注射用頭孢哌酮鈉質量評價

李茜?楊博涵?李倚天?張婷婷?李潔?劉英

摘要：目的 對國產與進口注射用頭孢哌酮鈉的質量現狀進行評價。方法 采用法定標準檢驗與探索性研究相結合，對國家藥品抽檢的66批次樣品與調研企業收集的樣品進行檢驗與分析。結果 法定標準檢驗結果顯示，66批次注射用頭孢哌酮鈉合格率為100%。探索性研究揭示，《中國藥典》2020版標準的有關物質方法專屬性較差，限度較寬，難以保證安全性，建立專屬性較強的有關物質方法并可同時控制聚合物雜質；部分企業的樣品檢出微量的遺傳毒性雜質NDMA，建議企業加強對原料生產的監控；國內樣品晶體聚結較嚴重、粒度分布不均勻，復溶時間較長，提示國產原料的結晶工藝仍有提升空間；配伍結果顯示部分制劑企業說明書中推薦的配伍稀釋液的合理性值得商榷；綜合影響因素與加速試驗結果，結合各國藥典的貯藏條件，表明統一規定該品種在涼暗處或25 ℃貯藏可能存在一定的風險；包材相容性結果顯示覆膜膠塞與中硼硅玻璃瓶更能提升樣品的質量。結論 目前國產注射用頭孢哌酮鈉整體質量一般，質量標準有待提高，建議企業優化原料結晶工藝，同時選擇質量更好的包材。

關鍵詞：注射用頭孢哌酮鈉；質量評價；安全性；有效性；配伍；穩定性；包材相容性

中圖分類號：R917文獻標志碼：A

Quality evaluation of cefoperazone sodium for injection

Abstract Objective This study evaluated the quality condition of domestic and imported cefoperazone sodium for injection. Methods The statutory standard methods combined with exploratory research were used to evaluate the quality of the 66 batches of samples from the national drug market and from pharmaceutical manufacturers. Results The legal test results showed that the qualified rate of 66 batches of cefoperazone sodium for injection was 100%. But exploratory research showed that the specificity of the related substance method of ChP2020 was not good; the limits were broad， so it was difficult to guarantee safety. The related substance method with strong specific properties was established， which could control polymer impurities at the same time. The samples from some pharmaceutical manufacturers detected a trace mount of genetic impurity NDMA. It was suggested that pharmaceutical manufacturers should strengthen the monitoring of raw material production. There were also some problems in domestic samples， such as crystal coalescence; the particle size distribution was not uniform; and the resolution time was long， which all indicated that the crystallization process of domestic raw materials still had much to be improved. The compatibility results showed that the rationality of the compatibility diluents recommended in the instructions of some pharmaceutical manufacturers was questionable. The results of the influence factors and the accelerated test， combined with the storage conditions of pharmacopoeia from various countries， showed that there may be certain risks associated with samples being stored in a cool， dark place at 25 oC. The results of package material compatibility showed that the quality of the sample could be improved by the coated rubber plug and the medium-borosilicate glass bottle. Conclusion The quality of domestic cefoperazone sodium for injection at present is normal. The current statutory standard needs to be improved. It is suggested that pharmaceutical manufacturers optimize the crystallization process of raw materials and choose better-quality packaging materials.

Key words Cefoperazone sodium for injection;? Quality evaluation; Security; Effectiveness; Compatibility; Stability; Package compatibility

頭孢哌酮鈉為第三代頭孢菌素，1979年由日本富山化學工業公司研制，同年將技術與銷售權轉讓給輝瑞公司。注射用頭孢哌酮鈉1980年由輝瑞公司在歐洲上市，商品名為“Cefobid”，1983年上海第三制藥廠與太原制藥廠分別仿制成功，1985年在我國上市[1-2]。該品種主要通過抑制細菌細胞壁的合成而產生殺菌作用[3]，臨床上主要用于治療上下呼吸道感染、腹腔內感染、皮膚和軟組織感染等。

頭孢哌酮鈉僅注射用頭孢哌酮鈉一種劑型。查詢國家藥品監督管理局網站，注射用頭孢哌酮鈉國內生產企業67家，批準文號181個，涉及6種規格，分別為0.5、0.75、1.0、1.5、2.0與3.0 g。進口藥品企業1家，批準文號2個，涉及2種規格，分別為1.0 g與2.0 g?！吨袊幍洹?020年版（以下簡稱ChP2020）[4]、日本藥局方第18版（簡稱JP18）[5]及進口注冊標準JX20070031均收載注射用頭孢哌酮鈉。

2023年，國家藥品抽檢從22個?。ㄖ陛犑?、自治區）抽取到66批次注射用頭孢哌酮鈉，涉及生產企業5家（國內4家，進口1家），批準文號6個（國內5個，進口1個）。本文按ChP2020與JX20070031的注射用頭孢哌酮鈉質量標準進行法定標準檢驗，并基于質量源于設計（QbD）理念，從原料、生產工藝、包材及說明書等方面圍繞安全性、有效性、配伍、穩定性、包材相容性與質量可控性等進行探索性研究，對其質量現狀進行客觀評價，為進一步提高產品質量與完善標準提供依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器與試劑

