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溶血和脂濁對ELIsA法檢測HBsAg 的影響分析

2020-10-21 11:04閆月明
健康之友·下半月 2020年2期
關鍵詞:影響因素

閆月明

【摘 要】目的:為了探索解決實際工作中ELIsA法檢測HBsAg中溶血和脂濁對ELIsA法檢測HBsAg 的影響。結論:ELISA法檢測HBsAg標本質量很重要,會直接影響檢驗結果,采血要空腹、避免溶血和脂血。從實驗結果可以看出溶血對檢驗結果有一定的影響,可以造成假陰性。脂血對ELISA法檢測HBsAg無影響。

【關鍵詞】ELIsA法;HBsAg;溶血和脂濁;影響因素

【中圖分類號】R446.6 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-8714(2020)02-00-01

乙肝是我國發病率比較高的傳染病,乙肝病毒感染人體后很難消除,HBsAg是感染乙肝病毒在人體最早出現的血清學標志物。目前,臨床用ELIsA法檢測HBsAg,因其靈敏度高,特異性強等優點而受到廣泛應用,但我們在實際工作中碰到結果前后不一致,重復性不好,花板等現象,且結果不因檢測者的改變而穩定?,F對實際工作中各種影響因素,進行如下分析探討:

1 材料與方法

1.1材料 ELISA法檢測 HBsAg試劑為上??迫A公司提供所有試劑均在有效期內。標準品由寧夏臨檢中心提供。

1.2標本來源 本院健康體檢各類人群368例,采集靜脈血,分離血清。

1.3方法? 嚴格按照試劑說明書進行操作,加樣量、水浴溫度、孵育時間、洗板、拍板嚴格操作規程,配置新鮮清洗液,用洗板機洗滌??梢山Y果平行反復2次[1],用標準品對本批次試劑盒進行質量控制,HBsAg陰性、陽性結果均在控。

1.4結果判斷 ELISA雙抗體夾心法檢測HBsAg在檢測線和對照線位置出現兩條紫紅色線結果為陽性,僅在對照線位置出現紫紅色線結果為陰性,試紙條上對照線位置未出現紫紅色結果為無效。

2 結果

2.1人群篩查結果368例檢測標本HBsAg,正常檢測其中陽性35例,陽性率9.5%。

2.2將未溶血無脂血標本35例陽性血樣,人為用清潔竹簽造成溶血后檢測HBsAg,出現3例假陰性,假陰性率為8.7%。

2.3讓35名陽性患者中有復查檢驗結果并且自愿配合的人復檢結果,采集到餐后脂血20份,復查陽性結果符合率為100%。

3 討論

ELISA法檢測HBsAg中溶血和脂濁是臨床檢驗中最常見的干擾因素,從實驗結果可以看出溶血對檢驗結果有一定的影響,可以造成假陰性。原因有可能是實驗中酶標反應孔因為溶血阻礙了實驗出現后帶現象,造成假陰性。脂血對ELISA法檢測HBsAg無影響。[2.3.4]

ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點,但是ELISA法易受到加樣量、反應溫度恒定、反應時間準確、洗滌徹底性等諸多因素的影響,而且操作步驟較多,整個實驗過程至少需要2h左右,在實驗前校正加樣器,保證吸樣量的精確,洗板前,應檢查洗板機針孔有無堵塞,保證孵育時間、水浴溫度穩定。

ELISA法檢測HBsAg標本質量很重要,會直接影響檢驗結果,采血時要空腹、避免溶血和脂血標本,盡量當天標本當天完成,不能完成要及早分離出血清,在冰箱保存??傊?,ELISA實驗的影響因素比較多,在實際工作中要嚴格操作規范,避免各種因素的影響,以保證檢驗結果準確可靠。

參考文獻

[1] 葉應嫵, 王毓三, 申子瑜. 全國臨床檢驗操作規程, 第3版.南京:東南大學出版社, 2006,618-621.

[2] 孫正偉,薛瑞賢.酶聯免疫一步法檢測HBsAg前帶現象的初步探討.中華醫學檢驗雜志,,16(6):279

[3] 周紅妹,黃小虎.ELISA法檢測HBsAg影響因素分析[J].中國熱帶醫學,2006,6(10):1867 .

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