慢性心力衰竭病人血清miR-487b表達水平及其與心肌重構的關系

潘立棟 呂強 王飛飛 韓震海 王蘭

摘要 目的：分析慢性心力衰竭病人血清微小核糖核酸-487b（miR-487b）表達水平及其與心肌重構的關系。方法：選取2019年10月—2021年10月西安高新醫院收治的96例慢性心力衰竭病人作為研究組，按照紐約心臟病協會心功能分級將病人分為Ⅰ級或Ⅱ級22例，Ⅲ級41例，Ⅳ級33例；另選取同期在同一所醫院體檢的健康者102名作為對照組。采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應（qRT-PCR）法檢測所有研究對象血清miR-487b表達水平。比較研究組與對照組血清miR-487b表達水平及研究組不同心功能分級病人血清miR-487b表達水平。采用Pearson法分析慢性心力衰竭病人血清miR-487b表達水平與心肌重構指標［包括左室重構指數（LVRI）、左室舒張末期內徑（LVEDD）、左心房內徑（LAD）、左室質量指數（LVMI）、左室后壁厚度（LVPW）］的關系。結果：研究組血清miR-487b表達水平低于對照組（P＜0.001）；研究組LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于對照組（P＜0.001），LVRI低于對照組（P＜0.001）。研究組心功能Ⅳ級病人LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于Ⅰ級或Ⅱ級、Ⅲ級病人（P＜0.05），miR-487b表達水平、LVRI均低于Ⅰ級或Ⅱ級、Ⅲ級病人（P＜0.05）；Ⅲ級病人LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于Ⅰ級或Ⅱ級病人（P＜0.05），miR-487b表達水平、LVRI均低于Ⅰ級或Ⅱ級病人（P＜0.05）。Pearson相關分析結果顯示，慢性心力衰竭病人血清miR-487b與LAD、LVMI、LVPW均呈負相關（r值分別為－0.578、－0.502、－0.514，P＜0.001），與LVRI呈正相關（r＝0.464，P＜0.001）。結論：慢性心力衰竭病人血清miR-487b表達水平降低，且與心肌重構密切相關。

關鍵詞 慢性心力衰竭；微小核糖核酸-487b；心肌重構；心功能指標；心功能分級

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.05.004

Serum miR-487b Expression in Patients with Chronic Heart Failure and Its Relationship with Myocardial Remodeling

PAN Lidong， LYU Qiang， WANG Feifei， HAN Zhenhai， WANG Lan

Xi′an Gaoxin Hospital， Xi′an 710000， Shaanxi， China

Corresponding Author HAN Zhenhai， E-mail： sea95527@sina.com

Abstract Objective：To investigate the serum microRNAs 487b（miR-487b） expression in patients with chronic heart failure and its relationship with myocardial remodeling.Methods：Ninety-six patients with chronic heart failure were selected as the study group.According to the heart function classification of New York Heart Association，the patients were divided into grade Ⅰ or Ⅱ（22 cases），grade Ⅲ（41 cases） and grade Ⅳ（33 cases），while 102 healthy individuals were selected as the control group.The serum miR-487b expression was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction（qRT-PCR）.The serum miR-487b expression were compared between the study group and the control group，and the serum miR-487b expression in patients with different cardiac function grades was compared.Pearson method was used to analyze the relationship between serum miR-487b expression level and myocardial remodeling indexes，including left ventricular remodeling index（LVRI），left ventricular end-diastolic diameter（LVEDD），left atrial diameter（LAD），left ventricular mass index（LVMI），and left ventricular posterior wall thickness（LVPW） in patients with chronic heart failure.Results：The serum miR-487b expression in the study group was lower than that in the control group（P＜0.001）.The LVEDD，LAD，LVMI and LVPW of the study group were higher than those of the control group（P＜0.001），and the LVRI of the study group was lower than that of the control group（P＜0.001）.In the study group，LVEDD，LAD，LVMI and LVPW of grade Ⅳ patients were higher than those of grade Ⅰ or Ⅱ and grade Ⅲ（P＜0.05），and the serum miR-487b expression and LVRI were lower than those of grade Ⅰ or Ⅱ and grade Ⅲ（P＜0.05）.The LVEDD，LAD，LVMI and LVPW of grade Ⅲ patients were higher than those of grade Ⅰ or Ⅱ（P＜0.05），and the serum miR-487b expression and LVRI were lower than those of grade Ⅰ or Ⅱ（P＜0.05）.The results of Pearson analysis showed that serum miR-487b was negatively correlated with LAD，LVMI and LVPW（r values were －0.578，－0.502 and －0.514，P＜0.001） and positively correlated with LVRI（r＝0.464，P＜0.001） in patients with chronic heart failure.Conclusion：The serum miR-487b expression were decreased in patients with chronic heart failure and it was closely associated with myocardial remodeling.