Waters2695高效液相色譜儀（Waters公司）；LC-30AD-QTOF LCMS-9030四級桿飛行時間質譜儀、XRD-7000型X射線衍射儀及IRP restige-21傅里葉紅外變換光譜儀（Shimadzu公司）；Thermo QE plus離子軌道阱高分辨質譜儀、FEI Q45掃描電子顯微鏡及DIONEX ISC-5000+離子色譜儀（Thermo公司）；7010B GC/MS Triple Quad氣相質譜聯用儀、7890B氣相色譜儀及1260 Infinity Ⅱ液相色譜儀（Agilent公司）；Mastersizaer2000型激光粒度儀（馬爾文公司）；STY-1A滲透壓測定儀（天大天發公司）；FlexStation3酶標儀（MD公司）；ECLIPSE 80i顯微鏡（Nikon公司）；PerkinElmer NexION型電感耦合等離子體質譜儀（PE公司）；MARS 6型微波消解儀（美國CEM公司）；S400-K pH多參數測定儀與XPE205電子天平（Mettler公司）；2100AN濁度儀（Hach公司）。

甲醇、乙腈、磷酸、甲酸、甲磺酸和乙酸乙酯均為色譜純，水為MilliQ去離子水，其余試劑均為分析純。

1.2 試藥

標準物質：頭孢哌酮（批號130420-201105），頭孢哌酮雜質A（批號130420-202006），1-甲基-5-巰基四氮唑（即頭孢哌酮雜質C，批號130617-201702），7-氨基頭孢烷酸（即頭孢哌酮雜質E，批號130538-200902）及N-亞硝基二甲胺（批號510166-202003）均來源于中國食品藥品檢定研究院；頭孢哌酮雜質B（批號PITBPT-B-EP-YT0704-01），頭孢哌酮雜質D（批號PITBPT-D-EP-20191024-01），頭孢哌酮雜質F（批號PITBPT-F-EP-YN1206-01），頭孢哌酮雜質G（批號PITBPT-G-20180727-01），頭孢哌酮雜質547（批號PITBPT-TSD-20200516-01），雙母核二聚體雜質（批號PITBPT-DP-20200619-01），7-TMCA雜質（批號P17-TMCA-20190401-01）及頭孢哌酮二聚體雜質（批號PITBPT-Dimer-yn1122-01）均來源于廣州牌牌生物科技有限公司；氧哌嗪酸雜質（批號230100022）來源于C制藥有限公司；氧化化合物雜質（批號XH19-2296），開環化合物雜質（批號XH19-2297）均來源于Hi-Chemical.ING；N-亞硝基二乙胺（批號F0032407）來源于北京Mahage生物技術公司；鈉元素標準溶液（批號22C019-7），鉀元素標準溶液（批號228044-2）及混合元素標準溶液（批號23D60460與23D61181）均來源于國家有色金屬及電子材料分析測試中心；六甲基環三硅氧烷（批號C12873477），八甲基環四硅氧烷（批號C10904254），十甲基環五硅氧烷（批號C14951256）及十二甲基環己硅氧烷（批號C14751549）均來源于上海麥克林生化科技有限公司；抗氧劑2，6-叔丁基-4-甲基-苯酚（批號BCCC0032）來源于Aldrich公司；抗氧劑168（批號L990U58），抗氧劑330（批號LF70T68），抗氧劑1010（批號LK20V115）及抗氧劑1076（批號LRB0U122）均來源于河北百靈威超精細材料有限公司；抗氧劑3114（批號VQKUH-NY）來源于東京化成工業株式會社。

動物：家兔，雌雄各半，體重1.8～2.2 kg，購自北京富龍騰飛實驗動物研究院有限公司。

樣品：2023年國家藥品抽檢樣品注射用頭孢哌酮鈉66批次，涉及5家生產企業（分別為4家國內企業A、D、E、F與1家進口企業）；調研收集7批次頭孢哌酮鈉原料，涉及3家生產企業（分別為A、B、C企業）。

2 試驗方法

2.1 法定標準檢驗

共66批次樣品，其中64批次國內樣品執行ChP2020注射用頭孢哌酮鈉質量標準，主要項目包括性狀、鑒別、溶液的澄清度、吸光度、酸度、有關物質、頭孢哌酮聚合物、水分、不溶性微粒、細菌內毒素、無菌、可見異物、裝量差異與含量測定。2批次進口制劑執行JX20070031標準，與ChP2020標準相比，增加了比旋度、溶液的澄清度與顏色項目。

2.2 探索性研究

2.2.1 安全性

（1）有關物質? ? 建立新的有關物質HPLC分析方法：采用Waters Xbridge C18色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 ?m）；流動相A為1.76 g磷酸氫二銨溶于1 L水中，用磷酸調節pH值至2.5，流動相B為甲醇，梯度洗脫，洗脫程序見表1，流速為1.0 mL/min；柱溫30 ℃，檢測波長254 nm，進樣體積20 μL。

