古浪縣布魯氏菌病的流行病學調查與防控

徐錦鳳，楊 琨，張開禮，袁麗晶，魏潤明

（武威職業學院，甘肅 武威 733000）

布魯氏菌病是近年頻發的人獸共患傳染病，由布魯氏菌引起在羊群中發病率較高，家畜感染后會嚴重影響動物的生產性能和繁殖性能，如公畜睪丸炎和附睪炎、母畜出現流產和不孕。同時布魯氏菌還可以感染人，威脅人類的健康。人感染后會出現波狀熱、乏力、關節疼等癥狀，且容易遷延至多個臟器系統成為慢性虛弱性疾病。隨著生活水平的提高，牛、羊等家畜流通廣且數量大，養殖人員對布魯氏菌病認識不足，養殖設備生物安全設施參差不齊，以及未及時接種疫苗等，使得布魯氏菌病的發病率呈上升趨勢，給防治工作造成很大困難。因此，家畜布魯氏菌病的預防具有重要作用，為將布魯氏菌病的擴散降到最低水平，新型高效的布魯氏菌病疫苗的開發迫在眉睫。

1 材料與方法

1.1 樣品來源 對古浪縣5 個鄉鎮集中養殖區和散養區域開展布病知識問卷及羊布病流行病學調查,共采集羊血清樣品100 份。

1.2 實驗試劑 布魯氏菌病虎紅平板凝集實驗抗原(中國獸醫藥品監察所)；布魯氏菌膠體金試紙條檢測卡（維德維康），標準陰性、陽性血清(中國獸醫藥品監察所)。

1.3 實驗方法

1.3.1 流行病學調查 通過咨詢古浪縣畜牧局技術人員，以羊養殖規模大、養殖較集中的鄉鎮為主要單位，選擇了5 個鄉鎮，通過詢問、發放調查問卷、現場查看等方式進行調查，發放調查問卷250份。根據問卷反饋的信息，深入養殖場，對養殖場負責人、飼養員及散養農戶進行詢問，對羊和人患布病的癥狀及羊個體檢查、疫苗使用情況和流通情況等進行全面調查研究。本次調查對小型規?；B殖場及散養戶進行隨機抽樣檢查，確定的抽樣調查對象完全可以代表該縣區羊養殖的真實現狀。

1.3.2 血清學評價 （1）虎紅平板凝集實驗 根據國家標準GB/T 18646-2002《動物布魯氏菌病診斷技術》對所采集的羊血清進行布魯氏菌病的血清學檢查。在玻璃板上標記后用50 μL 移液器滴加虎紅抗原30 μL，再滴加被檢血清30 μL，用移液吸頭攪動使血清和抗原混勻，5 min 后觀察凝集情況，同時設定陰陽性對照。在對照結果成立的情況下，判定被檢血清結果。判定方法如下：在5 min內進行結果判定,出現肉眼可見凝集現象者判為陽性(+),無凝集現象，呈均勻粉紅色者判為陰性(-)。

（2）膠體金試紙卡檢測試驗 用移液器移取30 μL 分離的血清于膠體金檢測稀釋液中，混勻后滴100 μL 于布魯氏菌膠體金試紙條檢測卡滴液孔。靜置1～2 min，1 min 內出現兩條線判定為陽性（+），一條線判定為陰性（-）。

2 實驗結果

2.1 調查結果 走訪共計5 個鄉鎮，調查發現，定寧鎮、永豐灘鎮、黃花灘鎮及土門鎮四個鄉鎮的養殖人員對布病相關知識及羊患布病的癥狀基本不了解，超過50%以上（見表1）。西靖鎮養殖場有過多次羊患布病導致流產的病例，當地獸醫站對養殖場進行消毒殺菌處理及疫苗注射；對養殖戶進行過相關知識培訓。因此，該調查結果也為后續實驗提供實驗依據，在后續實驗中對西靖鎮養殖場的羊進行抽樣采血及檢測，對該區域羊布病的發生情況工作進一步調查。

表1 布魯氏菌相關知識調查統計表

2.2 血清學評價

2.2.1 虎紅平板凝集實驗 被檢血清在3～5 min內出現肉眼可見凝集現象者判為陽性（+）；無凝集現象，呈均勻粉紅色者判為陰性(-)，如圖1 中5、6、7 號樣品結果所示。