Keywords chronic heart failure; microRNA-487b; myocardial remodeling; cardiac function indexes; cardiac function classification

基金項目 西安市科技計劃項目［No.20YXJ003（2）］

作者單位 1.西安高新醫院（西安? 710000）；2.西安市第一醫院

通訊作者 韓震海，E-mail：sea95527@sina.com

引用信息 潘立棟，呂強，王飛飛，等.慢性心力衰竭病人血清miR-487b表達水平及其與心肌重構的關系［J］.中西醫結合心腦血管病雜志，2024，22（5）：795-798.

慢性心力衰竭是由于各種器質性或功能性心臟疾病造成心室充盈、射血能力下降的一種臨床綜合征，嚴重影響病人日常生活和健康安全［1-2］。有研究顯示，心肌重構是貫穿于慢性心力衰竭發展中的病理生理過程，抑制心肌重構是早期治療慢性心力衰竭的關鍵措施［3］。微小核糖核酸（miRNA）是細胞生長、分化、凋亡等過程的重要調節因子，在心血管疾病發生發展中發揮著重要作用，參與心肌細胞凋亡、心肌重構等病理生理過程［4-6］。Welten等［7］研究報道，缺血后抑制miR-487b表達可促進側支動脈直徑增加和毛細血管生成，有助于心血管事件后血流恢復。劉一等［8］研究指出，慢性心力衰竭病人和大鼠血清miR-487b表達均下降，miR-487b可抑制心肌纖維化，發揮保護心臟的作用，推測血清miR-487b可能與慢性心力衰竭病人心肌重構的發生發展有關。本研究通過分析慢性心力衰竭病人血清miR-487b表達水平變化，探討其與心肌重構的關系，旨在為慢性心力衰竭病人的治療提供參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

經醫院倫理委員會審批后，選取2019年10月—2021年10月西安高新醫院收治的96例慢性心力衰竭病人作為研究組。納入標準：符合《慢性心力衰竭基層診療指南》［9］中相關標準，確診為慢性心力衰竭；病程＞6個月；所有病人均簽署知情同意書。排除標準：合并急慢性感染、惡性腫瘤；合并心臟瓣膜病、肺動脈栓塞；近期接受介入術治療；近期發生急性心肌梗死、不穩定型心絞痛；肝、腎等重要器官功能不全。研究組96例，男55例，女41例；年齡45～76（64.42±8.12）歲；體質指數22.45～27.76（25.14±1.56）kg/m2；原發疾病類型：冠心病23例，高血壓性心臟病30例，糖尿病性心肌病24例，缺血性心臟病19例。根據心功能分級分為Ⅰ級或Ⅱ級22例，Ⅲ級41例，Ⅳ級33例。另選取同期在同一所醫院體檢的健康者102名作為對照組，男57名，女45名；年齡46～78（64.71±8.26）歲；體質指數21.37～27.42（24.84±1.43）kg/m2。對照組與研究組性別、年齡、體質指數比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。

病情嚴重程度分級標準［10］：按照紐約心臟病協會心功能分級，Ⅰ級為日?；顒硬皇芟拗?，無心力衰竭癥狀；Ⅱ級為日?；顒由允芟拗?，出現輕度乏力、呼吸困難等癥狀，休息后可緩解；Ⅲ級為日?；顒用黠@受限，輕度活動即出現乏力、呼吸困難等癥狀；Ⅳ級休息時出現上述心力衰竭癥狀，無法進行任何體力活動。