采用新建方法測定7批次原料與66批次制劑的有關物質，對原料、國內制劑與進口制劑的雜質譜進行比較分析。

探索性研究中分別采用高效凝膠色譜法與新建的有關物質方法測定66批次樣品中的聚合物含量，并與葡聚糖凝膠G10法進行比較分析。

（2）遺傳毒性雜質? ? 建立UPLC-MS/MS測定注射用頭孢哌酮鈉7批次原料、66批次制劑與影響因素試驗樣品中的N-亞硝基二甲胺（NDMA）與N-亞硝基二乙胺（NDEA）。色譜條件：采用GL Sciences InertsilTM ODS-3（100 mm×3.0 mm， 3 μm）色譜柱；流動相A為含0.1%甲酸的水溶液，流動相B為含0.1%甲酸的甲醇溶液，梯度程序見表2，流速為0.3 mL/min；柱溫35 ℃；進樣體積10 μL。質譜條件：采用電噴霧離子源（ESI源），正離子模式檢測，噴霧電壓3.5 kV，離子傳輸管溫度350 ℃，輔助氣溫度350 ℃，輔助氣流量10 mL/min，鞘氣流量40 mL/min，掃描模式為選擇離子監測（SIM），質譜采集時間為3.0～6.0與13.0～16.0 min。目標離子精確質量數m/z（+H）為75.05538（NDMA）與103.08674（NDEA）。

2.2.2 有效性

（1）復溶時間? ? 66批次樣品按標示量每瓶分別加注射用水、0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、5%葡萄糖-0.9%氯化鈉注射液各適量，制成濃度分別為含頭孢哌酮0.2 g/mL的溶液，以2次/s的頻率反復倒轉樣品并觀察其在不同稀釋液中的復溶情況。

（2）粒度與粒度分布? ?采用激光粒度儀對66批次樣品進行測定。測定方式為干法，振動進樣速度為60%，分散氣壓為0.8 bar。

（3）晶型與晶癖? ? 采用粉末X射線衍射對原料與制劑分別進行晶型測定，方法為：陽極靶材料CuKαl，管壓40 kV，管流30 mA，掃描范圍（2θ）5°～60°，掃描速率為2°/min，掃描間隔0.01°。采用掃描電鏡對原料與制劑分別進行晶癖測定，方法為：高真空模式，加速電壓10.0 kV，電流10.1 μA，工作距離12.9 mm，放大倍數10000倍。

（4）鈉離子含量與成鹽率? ? 采用離子色譜-抑制型電導檢測器測定樣品中的鈉離子含量。色譜柱為DionexIonPac CS12A（4.0 mm×250 mm）；檢測器為電導檢測器，抑制器為ERS 500；淋洗液為8 mmol/L甲磺酸溶液，流速為1.0 mL/min；柱溫30 ℃；進樣體積10 μL。成鹽率% =（鈉離子含量/22.99）/（頭孢哌酮含量/645.68）。

2.2.3 配伍

（1）配伍穩定性? ? 5家企業的樣品分別用0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、5%葡萄糖-0.9%氯化鈉注射液溶解并稀釋成濃度均為25 mg/mL的溶液，在20 ℃下放置，以溶液的澄清度、不溶性微粒及有關物質為指標，考察樣品24 h的配伍穩定性。

（2）滲透壓摩爾濃度? ? 根據各企業說明書的用法用量，D、E與F企業的樣品均采用5%葡萄糖-0.9%氯化鈉注射液作為配伍稀釋液，A企業制劑與進口制劑均采用5%葡萄糖注射液或0.9%氯化鈉注射液作為配伍稀釋液，采用冰點下降法測定66批次樣品的滲透壓摩爾濃度。

（3）體外溶血試驗? ? 取家兔心臟血離心沉淀的紅細胞混懸液，通過紅細胞溶血（RBC）試驗測定溶血率，考察注射用頭孢哌酮鈉與0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、5%葡萄糖-0.9%氯化鈉注射液配伍后的體外溶血情況，評價樣品與上述溶液配伍后的安全性。

2.2.4 穩定性

（1）影響因素試驗? ? 以性狀、有關物質、酸度、溶液的澄清度、溶液的顏色、聚合物、水分、可見異物及含量為指標，考察高溫（60 ℃）、高濕（相對濕度92.5%、25 ℃）與光照（4500 Lx）對注射用頭孢哌酮鈉質量的影響。

（2）加速試驗? ? 以性狀、有關物質、酸度、溶液的澄清度、溶液的顏色、聚合物、水分、可見異物及含量為指標，考察注射用頭孢哌酮鈉在加速試驗下（溫度40 ℃、相對濕度75%）質量的變化。