圖1 虎紅平板檢測結果

通過RBPT 初查檢測5 個養殖區布魯氏菌病的流行情況。結果表明該區5 個養殖區中C 和E 村羊體內存在布魯氏菌抗體，陽性檢出率分別為42.8%和52.9%。其余3 個養殖區均未檢出陽性（見表2）。

表2 羊布魯氏菌病血清學檢測情況統計表

2.2.2 膠體金試紙條檢測實驗 用移液器移取30 μL 分離的血清于膠體金檢測稀釋液中，混勻后滴100 μL 于布魯氏菌膠體金試紙條檢測卡滴液孔。靜置1～2 min，1 min 內出現兩條線判定為陽性（+），一條線判定為陰性（-）。如圖2 結果所示。

圖2 膠體金試紙卡檢測實驗結果

通過膠體金檢測卡檢測5 個養殖區布魯氏菌病的流行情況。結果表明該區5 個養殖區中C 和E村羊體內存在布魯氏菌抗體,陽性檢出率分別為42.8%和52.9%。其余3 個養殖區均未檢出陽性。該實驗結果與RBPT 實驗結果一致（見表3）。

表3 羊布魯氏菌病血清學檢測情況統計表

3 討論

3.1 養羊戶養殖觀念落后，生物安全意識缺乏 本研究通過調查問卷及走訪的形式對古浪縣5個鄉鎮展開調查，發現養殖戶主要以小規模散養戶居多，且對布病防控知識不甚了解，沒有自我防護能力。被調查者基本為農民養殖戶，文化水平低，雖然大部分人聽說過布病，但多數不了解布病的傳播途徑、如何預防等知識。調查發現古浪縣有過羊感染布病流產的先例，養殖戶在畜牧養殖技術員的指導下進行了隔離防護，并注射了布病疫苗，但防疫措施仍不完善。

3.2 古浪縣羊布病感染率低 本研究利用RBPT方法和膠體金試紙卡檢測方法,對古浪5 個鄉鎮的羊群布魯氏菌病進行了較為系統的血清學調查。從這次調查結果看，羊布病血清學檢測雖有陽性病例，但初步判定為疫苗免疫后產生的抗體。目前尚無法明確判斷陽性血清病例中是否存在布魯氏菌感染，有待進一步觀察。在本次調查中，未免疫疫苗區域的羊血清學檢測結果均為陰性。表明該區域布魯氏菌感染率較低。

3.3 防控措施 （1）加大布病危害的宣傳 在此次調查過程中發現，大部分養殖戶對布病一無所知，防范意識不強，在養殖過程中很少采取防護消毒措施。建議今后對羊養殖戶開展布病預防知識培訓及宣傳普及工作。重點對散養農戶、販運商販進行宣傳培訓，提高從業人員生物安全意識。只有廣大群眾都認識到布病的危害，自覺參與布病防治，布病才能真正得到控制。

（2）加強牲畜流通監管 政府部門應嚴格把關，嚴禁販運人員從布病陽性地區調運羊，同時對外地引進的羊嚴格進行布病檢測，確保無感染后方可混群飼養。

（3）加大經費投入 由于養殖戶大多為農戶散養，無過多資金來保證養殖過程中的防控投入。應提倡養殖戶加強資金和人力投入，保證布病的檢測、免疫和凈化等工作能夠有效開展。

（4）密切部門協作 布病防控工作涉及面比較廣、執行難度高、工作量大，須由衛生與畜牧等多部門密切配合與協作，方能將布病危害降到最低。

4 結論

本研究調查分析了古浪縣5 個鄉鎮的流行情況，并通過布魯氏菌虎紅平板凝集試驗和膠體金試紙卡檢測實驗對隨機采集的100 份羊血清進行血清學檢測，發現3 個鄉鎮均為陰性，未感染布病，2個鄉鎮血清學陽性率分別為42.8%和52.9%，為疫苗免疫產生的抗體，有待進一步跟蹤檢測。雖研究結果顯示古浪縣地區羊布病感染率低，但仍需加大布病危害的宣傳,加強牲畜流通監管，加大經費投入，多部門密切協作，加強布魯氏菌病防控措施，方能將布病危害降到最低。