1.2 方法

1.2.1 血清miR-487b檢測方法

采集研究組與對照組空腹外周血5 mL，置于無菌抗凝管中，在4 h內將血液樣本置入150C型低速離心機（購自北京白洋醫療器械有限公司），以4 000 r/min離心5 min分離血清，取上清液后，統一置于－80 ℃冰箱中保存待測。采用RNA提取試劑盒（購自上海晶抗生物工程有限公司）和TRIzol裂解抽提法提取總RNA，鑒定純度和完整性后采用Fermentas逆轉錄試劑盒（購自上海晶抗生物工程有限公司）進行逆轉錄，反應條件：15 ℃ 30 min，45 ℃ 30 min，86 ℃ 5 min。使用熒光定量PCR儀（購自南京貝登電子商務有限公司）進行實時熒光定量聚合酶鏈式反應（qRT-PCR），miR-487b正向引物序列為5′-TGCGGAATCGTACAGGGTCATCCA-3′，反向引物序列為5′-CCAGTGCAGGGTCCCAGGT-3′；內參U6正向引物序列為5′-GCGCGTCGTGAAGCGTTC-3′，反向引物序列為5′-GTGCAGGGTCCGAGGT-3′；反應條件：95 ℃ 5 min，90 ℃ 20 s，60 ℃ 40 s，72 ℃ 25 s，共40個循環，應用2－△△Ct法計算miR-487b表達水平。記錄并比較研究組與對照組血清miR-487b表達水平及不同心功能分級病人血清miR-487b表達水平。

1.2.2 心肌重構指標檢查

采用飛利浦EPIQ 5超聲診斷儀對研究組和對照組行超聲心動圖檢查，測定左室重構指數（LVRI）、左室舒張末期內徑（LVEDD）、左心房內徑（LAD）、左室質量指數（LVMI）、左室后壁厚度（LVPW）。記錄并比較研究組不同心功能分級病人心肌重構指標。

1.3 觀察指標

比較研究組與對照組血清miR-487b表達水平、心肌重構指標及不同心功能分級病人血清miR-487b水平及心肌重構指標變化；采用Pearson相關性分析血清miR-487b水平與慢性心力衰竭病人心肌重構的關系，記錄相關系數（r）值。

1.4 統計學處理

采用SPSS 26.0軟件進行數據分析，符合正態分布的定量資料以均數±標準差（x±s）表示，多樣本比較采用單因素方差分析和SNK-q檢驗；定性資料以例數、百分比（%）表示，采用χ2檢驗。采用Pearson相關性分析慢性心力衰竭病人血清miR-487b水平與心肌重構的關系。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 研究組與對照組血清miR-487b表達水平

研究組血清miR-487b表達水平低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.001）。詳見表1。

2.2 研究組與對照組心肌重構指標比較

研究組LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于對照組（P＜0.001），LVRI低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.001）。詳見表2。

2.3 不同心功能分級病人血清miR-487b水平及心肌重構指標比較

不同心功能分級病人血清miR-487b、LVRI、LVEDD、LAD、LVMI、LVPW比較，差異有統計學意義（P＜0.001）。Ⅳ級病人LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于Ⅰ級或Ⅱ級、Ⅲ級（P＜0.05），miR-487b、LVRI低于Ⅰ級或Ⅱ級、Ⅲ級（P＜0.05）；Ⅲ級病人LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于Ⅰ級或Ⅱ級（P＜0.05），miR-487b、LVRI低于Ⅰ級或Ⅱ級（P＜0.05）。詳見表3。

2.4 慢性心力衰竭病人血清miR-487b水平與心肌重構的相關性

Pearson分析結果顯示，慢性心力衰竭病人血清miR-487b與LAD、LVMI、LVPW均呈負相關（P＜0.001），與LVRI呈正相關（P＜0.001）。詳見表4。

3 討 論

隨著我國人口老齡化的加劇，冠心病等心臟疾病發病率呈明顯上升趨勢，慢性心力衰竭病人數量日益增加，流行病學調查顯示，2021年該病在我國的發病率約為0.9%［11］。慢性心力衰竭發生發展的重要機制是心肌重構，心肌收縮能力下降，能量供應無法滿足機體的需求，引起心肌組織發生改變，最終導致心力衰竭的發生發展［12］。miRNA作為轉錄后基因表達的關鍵調節因子，參與多種病理過程［13］，但關于血清miR-487b與心肌重構的具體關系仍需進一步研究明確。