（3）貯藏? ? 通過穩定性試驗的結果，結合企業提供的長期試驗結果，再參考各國藥典中該品種的貯藏條件，分析注射用頭孢哌酮鈉更合適的貯藏條件。

2.2.5 包材相容性

（1）相容性試驗樣品? ? 5家企業的制劑在溫度40 ℃、相對濕度75%條件下分別正置、倒置1個月和3個月。

（2）試驗方法? ? 首先采用GC-MS法測定膠塞中的揮發性可提取物，預測潛在的目標浸出物；新建GC法與HPLC-UV法分別測定相容性試驗樣品中的浸出物含量（即硅氧烷類與抗氧劑類）；再對相容性試驗樣品進行性狀、酸度、有關物質、可見異物及含量等常規項目考察；接著采用ICP-MS法測定相容性樣品中的15種元素遷移量；最后采用亞甲藍法考察樣品對玻璃瓶的表面侵蝕情況。評價不同包材對注射用頭孢哌酮鈉質量的影響。

3 結果與討論

3.1 法定標準檢驗

按法定標準檢驗，66批次樣品均符合規定，合格率100%。對與產品質量密切相關的主要檢驗項目如酸度、有關物質、頭孢哌酮聚合物、水分及含量測定結果進行統計分析。

（1）酸度? ? 66批次樣品pH值為5.0～5.3，均值為5.1，企業間pH值差異較小。

（2）有關物質? ? 66批次樣品雜質A為0.2%～0.7%，其他單雜為0.3%～0.7%，其他總雜為0.4%～1.0%；進口制劑的其他單雜與其他總雜的含量均較國內樣品低。利用箱式圖比較批次大于6的國產企業樣品（圖1）：D企業樣品雜質A、其他單雜與其他總雜均離散較大；E企業樣品雜質A出現離群值，其可能原因為該批次樣品生產日期較早，貯藏過程中降解導致了雜質A的增加。

（3）頭孢哌酮聚合物? ? 66批次樣品的聚合物含量為0.03%～0.1%，均值為0.06%，遠低于標準規定限值0.8%。企業間比較，進口制劑的聚合物結果最高，為0.1%，其可能原因為測定方法的不同所致。國內樣品執行ChP2020標準，進口制劑執行JX20070031標準，二者均采用葡聚糖凝膠G10法，但流動相的濃度與流速均不同。采用ChP2020的方法測2批次進口制劑，結果均為0.05%，ChP2020方法的測定結果偏低。

（4）水分? ?66批次樣品的水分含量為3.3%～4.0%，均值為3.7%。D企業樣品水分離散程度較大，為3.3%～3.9%。不同企業的產品水分有差異，A企業樣品均值最高，為3.9%，其可能原因為注射用頭孢哌酮鈉具有引濕性，不同企業原料引濕性的差異及制劑生產過程的差異可能導致成品中水分含量的不同。

（5）含量測定? ?按無水物計算，66批次樣品的含量為91.6%～94.7%，均值為92.9%；各企業間的結果較接近，D企業樣品離散程度最大，有2個離群值，分析可能與該企業樣品水分離散程度較大有關。按平均裝量計算，66批次樣品含量為97.0%～101.6%，均值為99.3%；各企業間的結果稍有差異，E企業樣品含量稍低，均值為97.7%，可能與該企業樣品的平均裝量稍低有關（圖2）。

3.2 探索性研究

3.2.1 安全性

（1）有關物質? ? 頭孢哌酮鈉穩定性較差，其在生產與貯藏過程中有可能產生較多雜質[6]。BP2023[7]與EP11.0[8]頭孢哌酮鈉標準中收載了6個已知雜質，分別為雜質A、B、C、D、E與F。調研收集到了其他8個已知雜質，分別為雜質G、7-TMCA雜質、氧哌嗪酸雜質、雜質547、開環化合物、氧化化合物、雙母核二聚體雜質與頭孢哌酮二聚體雜質。目前ChP2020標準與JX2007003標準均采用等度洗脫方式，專屬性較差，無法完全分離上述雜質。限度方面僅控制了雜質A、其他單雜與其他總雜（JX2007003控制總雜）。新建的有關物質方法可分離英國藥典2023年版（以下簡稱BP2023）與歐洲藥典11.0版（以下簡稱EP11.0）中收載的6個已知雜質、調研收集的8個已知雜質及樣品中的未知雜質，方法專屬性更好（圖3～4）。

采用新方法測定66批次抽檢樣品與調研收集的7批次原料，結果見表3，與法定標準的有關物質方法比較，新建方法檢出的雜質個數更多，其他總雜含量更高，同時分析時間較短。新建方法中，雜質A按外標法計算，雜質B、雜質C與雜質E的校正因子分別為0.75、0.44與0.70，其余雜質按不加校正因子的主成分自身對照法計算。

對新建有關物質方法的測定結果進行分析，可見不同企業的原料雜質個數與雜質含量均有差異，C企業原料的雜質個數最少、雜質含量最低。制劑生產工藝對雜質的產生基本無影響；貯藏過程可導致制劑雜質增加。同一原料來源的制劑雜質個數基本相同但雜質含量有差異，原因為貯藏過程可導致雜質增加；不同原料來源的制劑雜質個數與雜質含量均有差異。進口制劑的原料來源于C企業，與國內制劑比較，進口制劑的雜質個數較少、雜質含量稍低。

