病到癌變時間較長，可反映宮頸癌前期病變的整個過程，若在此階段進行準確的鑒別診斷，并予以積極有效的治療方法，可預防癌變發生，改善患者預后[2]。既往臨床診斷宮頸病變多以巴氏細胞學技術為主，但受樣本取材等因素影響導致假陽性較高，涂片質量不理想，準確率有待提高。近些年，隨著醫學技術快速發展，宮頸癌篩查技術得到革新與完善，人乳頭瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）、宮頸薄層液基細胞學（Cervical thin layer liquid based cytology，TCT）均在臨床得到廣泛應用，并展現出一定優勢[3,4]。相比以往巴氏細胞學技術，TCT的取材方式與制作方法均有了很大改良，標本質量有所提高，一定程度上降低了假陽性發生率。CIN、宮頸癌的發生發展均與HPV感染關系密切，高危HPV持續感染是導致宮頸病變的重要原因，故檢測HPV-DNA分型在宮頸癌疾病篩查中有重要意義[5]。本研究旨在探討HPV-DNA分型檢測聯合TCT檢查用于宮頸癌篩查的臨床價值。具示如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

經醫學倫理委員會批準，選擇2021年6月～2022年12月本院收治的宮頸病變患者256 例，年齡28～67 歲，平均（38.41±5.56）歲；體重39～75kg，平均（58.77±4.45）kg；婚姻狀況：198例已婚，15例離異，6例喪偶，37例未婚；學歷：53例初中及以下，108例中專及高中，95例大專及以上。

納入標準：①入選者均自愿進行HPV-DNA分型、TCT檢查；②均有性生活史；③無宮頸疾病治療史或盆腔照射史；④同意書由患者自愿簽署。

排除標準：①妊娠期或哺乳期；②近3d有陰道用藥或性生活；③伴有生殖系統感染者；④臟器功能衰竭；⑤交流障礙；⑥拒絕參與本次研究。

1.2 方法

入選者均進行HPV-DNA分型、TCT、陰道鏡檢查，避開經期，近3d未同房、陰道未用藥，檢查前向受檢者簡單說明檢查步驟，取得受檢者理解與配合，囑咐受檢者放松身心，保持平穩呼吸，配合操作者。

HPV-DNA分型檢查：以膀胱截石位進行檢查，完全暴露宮頸，擦拭宮頸表面分泌物，可使用無菌棉簽擦拭，自外口插入取樣器，旋轉5圈，以順時針的方式進行，需停留10s，將取樣器取出折斷，置入標本保存液內送檢，首先進行離心操作，沉淀物檢測方法為PCR-反向點雜交法。檢測16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73、82等15種高危型HPV。首先PCR擴增待檢測樣品，將膜條上的特異性探針與所得的PCR產物雜交，特異性結合后進行顯色和結果分析。

TCT檢查：受檢者取膀胱截石位，盡可能暴露宮頸，擦拭宮頸表面分泌物，擦拭工具為無菌棉簽，向宮頸管內插入采樣刷，深度以1cm為宜，旋轉5圈，以順時針的方式進行，取樣器使用Thinprep細胞保存液保存，振蕩10次，進行標本分離，將標本中的上皮細胞與黏液、血液分泌物、炎細胞均分離，使用HZ-18T液基薄層制片機制備薄層細胞涂片，制片機購三明市和眾生物技術有限公司，隨后進行染色，使用顯微鏡進行觀察。結果判斷標準：非典型腺細胞（ atypical glandular cells，AGC）、單純炎癥未見上皮細胞病變（intraepithelial or malignant lesions，NILM）、鱗狀細胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）、高度瘤變（high degree squamous intraepithelial lesion，HSIL）、不典型鱗狀細胞（atypical squamous cells with unclear significance，ASCUS）、不能排除高級別鱗狀上皮內病變的非典型鱗狀上皮細胞（atypical squamous cells: cannot exclude high-grade squamous intraepithelial lesion，ASC-H）、腺癌（ acinic cell carcinoma，ACC）、低度瘤變（low degree squamous intraepithelial lesion，LSIL）。除NILM外均為陽性。

陰道鏡檢查：取膀胱截石位，盡可能暴露宮頸，擦拭宮頸表面分泌物，擦拭工具為無菌棉簽，以低倍鏡觀察宮頸外形、顏色，濾鏡觀察血管特點，濕敷宮頸，濕敷液為冰醋酸液，對顏色、血管形態進行觀察，一旦發現異常需取此處標本組織送檢，若無明顯典型異常表現可取3、6、9、12處組織送病理檢查，病理科醫師進行獨立閱片。