本研究結果顯示，慢性心力衰竭病人血清miR-487b表達低于對照組，且miR-487b水平隨著病人心功能分級程度加重而降低，提示血清miR-487b表達與慢性心力衰竭發生發展相關。miRNA是具有調節功能的非編碼RNA，其中miR-487b由14q32.31基因編碼，除在細胞分化、凋亡中發揮作用，還可通過多種信號通路調控心肌細胞的生理功能［14］。Kaur等［15］研究報道，在心血管生物學中包括miR-487a在內的多種miRNA調節和控制各種生物過程，包括心臟的發育、心臟功能的維持，與多種心血管疾病有關。有研究顯示，miR-487b通過抑制白細胞介素-33/生長抑素2信號通路，減少慢性心力衰竭大鼠模型細胞凋亡、纖維化，在慢性心力衰竭大鼠模型中表達顯著減少［16］，說明miR-487b與心肌細胞病變相關。本研究結果還顯示，研究組LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均高于對照組，且隨著病人心功能分級程度加重而增加；LVRI低于對照組，且隨著病人心功能分級程度加重而減小，提示心肌重構情況與慢性心力衰竭發展程度相關。心肌重構是由一系列復雜的細胞機制造成心肌結構、功能變化，臨床多見心室容量增加、心室形狀改變、橫徑增加等，心功能損傷越重，心肌重構程度越嚴重［17］。心肌重構貫穿慢性心力衰竭發展的全過程，心血管疾病初期，由于心功能受損，為維持正常器官血液灌注，發生心肌重構，隨著病情持續發展，造成心室擴張，形成惡性循環，最終加重慢性心力衰竭甚至死亡［18］。LVRI、LVEDD、LAD、LVMI、LVPW均為臨床評價心肌重構的常用指標，高敏等［19］研究顯示，慢性心力衰竭病人LVEDD、LVMI、LVPW均高于健康者，且隨心功能分級程度加重而升高；LVRI低于健康者，且隨心功能分級程度加重而降低，進一步說明心肌重構程度與慢性心力衰竭病情發展密切相關。本研究Pearson分析結果顯示，慢性心力衰竭病人血清miR-487b與LAD、LVMI、LVPW均呈負相關，與LVRI呈正相關，提示miR-487b與心肌重構有關。LVRI、LVMI、LVPW等指標可反映心肌重構的整體情況，其中LVEDD、LVPW越大提示心室壁增厚、心臟變形能力下降，心肌重構越嚴重。miR-487b在多種心血管疾病中發揮著重要作用，且與病人預后相關。裴穎皓等［20］研究顯示，血清miR-487參與急性心肌梗死后心肌細胞纖維化的病變過程。Wang等［21］研究顯示，上調血清miR-487b水平，心肌細胞超氧化物歧化酶水平上升，可減少氧化反應，保護心肌細胞凋亡和纖維化，改善心力衰竭病人心臟功能，其水平可一定程度反映慢性心力衰竭病人心肌重構程度。由此可見，miR-487b可能通過調控心肌細胞的增殖和凋亡，影響慢性心力衰竭病人心肌重構。

綜上所述，慢性心力衰竭病人血清miR-487b和心肌重構指標較健康人群均異常變化，且與LVRI、LAD、LVMI、LVPW指標密切相關，對臨床評估慢性心力衰竭病情和心肌重構有一定的指導意義。

參考文獻：

［1］ TERLIZZESE P，ALBANESE M，GRANDE D，et al.TSH variations in chronic heart failure outpatients：clinical correlates and outcomes［J］.Endocrine，Metabolic & Immune Disorders Drug Targets，2021，21（10）：1935-1942.

［2］ BRAGAZZI N L，ZHONG W，SHU J X，et al.Burden of heart failure and underlying causes in 195 countries and territories from 1990 to 2017［J］.European Journal of Preventive Cardiology，2021，28（15）：1682-1690.

［3］ ZHAO Y N，LI H，ZHAO C，et al.ST2 silencing aggravates ventricular remodeling and chronic heart failure in rats by mediating the IL-33/ST2 axis［J］.Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine，2020，14（9）：1201-1212.