進一步分析樣品中的聚合物雜質。目前β-內酰胺類抗生素聚合物的測定方法主要有3種：葡聚糖凝膠G10法、高效凝膠色譜法與反相高效液相色譜法[9-10]，該品種法定標準的聚合物測定方法均為葡聚糖凝膠G10法。采用高效凝膠色譜法測定66批次樣品的聚合物，含量為0.5%～1.1%，均值為0.8%，結果遠高于法定標準中葡聚糖凝膠G10的測定結果，其原因為高效凝膠色譜法測定的是頭孢哌酮部分聚合物與小分子雜質的混合物，且無法檢測到雙母核二聚體，沒有完全直接體現樣品中聚合物的真實含量。

采用新建的有關物質方法測定該品種中的聚合物，根據LC-MS對各雜質結構推斷結果，將圖4中雜質15～雜質18作為聚合物雜質。66批次樣品的聚合物含量為0.03%～0.2%，均值為0.1%。新方法中的聚合物不僅包括了葡聚糖凝膠G10系統中的聚合物，還包括了雙母核二聚體雜質，因而絕大部分樣品的結果高于法定標準中葡聚糖凝膠G10的測定結果。

（2）遺傳毒性雜質? ? 頭孢哌酮鈉的合成起始物料之一1-甲基-5-巰基-四氮唑，其由疊氮化物與異硫氰酸甲酯反應得到，疊氮化物中可能殘留微量的亞硝酸鈉，與異硫氰酸甲酯的合成起始物料一甲胺反應，有生成NDMA的風險。亞硝酸鈉如傳遞到頭孢哌酮鈉的后續反應中，遇到溶劑N， N-二甲基乙酰胺或三乙胺，可能會形成NDEA[11]。A企業的原料及其相關制劑（A、D與E企業）均檢出NDMA，結果為1.2～4.4 ppb，均低于限度10.6ppb，其余企業原料與制劑均未檢出NDMA；所有樣品均未檢出NDEA；影響因素試驗樣品中NDMA與NDEA的含量均未增加；表明NDMA來源于頭孢哌酮鈉原料。

3.2.2 有效性

（1）復溶時間? ? 66批次樣品均在120 s內復溶。不同企業的樣品復溶時間有差異，E企業樣品復溶時間最長，在注射用水、0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、5%葡萄糖-0.9%氯化鈉注射液中分別為76、105、107與104 s。進口制劑的復溶時間最短，在上述稀釋液中依次為37、30、31與33 s。

（2）粒度與粒度分布? ? 5家制劑企業的原料均采用碳酸氫鈉成鹽、丙酮溶液中結晶的溶媒結晶工藝，但制劑的粒徑差異較大，粒度分布不均勻；而進口制劑粒徑基本一致，粒度分布均勻。文獻報道，粒徑大小與粒度分布的均勻性通常與結晶溫度與溶媒加入的速度有關，結晶溫度較高，晶體生長速度較快，粒度較大。溶媒加入的速度合適且穩定，過飽和度值穩定，晶體生長速率穩定，粒度分布均勻[12]。提示A、B企業的原料結晶工藝仍有優化的空間。

（3）晶型與晶癖? ? 3家原料與5家制劑的粉末X射線衍射圖譜基本一致，表明均為同一晶型。掃描電鏡結果顯示，國內制劑與其相對應的A、B企業原料均為顆粒和短條狀結晶，晶體聚結嚴重；進口制劑與其對應的C企業原料均為顆粒和長條狀結晶，晶體聚結較輕（圖5～6）。表明A、B企業的原料結晶工藝與C企業有差異。

結合復溶時間、粒度與粒度分布結果，提示國內制劑晶體聚結較嚴重，粒度分布不均勻，復溶時間較長。進口制劑晶體聚結較輕，粒度分布均勻，復溶時間較短。

（4）鈉離子含量與成鹽率? ? 66批次樣品的鈉離子含量為3.2%～3.4%，成鹽率為97.6%～104.8%。5家制劑的結果基本一致，均能完全成鹽。

3.2.3 配伍

注射用頭孢哌酮鈉的給藥途徑主要為靜脈注射，其配伍后的安全性值得關注[13]。不同企業的說明書規定的配伍稀釋液不同，D企業與E企業均采用葡萄糖氯化鈉注射液作為配伍稀釋液；F企業說明書規定的稀釋液種類較多，但也采用了葡萄糖氯化鈉注射液；A企業與進口制劑均采用葡萄糖或氯化鈉注射液。

（1）配伍穩定性? ? 5家制劑分別同0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液及0.9%氯化鈉5%葡萄糖注射液配伍后室溫下放置24 h，溶液均澄清、不溶性微粒均與有關物質均符合規定，表明24 h配伍穩定性良好。

