核桃仁乙醇提取物對AD大鼠的改善作用及機制研究

潘建萍，何春明，龔小嬌，吳琪珍

贛南衛生健康職業學院，江西 贛州 341000

目前AD發病機制尚未明確，臨床尚未形成統一的治療標準。采用安全性高、臨床效果良好的傳統中藥治療的案例越來越多，已成為治療AD的有效方法之一。在《本草綱目》中記載核桃可令人肥健、添腦髓。本研究從分子生物學方面觀察核桃仁對AD模型大鼠學習記憶的改善作用及機制。

1 資料和方法

1.1 比色法測定海馬組織活性物質 大鼠Morris水迷宮檢測完成后，腹腔麻醉并分離海馬組織，嚴格按照試劑盒（南京建成生物研究所）說明書操作步驟測定。

1.2 Western Blot法檢測 將取出海馬稱重，組織勻漿后蛋白提取、定量，并依次進行凝膠電泳、半干膜轉移，加入特異性一抗和熒光標記的二抗，用化學發光法檢測。

2 結果

2.1 各組大鼠海馬組織中p-tauSer404蛋白含量比較Western blot實驗結果：空白組、AD模型組和A、B、C各組大鼠腦內p-tauSer404表達水平標準化后，數值依次為1.06±0.09，3.83±6.49，2.68±0.35，2.36±0.32，1.78±0.25。與模型組相比，A、B、C各組p-tauSer404表達水平降低(P＜0.05)。

2.2 各組大鼠海馬組織中Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表達水平比較 見表1。

表1 核桃仁對AD大鼠海馬組織中Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表達的影響（Mean±SD）

2.3 各組大鼠海馬組織中Ach、ChAT和AchE含量比較 見表2。

表2 核桃仁對 AD 大鼠海馬組織中AchE、ChAT 和Ach影響（Mean±SD）

3 討論

中藥多靶點治療對多病因疾病AD具有廣闊應用前景。核桃是一種益智類的傳統中藥，素有健腦養腦的功效[1]。經研究發現，AD大鼠經核桃仁干預后腦內tau蛋白磷酸化水平降低。AD腦內有神經細胞凋亡發生，Caspase-3在各種因素啟動的凋亡程序中起最后樞紐作用。研究發現，核桃仁通過下調Bax、Caspase-3表達，上調Bcl-2表達抑制神經細胞凋亡。膽堿系統的損傷是與AD最為密切的中樞神經遞質系統改變，本研究發現核桃仁具有雙向正性調節AD大鼠腦內膽堿能系統的作用，這可能是核桃仁改善AD的神經遞質基礎。

綜上所述，核桃仁可改善AD大鼠腦內tau蛋白磷酸化，平衡膽堿系統和抗凋亡作用。