1.3 觀察指標與判定標準

以陰道鏡活檢結果作為金標準，分析HPV-DNA分型檢測、TCT檢查單項與聯合診斷宮頸癌的價值，并計算與金標準的一致性。真陽性用a表示，真陰性用d表示，假陽性用c表示，假陰性用b表示。靈敏性=a/(a+c)，準確度=(a+d)/n，特異性=d/(b+d)，陰性預測值=d/(c+d)，陽性預測值=a/(a+b)。

1.4 統計學分析

采用SPSS 22.0統計分析軟件，計數資料以%表示，采用χ2檢驗；一致性采用Kappa檢驗；P＜0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 陰道鏡檢查結果

256例宮頸病變患者，經陰道鏡檢查發現100例為炎癥病變，83例CIN Ⅰ，38例CIN Ⅱ，30例CIN Ⅲ，5例SCC，陽性檢出率為60.94%（156/256）。

2.2 診斷結果

TCT、HPV-DNA聯合診斷的靈敏度、特異度、準確度、陽性預測值、陰性預測值均高于TCT、HPV-DNA，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1～2。

表1.TCT、HPV-DNA單項及聯合診斷結果(n)

表2.TCT、HPV-DNA單項及聯合診斷效能對比

2.3 HPV-DNA、TCT單項與聯合診斷與陰道鏡檢查結果的一致性

TCT 診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結果的一致性差（Kappa=0.245，P＜0.05），HPV-DNA 診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結果的一致性理想（Kappa=0.425，P＜0.05），TCT、HPV-DNA聯合診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結果的一致性極好（Kappa=0.910，P＜0.05）。

3.討論

隨著生活節奏加快以及女性工作壓力增加，宮頸癌的發病率逐年升高，對女性生殖健康造成較大影響，患者早期若能獲得系統高效的治療可控制疾病進展，預后較為理想，因此需盡早明確診斷[6]。常規巴氏涂片法為常用方法，但受取材因素影響，標本污染率高，導致誤診情況頻發，診斷效能不盡如人意。因此，臨床需積極尋找更加準確的診斷方法[7]。

隨著細胞學篩查用于臨床，宮頸癌疾病早期篩查檢出率有所提高，TCT取材、制片等操作均嚴格按照工藝流程進行，對標本進行系統化處理，減少外界因素帶來的干擾，便于清晰、均勻的觀察細胞分布，細胞辨識度隨之增加，可防止細胞丟失或污染，獲得高質量制片，利于及時發現異常的宮頸上皮細胞[8,9]。但隨著臨床研究發現，性生活規律的成年女性進行TCT檢查陽性檢出率為6%左右，導致存在一定的誤診情況，臨床應用仍有局限性[10]。宮頸癌前病變與宮頸癌的發生發展均與HPV感染存在密切關系，臨床已將HPVDNA分型檢測作為重要的篩查手段。本研究結果顯示，256例宮頸病變患者，經陰道鏡檢查發現100例為炎癥病變，83例CIN Ⅰ，38例CIN Ⅱ，30例CIN Ⅲ，5例SCC，陽性檢出率為60.94%（156/256）。TCT、HPV-DNA聯合診斷的靈敏度96.15%、特異度95.00%、準確度95.70%、陽性預測值96.77%、陰性預測值94.06%均高于TCT、HPV-DNA。TCT診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結果的一致性差，HPV-DNA診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結果的一致性理想，TCT、HPV-DNA聯合診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結果的一致性極好。表明宮頸癌篩查中使用HPV-DNA分型檢測聯合TCT檢查應用價值較高，靈敏度、特異度均優于各項單一診斷，利于提高診斷準確率，為臨床鑒別診斷提供更多參考信息。黃艷等[11]研究顯示，宮頸病變與高危型HPV感染存在密切關系，HPV基因分型檢測在早期宮頸癌及癌前病變篩查中的靈敏度、準確度均高于TCT，在臨床應用具有較高價值，可為早期診斷提供更多有價值的參考，與本研究結果存在相似之處，進一步佐證HPV基因分型檢測的應用價值。分析其原因為，HPV由環形DNA病毒構成，是重要的病原體，包含低危型與高危型，數十種高危型HPV均與宮頸癌有密切關系，而癌前病變患者均伴有HPV感染，故HPV檢測敏感度較高，為臨床診斷與治療均提供較多的參考信息[12]。HPV-DNA分型檢測聯合TCT檢查可提高宮頸癌檢出率，診斷效能較高，為臨床鑒別診斷提供更多參考依據，便于制定治療方案。

綜上所述，宮頸癌篩查中使用HPV-DNA分型檢測聯合TCT檢查應用價值較高，靈敏度、特異度均優于各項單一診斷，利于提高診斷準確率，為臨床鑒別診斷提供更多參考信息。