（2）滲透壓摩爾濃度? ? 按說明書的規定，D、E與F企業的樣品采用5%葡萄糖-0.9%氯化鈉注射液作為配伍稀釋液，配伍后滲透壓摩爾濃度均值為597 mOsmol/kg；A企業制劑與進口制劑均采用葡萄糖或氯化鈉注射液作為配伍稀釋液，配伍后滲透壓摩爾濃度接近正常人體血液的滲透壓摩爾濃度（285～310 mOsmol/kg）；5家制劑如采用5%葡萄糖注射液作為配伍稀釋液，配伍后滲透壓摩爾濃度接近正常人體血液的滲透壓摩爾濃度。

（3）體外溶血試驗? ? 5家制劑分別同5%葡萄糖-0.9%氯化鈉注射液配伍，均可出現紅細胞凝聚與溶血現象，配伍濃度為25 mg/mL時溶血率均值為37.2%；而與0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液配伍溶血率均較低，均值為5.5%。提示樣品與5%葡萄糖-0.9%氯化鈉注射液配伍存在安全隱患。D、E與F企業說明書均規定采用該溶液稀釋樣品，結合滲透壓摩爾濃度結果和進口制劑說明書，3家企業配伍稀釋液的合理性值得商榷。

3.2.4 穩定性

（1）影響因素試驗? ? 5家制劑企業的樣品在加速實驗中的變化趨勢相同。表現為：①性狀：高溫5與10 d、高濕及光照條件下樣品均無變化；高溫30 d時樣品的顏色均略微加深，但淺于標準規定的微黃色。②有關物質：高溫條件下樣品中雜質均增加；高溫30 d時，其他總雜為4.1%～4.3%，增幅為2.8%～3.5%，超過標準規定的限度。高濕與光照條件下有關物質變化較小，其他總雜僅增加0.1%。③酸度：高溫條件下樣品的pH值均降低，降幅為0.3～0.5。高濕與光照下pH值基本無變化。提示高溫條件下產生的雜質呈酸性，如圖4中的雜質8（頭孢哌酮開環內酯雜質）、雜質B與雜質G等。④溶液的澄清度：高溫條件下，進口制劑溶液均澄清，但國內制劑高溫30 d時溶液的澄清度均過規定的1號濁度標準液，其中F企業的樣品變化最大，高溫5 d時溶液的澄清度已超過限度，30 d時已接近3號濁度標準液。高濕與光照條件下5家制劑溶液的澄清度均低于限度。⑤溶液的顏色：高溫條件下樣品溶液的顏色均變深，高溫30 d時溶液的顏色相當于黃色6號標準比色液。高濕與光照條件下樣品溶液的顏色均保持不變，為介于黃色2號與3號標準比色液之間。即樣品在高溫條件下降解，產生了更多的有色雜質。⑥聚合物：高溫條件下樣品的聚合物含量均增加，增幅約為0.1%。高濕和光照條件下聚合物結果基本無變化。⑦水分：高溫和光照條件下，樣品的水分基本無變化；高濕條件下，隨放置時間增加水分略增，增幅為0.1%～0.4%。⑧可見異物：高溫、高濕和光照下樣品未檢出可見異物，即可見異物不受高溫、高濕與強光照射的影響。⑨含量：高溫條件下樣品的含量均顯著降低。高溫30 d時，按無水物計算的含量與按平均裝量計算的含量均低于法定標準規定的限度，其中F企業的樣品含量降幅最大約為9.7%。高濕與光照條件下樣品的含量基本無變化。綜上，表明高溫是影響注射用頭孢哌酮鈉質量的關鍵因素。

（2）加速試驗? ? 5家制劑企業的樣品在加速實驗中的變化趨勢相同。表現為：①性狀：樣品的性狀無變化，均為類白色結晶性粉末。②有關物質：有關物質均增加。加速試驗下放置3個月時，其他總雜為1.5%～1.8%，增幅為0.7%～1.0%。③酸度：pH值均降低，降幅為0.2～0.5。即樣品在高溫條件下產生了更多的酸性雜質。④溶液的澄清度：加速試驗下放置3個月時，進口制劑溶液的澄清度均為澄清，但國內制劑均超過限度，其中F企業的樣品增幅最大，加速試驗下放置1個月時溶液的澄清度已超過2號濁度標準液。⑤溶液的顏色：樣品溶液的顏色均加深，加速試驗下放置3個月時，溶液的顏色均相當于黃色4號標準比色液。即樣品降解產生了更多的有色雜質。⑥聚合物：樣品中聚合物的含量略增，增幅為0.02%～0.03%。⑦可見異物：可見異物不受加速試驗的影響。⑧含量：樣品含量均降低。加速試驗下放置3個月時，按平均裝量計算的含量均接近低限。

（3）貯藏? ? ChP2020標準的貯藏條件為“密閉，冷處保存”，但4家國內抽檢企業在2007—2010年間取得了“國家藥品監督管理局藥品補充申請批件”，將貯藏條件由現行標準的“冷處保存”變更為“在涼暗處保存”。C企業的原料為“冷處保存”，但采用該原料生產的進口制劑為“25 ℃以下避光”保存。