［4］ HENNING R J.Cardiovascular exosomes and microRNAs in cardiovascular physiology and pathophysiology［J］.Journal of Cardiovascular Translational Research，2021，14（2）：195-212.

［5］ LIU Y，SONG J W，LIN J Y，et al.Roles of microRNA-122 in cardiovascular fibrosis and related diseases［J］.Cardiovascular Toxicology，2020，20（5）：463-473.

［6］ DE YBENES V G，BRIONES A M，MARTOS-FOLGADO I，et al.Aging-associated miR-217 aggravates atherosclerosis and promotes cardiovascular dysfunction［J］.Arteriosclerosis，Thrombosis，and Vascular Biology，2020，40（10）：2408-2424.

［7］ WELTEN S M J，BASTIAANSEN A J N M，DE JONG R C M，et al.Inhibition of 14q32 microRNAs miR-329，miR-487b，miR-494，and miR-495 increases neovascularization and blood flow recovery after ischemia［J］.Circulation Research，2014，115（8）：696-708.

［8］ 劉一，齊文娟.MiR-487b在改善慢性心力衰竭中的作用機制［J］.基因組學與應用生物學，2020，39（6）：2798-2805.

［9］ 中華醫學會，中華醫學會雜志社，中華醫學會全科醫學分會，等.慢性心力衰竭基層診療指南（實踐版·2019）［J］.中華全科醫師雜志，2019，18（10）：948-956.

［10］ 李俐，肖俊會，畢健成，等.老年慢性心力衰竭患者血漿BNP、TNF-α和血清cTnI水平與心室重構指標及心功能的相關性［J］.中國老年學雜志，2019，39（5）：1031-1034.

［11］ PONGIGLIONE B，TORBICA A，GALE C P，et al.Patient，hospital and country-level risk factors of all-cause mortality among patients with chronic heart failure：prospective international cohort study［J］.PLoS One，2021，16（5）：e0250931.

［12］ LI M H，ZHENG C，KAWADA T，et al.Intracerebroventricular infusion of donepezil prevents cardiac remodeling and improves the prognosis of chronic heart failure rats［J］.The Journal of Physiological Sciences，2020，70（1）：11.

［13］ LI J，SALVADOR A M，LI G P，et al.MiR-30d regulates cardiac remodeling by intracellular and paracrine signaling［J］.Circulation Research，2021，128（1）：e1-e23.

［14］ FAN X D，LUO Y，WANG J，et al.MiR-154-3p and miR-487-3p synergistically modulate RHOA signaling in the carcinogenesis of thyroid cancer［J］.Bioscience Reports，2020，40（1）：BSR20193158.

［15］ KAUR A，MACKIN S T，SCHLOSSER K，et al.Systematic review of microRNA biomarkers in acute coronary syndrome and stable coronary artery disease［J］.Cardiovascular Research，2020，116（6）：1113-1124.

［16］ WANG E W，JIA X S，RUAN C W，et al.MiR-487b mitigates chronic heart failure through inhibition of the IL-33/ST2 signaling pathway［J］.Oncotarget，2017，8（31）：51688-51702.

［17］ ZHAO H M，YANG H Q，GENG C，et al.Role of IgE-FcεR1 in pathological cardiac remodeling and dysfunction［J］.Circulation，2021，143（10）：1014-1030.

［18］ CANTY J M.Myocardial injury，troponin release，and cardiomyocyte death in brief ischemia，failure，and ventricular remodeling［J］.American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology，2022，323（1）：H1-H15.

［19］ 高敏，吳藝，高守君，等.慢性心力衰竭患者血清miR-30a、miR-101a表達及其與心肌重構和心功能的相關性［J］.重慶醫學，2021，50（5）：762-766.

［20］ 裴穎皓，王俊，鐘勇，等.血清同型半胱氨酸和miR水平與非典型心絞痛病變程度的相關性分析［J］.微循環學雜志，2016，26（1）：34-37.

［21］ WANG W L，CHEN L J，WEI S Y，et al.Mechanoresponsive Smad5 enhances miR-487a processing to promote vascular endothelial proliferation in response to disturbed flow［J］.Frontiers in Cell and Developmental Biology，2021，9：647714.

（收稿日期：2023-03-23）

（本文編輯薛妮）