雜質譜分析顯示，貯藏過程中樣品雜質含量增加。影響因素試驗結果顯示，高溫條件下放置30 d時，5家企業的制劑有關物質含量均超限；含量亦均低于低限；酸度、溶液的顏色與聚合物含量的變化均較大；4家國內企業的制劑的澄清度均超限。加速試驗結果顯示，3個月時5家企業的制劑含量（按平均裝量計算）接近低限，酸度與溶液的顏色變化較大；國內制劑溶液的澄清度均超限。企業提供的長期穩定性試驗結果顯示，樣品放置24個月[溫度（25±2） ℃、相對濕度（60%±5%）]，有關物質增加1.3%～2.6%，pH值降低0.2～0.5，含量降低1.2%～4.3%。BP2023與EP11.0均規定頭孢哌酮鈉原料為“冷處”保存，JP18規定頭孢哌酮鈉原料與制劑均為“冷處”保存。綜上分析，溫度對該產品的質量影響最大，統一規定注射用頭孢哌酮鈉在“涼暗處”或“25 ℃以下避光”貯藏，可能存在一定的風險，說明書中根據具體產品的特性確定貯藏條件是較理想的方式。

3.2.5 包材相容性

注射用頭孢哌酮鈉為注射用無菌粉末，根據ChP2020四部通則9621《藥包材通用要求指導原則》[14]，其包材的風險程度為最高，同時制劑與包材也存在發生相互作用的風險。5家樣品的膠塞均為未覆膜膠塞，且玻璃瓶材質不同。A、D與F企業的樣品均為鈉鈣玻璃瓶；E企業1.0g規格的樣品為低硼硅玻璃瓶，0.5 g規格為鈉鈣玻璃瓶；進口制劑為中硼硅玻璃瓶。參考《化學藥品注射劑與藥用玻璃包裝容器相容性研究技術指導原則（試行）》與《化學藥品與彈性密封件相容性研究技術指導原則（試行）》[15-16]，對注射用頭孢哌酮鈉與包材進行相容性考察，確保樣品的安全性。

（1）膠塞中的揮發性可提取物? ? 5家制劑的膠塞中均檢出硅氧烷，主要為六甲基環三硅氧烷、八甲基環四硅氧烷、十甲基環五硅氧烷及十二甲基環六硅氧烷； A、D企業樣品的膠塞檢出抗氧劑2，6-叔丁基-4-甲基-苯酚（BHT）；提示膠塞中揮發性物質有遷移至樣品中的風險。

（2）浸出物試驗? ? 相容性試驗樣品中，硅氧烷類化合物六甲基環三硅氧烷含量為0.3～1.6 ppm、八甲基環四硅氧烷含量為0.8～23.9 ppm、十甲基環五硅氧烷含量為0.2～8.4 ppm、十二甲基環六硅氧烷含量為0.1～1.7 ppm，其中八甲基環四硅氧烷含量最高，但均遠低于限度266.7 ppm。隨放置時間增加樣品中的硅氧烷含量增加，倒置比正置含量高，表明未覆膜膠塞中的硅氧烷可不斷遷移至樣品中?？寡鮿╊惢衔铮篋、F企業的樣品檢出了BHT，分別為5.8～40.0 ppm與0.2～0.5 ppm；A、E企業的樣品檢出了抗氧劑1076，分別為2.2～4.3 ppm與1.2～1.8 ppm；均遠低于規定限度；進口制劑均未檢出6種抗氧劑。隨放置時間的增加，樣品中的抗氧劑含量均增加，倒置樣品中抗氧劑的含量比正置樣品高，表明未覆膜膠塞中的抗氧劑不斷遷移至樣品中。

（3）溶液的澄清度? ? 相容性試驗樣品中，倒置3個月的樣品溶液的澄清度均超限；更換為覆膜膠塞后，A、D企業的樣品與進口制劑溶液的澄清度均符合規定，但E、F企業的樣品仍超限；中硼硅玻璃瓶替換原樣品的玻璃瓶，5家企業的制劑溶液的澄清度均符合規定。表明未覆膜膠塞、鈉鈣與低硼硅玻璃瓶均可影響溶液的澄清度。

采用SPSS軟件對樣品中的硅氧烷、抗氧劑含量與溶液的澄清度（濁度值）分別進行雙變量相關分析，結果八甲基環四硅氧烷、十甲基環五硅氧烷與濁度值均呈中等相關，十二甲基硅氧烷、抗氧劑BHT與濁度值強弱相關，六甲基環三硅氧烷、抗氧劑1076與濁度值無相關性。即未覆膜膠塞對溶液的澄清度影響與膠塞中的八甲基環四硅氧烷、十甲基環五硅氧烷與抗氧劑BHT的遷移有關。

（4）常規檢驗? ? 相容性試驗樣品中，酸度、有關物質與含量正置與倒置結果基本一致。

（5）元素遷移試驗? ? 相容性試驗樣品中，15種元素遷移量均遠低于限值。

（6）玻璃內表面侵蝕試驗? ? 相容性試驗樣品的玻璃瓶中，均未出現亞甲藍染色現象，表明注射用頭孢哌酮鈉對玻璃瓶不產生表面侵蝕作用。

綜上，注射用頭孢哌酮鈉采用未覆膜膠塞、鈉鈣或低硼硅玻璃瓶影響溶液的澄清度。包材中的4種硅氧烷、6種抗氧劑及15種元素的遷移量均低于限值；樣品對玻璃瓶表面無侵蝕作用。

4 總結

采取法定標準檢驗結合探索性研究對注射用頭孢哌酮鈉的質量現狀進行了評價。按法定標準檢驗，66批次注射用頭孢哌酮鈉均符合規定。探索性研究顯示，ChP2020的有關物質方法專屬性較差、分析時間較長、限度較寬；ChP2020與JX20070031收載的聚合物測定方法對同批次樣品的測定結果差異約50%；新建立的有關物質方法專屬性較強，可同時控制樣品中的聚合物雜質。此外，A企業原料及其相關制劑中檢出微量的NDMA雜質，建議企業加強對原料生產的監控。國內制劑樣品晶體聚結嚴重、粒度分布不均勻、復溶時間較長，提示國產原料的結晶工藝仍有提升的空間；配伍結果顯示，D、E與F企業說明書中推薦的配伍稀釋液的合理性值得商榷。綜合影響因素與加速試驗結果，結合各國藥典中該品種的貯藏條件，統一規定注射用頭孢哌酮鈉在涼暗處或25 ℃貯藏可能存在一定的風險，根據具體產品的特性在說明書中明確貯藏條件是較理想的方式。包材相容性試驗結果表明，采用換覆膜膠塞與中硼硅玻璃瓶可提升樣品的質量。

參 考 文 獻

橋本茂一. 注射用頭孢哌酮的體內動態[J]. 國外醫藥抗生素分冊， 1990， 11（6）： 445-447.

徐文偉. 國產超廣譜頭孢菌素—注射用頭孢哌酮技術鑒定會在滬召開[J]. 抗生素， 1986， 11（1）： 79-80.

Elizabeth A， Funk M D， Larry J， et al. Antimicrobial activity， pharmacokinetics， adverse reaction， and therapeutic indications of cefoperazone[J]. Pharmacotherapy， 1982， 2： 185-196.

國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[S]（2020年版二部）. 北京： 中國醫藥科技出版社， 2020： 339-340.

The Japanese PharmacopeiaⅩⅧ[S]. Japanese Pharmacopeia committee， 2021： 681-682.

上官丹罡， 周星辰， 李萇清， 等. 頭孢哌酮鈉及其復方制劑中的有關物質分析[J]. 藥物分析雜志， 2011， 31（10）： 2013-2019.

British Pharmacopoeia Commission. The British Pharmacopoeia 2023[S]. London： The Stationary Office， 2023（Ⅰ）： 473-474.

European Directorate for the Quality of Medicine & Health Care. The European Pharmacopoeia 11.0[S]. Strasboourg： European Directorate for the Quality of Medicines & Health Care， 2022： 2240-2242.

胡昌勤. β-內酰胺類抗生素聚合物雜質控制策略的形成與發展[J]. 中國新藥雜志， 2020， 29（11）： 1231-1244.

符雅楠， 李進， 尹利輝， 等. 頭孢菌素類抗生素聚合物雜質研究進展[J]. 中國抗生素雜志， 2022， 47（2）： 114-121.

張霽， 張英俊， 聶飚. 藥物研發中基因毒性雜質的控制策略與方法探索進展[J]. 中國醫藥工業雜志， 2018， 49（9）： 1203-1220.

李艷斌， 王永莉， 王靜康. 頭孢哌酮鈉結晶工藝的進展[J]. 中國抗生素雜志， 2004， 29（1）： 58-62.

劉建云. 頭孢哌酮鈉在常用輸液中的穩定性及配伍綜述[J]. 廣州化工， 2012， 40（12）： 27-40.

國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[S]. （2020年版四部）. 北京： 中國醫藥科技出版社， 2020： 547-548.

國家藥品監督管理局. 國家食品藥品監督管理總局關于發布化學藥品注射劑與藥用玻璃包裝容器相容性研究技術指導原則（試行）的通告（2015年第40號）[EB/OL].[2015-7-28]https：//www.nmpa.gov.cn/xxgk/ggtg/ypggtg/ypqtggtg/20150728120001551.html.

國家藥品監督管理局. 國家藥品監督管理局關于發布化學藥品與彈性體密封件相容性研究技術指導原則（試行）的通告（2018年第14號）[EB/OL]. [2018-4-26]. https：//www.nmpa.gov.cn/xxgk/ggtg/ypggtg/ypqtggtg/20180426165301393.html.